- •Раздел 6 «Проведение лабораторных биохимических исследований по определению показателей липидного обмена»
- •Раздел 7 «Проведение лабораторных биохимических исследований по определению показателей водно-минерального обмена, кислотно-основного состояния»
- •Список сокращений:
- •Содержание.
- •Занятие № 1. Тема: Определение триглицеридов в сыворотке крови.
- •Химия липидов.
- •Занятие № 2. Тема: Определение общего холестерина в сыворотке крови.
- •Занятие № 3. Тема: Определение холестерина липопротеидов высокой плотности в сыворотке крови.
- •Занятие № 4. Тема: Определение липопротеидов методом электрофореза и расчет содержания хс в различных классах лп. Типирование гиперлипопротеидемий.
- •Занятие № 5. Тема: Определение содержания кальция в сыворотке крови.
- •Занятие № 6. Тема: Определение содержания железа в сыворотке крови.
- •Занятие № 7. Тема: Определение содержания натрия, калия, хлоридов в сыворотке крови.
- •Занятие № 8. Тема: Исследование кислотно-основного состояния крови.
- •Занятие № 9. Тема: Анализ результатов исследований минерального обмена.
- •Внешний вид сыворотки.
- •Общие липиды
- •Триглицериды
- •Определение триглицеридов в сыворотке крови с ацетилацетоном.
- •Определение тг ферментативным методом.
- •Бета-липопротеиды
- •Холестерин
- •Определение общего холестерина по методу Илька.
- •Ферментативный метод определения холестерина.
- •Холестерин - лпвп
- •Методы определения хс-лпвп. Метод с осаждением.
- •Лпвп-иммуно.
- •Фосфолипиды
- •Определение общих фосфолипидов в сыворотке крови по содержанию общего фосфора.
- •Аполипопротеин а1.
- •Аполипопротеин в.
- •Липопротеид (а)
- •Методы исследования минерального обмена. Кальций.
- •Определение кальция в биологических жидкостях химическим методом.
- •Железо.
- •Методы определение железа.
- •Батофенантролиновый метод определения содержания железа в сыворотке крови.
- •Определение с феррозином.
- •Определение общей железосвязывающей способности.
- •Натрий.
- •Химический метод определения натрия (набор реактивов фирмы «Ольвекс»).
- •Химический метод определения калия (набор реактивов фирмы «Ольвекс»).
- •Хлориды
- •Химический метод определения хлоридов (по набору реактивов фирмы «Ольвекс»)
- •Фосфор.
- •Определение фосфора колориметрическим методом
Фосфор.
Фосфор - элемент, обмен которого тесно связан с кальцием. Принимает участие в обеспечении организма энергией. 80-85% фосфора входит в состав скелета, остальное количество распределено между тканями и жидкостями организма. Фосфор участвует в образовании нуклеиновых кислот, нуклеотидов, фосфолипидов и других соединений. Концентрация неорганического фосфора ниже 0,3 ммоль\л ведет к нарушению энергетического обмена клеток. Содержание неорганического фосфора в циркулирующей крови зависит от интенсивности всасывания его в кишечнике, функции паращитовидных желез и потребления витамина Д, а также от функции почек, процесса обмена веществ в костной ткани, характера питания. Метаболизм фосфата контролируется паратгормоном, кальцитонином и кальцитриолом.
Нормальное содержание фосфора -1-2 ммоль\л.
Определение фосфора в биологических жидкостях проводится:
Колориметрическим методом;
С помощью ион-селективных электродов.
Определение фосфора колориметрическим методом
Принцип метода:
Фосфат ионы в кислой среде входят в реакцию с молибдат-ионами, образуя фосфомолибдатный комплекс. Абсорбция образовавшегося комплекса, измеряемая при длине волны 340 нм, пропорциональна концентрации неорганического фосфора в пробе.
Исследуемый материал:
Сыворотка крови (без гемолиза);
Плазма гепаринизированная.
Реактивы:
Реактив (молибдат аммония + детергент);
Стандартный раствор.
Условия:
Длина волны: 340 нм
Температура: 20 - 25ºС/37ºС
Время реакции: 5 минут
Ход определения:
№ |
Реактивы (мл) |
Исследуемая проба |
Стандартная проба |
Контрольная проба |
1. 2. 3. |
Реактив Сыворотка Стандарт |
2,00 мл 0,02 мл - |
2,00 мл - 0,02 мл |
2,00 мл - - |
Содержимое пробирок тщательно перемешать. Инкубировать 5 минут. Считать абсорбцию исследуемой пробы (Dпробы) и стандартной пробы (Dст) против контрольной пробы.
Расчет результатов:
Dпробы
Фосфор = --------- * Сст.
Dст
Увеличение содержания фосфора в крови отмечается при:
Приеме больших доз фосфора;
Усиленной мышечной работе;
Заживлении переломов (благоприятный прогноз);
Почечной недостаточности;
Гипервитаминозе витамина Д;
Гиперфункции коры надпочечников.
Гипофосфатемия характерна для:
Неполноценного питания;
Ранней стадии рахита;
Длительного лечения инсулином;
Микседемы;
Гиперфункции паращитовидных желез.
