3 Этап. Выявление характерных колоний.

На среде с бромтимоловым синим БТС иерсинии образуют круглые гладкие колонии диаметром 1.5-2 мм голубого цвета с фестончатым краем и выпуклым центром на тёмно-голубом фоне среды. При взятии колонии петлёй она легко сдвигается по поверхности агаровой среды. Колонии других энтеробактерий, не разлагающих мочевину, на этой среде жёлтые, сочные, выпуклые.

Колонии возбудителей псевдотуберкулёза могут быть в R-форме.

На среде Эндо колонии иерсиний мелкие, блестящие, неокрашенные или слегка розоватые (лактозоотрицательные на неизхменённой или даще слегка обесцвеченной поверхности среды.

4. этап. Подтверждение принадлежности выделенных колоний к бактериям рода Yersinia. Для определения принадлежности выделенных микроорганизмов к роду Yersinia полученные чистые культуры окрашивают по Граму, микроскопируют, а также проводят ряд дифференцирующих биохимических тестов.

Возбудители иерсиниоза и псевдотуберкулёза - грамотрицательные, мелкие палочки, являются факультативными аэробами, оксидазоотрицательны, каталазоположительны, ферментируют до кислоты без газа глюкозу, мальтозу, маннит, ксилозу, не ферментируют лактозу, раффинозу, сорбит, дульцит, утилизируют мочевину. Они не расщепляют цитрат и не растут на среде Симмонса.

Возбудители псевдотуберкулёза и иерсиниоза различаются по отношению к рамнозе, сахарозе, целлобиозе, сорбиту, сорбозе и реакции с метиловым красным при 22-25^оС.

При обнаружении культур со свойствами, соответствующими возбудителям иерсиниоза или псевдотуберкулёза, определяют их серовар постановкой серологических реакций на стекле с культурой и диагностическими сыворотками.

Санитарно-показательные микроорганизмы

Непосредственное обнаружение патогенных микробов в объектах внешней среды представляет большие трудности. Поэтому возможное загрязнение внешней среды патогенными микробами определяют на основании косвенного показателя - обнаружения так называемых санитарно-показательных микробов (СПМО).

К санитарно-показательным бактериям относятся представители облигатной микрофлоры организма человека и теплокровных животных, для которых средой обитания является кишечник или респираторный тракт.

В качестве санитарно-показательных микроорганизмов выбраны микроорганизмы, постоянно обитающие на коже или в полостях тела человека и животных, постоянно в большом количестве выделяющиеся во внешнюю среду, не имеющие «двойников» во внешней среде, сохраняющиеся во внешней среде столько же времени, что и патогенные микроорганизмы. Для санитарно-показательных микроорганизмов разработаны простые и надёжные схемы выявления и идентификации.

Обнаружение СПМО свидетельствует о загрязнении объекта внешней среды выделениями человека и животных, а также о возможном присутствии в данном объекте патогенных микробов – возбудителей опасных болезней.

1.Санитарно-показательными микробами, свидетельствующими о фекальном загрязнении окружающей среды, являются:

бактерии группы кишечной палочки (БГКП),

энтерококки,

Cl.perfringens,

Колибактериофаги

2.Санитарно-показательными микроорганизмами, свидетельствующими о воздушно-капельном загрязнении, являются гемолитические стрептококки и Staphylococcus aureus. Их обнаружение свидетельствует о воздушно-капельном загрязнении микробами, содержащимися в носоглотке и верхних дыхательных путях человека и животных.

3. Выявление большого количества гнилостных бактерий рода Proteus, а также термофильных бактерий (Streptococcus thermophilus, Lactobacillus lactis и др.) может указывать на загрязнение почвы и воды разлагающимися отбросами, то есть они являются индикаторами гнилостного загрязнения.

4. Существуют также санитарно-показательные микроорганизмы – показатели промышленного загрязнения (производственные штаммы в биотехнологической промышленности), а также санитарно-показательные микроорганизмы – показатели интенсивности процессов самоочищения воды и почвы.

Практическая работа.

1. Изготовить, окрасить и микроскопировать мазки из культуры непатогенных листерий; иерсиний. Изучить морфологию бактерий в мазках.

2. Изучить культуральные свойства листерий и иерсиний на специальных средах.

3. Произвести посев проб воздуха по Коху (седиментационным методом) в разных помещениях для следующего занятия.

Контрольные вопросы:

1. Чем опасны листерии? Каковы клинические признаки и осложнения листериоза?

2. Чем опасны иерсинии? Каковы клинические признаки псевдотуберкулёза и кишечного иерсиниоза у человека?

3. Какие среды применяются для предварительного накопления и селективного выращивания листерий, иерсиний?

4. Дайте характеристику наиболее важных плотных селективных сред для листерий; иерсиний?

5. Какие биохимические тесты наиболее важны при идентификации листерий; иерсиний?

Коллоквиум № 2 про теме: Микрофлора пищевых продуктов и кормов.