- •Раздел 6 «Проведение лабораторных биохимических исследований по определению показателей липидного обмена»
- •Раздел 7 «Проведение лабораторных биохимических исследований по определению показателей водно-минерального обмена, кислотно-основного состояния»
- •Список сокращений:
- •Содержание.
- •Занятие № 1. Тема: Определение триглицеридов в сыворотке крови.
- •Химия липидов.
- •Занятие № 2. Тема: Определение общего холестерина в сыворотке крови.
- •Занятие № 3. Тема: Определение холестерина липопротеидов высокой плотности в сыворотке крови.
- •Занятие № 4. Тема: Определение липопротеидов методом электрофореза и расчет содержания хс в различных классах лп. Типирование гиперлипопротеидемий.
- •Занятие № 5. Тема: Определение содержания кальция в сыворотке крови.
- •Занятие № 6. Тема: Определение содержания железа в сыворотке крови.
- •Занятие № 7. Тема: Определение содержания натрия, калия, хлоридов в сыворотке крови.
- •Занятие № 8. Тема: Исследование кислотно-основного состояния крови.
- •Занятие № 9. Тема: Анализ результатов исследований минерального обмена.
- •Внешний вид сыворотки.
- •Общие липиды
- •Триглицериды
- •Определение триглицеридов в сыворотке крови с ацетилацетоном.
- •Определение тг ферментативным методом.
- •Бета-липопротеиды
- •Холестерин
- •Определение общего холестерина по методу Илька.
- •Ферментативный метод определения холестерина.
- •Холестерин - лпвп
- •Методы определения хс-лпвп. Метод с осаждением.
- •Лпвп-иммуно.
- •Фосфолипиды
- •Определение общих фосфолипидов в сыворотке крови по содержанию общего фосфора.
- •Аполипопротеин а1.
- •Аполипопротеин в.
- •Липопротеид (а)
- •Методы исследования минерального обмена. Кальций.
- •Определение кальция в биологических жидкостях химическим методом.
- •Железо.
- •Методы определение железа.
- •Батофенантролиновый метод определения содержания железа в сыворотке крови.
- •Определение с феррозином.
- •Определение общей железосвязывающей способности.
- •Натрий.
- •Химический метод определения натрия (набор реактивов фирмы «Ольвекс»).
- •Химический метод определения калия (набор реактивов фирмы «Ольвекс»).
- •Хлориды
- •Химический метод определения хлоридов (по набору реактивов фирмы «Ольвекс»)
- •Фосфор.
- •Определение фосфора колориметрическим методом
Определение общих фосфолипидов в сыворотке крови по содержанию общего фосфора.
Принцип метода:
Осаждение ФЛ трихлоруксусной кислотой вместе с белками и фотометрическое определение в образовавшемся осадке содержания ФЛ по количеству липидного фосфора.
Аполипопротеин а1.
Аполипопротеин А1 (аро А1) – это основной белковый компонент липопротеинов высокой плотности (ЛПВП), удаляющих ХС из клеток и, таким образом, защищающий от атеросклероза. Эпидемиологические исследования показали обратную зависимость между уровнями ЛПВП (в соответствии с аро А1) и ишемической болезнью сердца (ИБС). В то время как определение общего холестерина и ТГ используется для скрининга коронарного риска, измерение аро А1 вместе с липопротеином (а) и апопротеином В обеспечивает дополнительную полезную информацию о нарушениях липидного обмена и может быть альтернативой измерению ХС-ЛПВП.
Метод определения: иммунотурбидиметрический тест.
Принцип метода:
Определение концентрации аро А1 по конечной точке, фотометрическим измерением реакции антиген-антитело между антителами к человеческому аро А1 и аро А1, находящемуся в образце.
Аполипопротеин в.
Аполипопротеин В (аро В) – это основной белковый компонент липопротеинов низкой плотности (ЛПНП), транспортирующих холестерин в клетки и, таким образом, вносящий свой вклад в формирование атеросклеротических бляшек в артериях. Повышенные уровни аро В неразрывно ассоциируются с ИБС из-за тесной связи между аро В и степенью атеросклероза. В то время как определении ХС и ТГ используется для скрининга коронарного риска, измерение аро В вместе с липопротеином (а) и аполипопротеином А1 обеспечивает дополнительную полезную информацию по различным нарушениям метаболизма ЛП и может быть альтернативой измерению ХС-ЛПНП. Измерения аро В также очень полезны при мониторинге липидопонижающей терапии.
Метод определения: иммунотурбидиметрический тест.
Принцип метода:
Определение концентрации аро В по конечной точке, фотометрическим измерением реакции антиген-антитело между антителами к человеческому аро В и аро В, находящемуся в образце.
Липопротеид (а)
Липопротеин (а) – Lp (а) – это частица, состоящая из ЛПНП, присоединенная к апопротеину (а), которая, в зависимости от изоформ, может иметь разные размеры. Lp (а) считается фактором риска атеросклероза, не зависящем от прочих параметров липидов и таких экзогенных факторов, как диета. Повышенные уровни Lp (а) имеют большое прогностическое значение для ИБС, особенно в сочетании с повышенным ХС-ЛПНП. В то время как определение общего холестерина и ТГ используется в целях скрининга, измерение Lp (а), наряду с ХС-ЛПВП, апопротеинами А1 и В является ценным показателем для дифференциальной диагностики ИБС.
Метод определения: иммунотурбидиметрический тест.
Принцип метода:
Определение Lp (а) по конечной точке, фотометрическим измерением реакции антиген-антитело между антителами к человеческому Lp (а) и Lp (а), находящемуся в образце.
Методы исследования минерального обмена. Кальций.
Около 99% кальция находится в костях. Физиологически активным является ионизированный кальций, постоянно обнаруживаемый в плазме крови. Ионы кальция необходимы для передачи нервного импульса, поддержания мышечного сокращения, свертывания крови, контроля за протеканием некоторых ферментативных реакций, осуществления других жизненно важных функций.
Около 50% кальция плазмы находится в ионизированном виде, 45% представлено в связанном с альбумином состоянии и около 5% - с комплексирующими ионами (фосфат, цитрат). Уровень кальция в плазме определяется балансом ряда процессов: всасывания в кишечнике, перераспределением между клеточным и неклеточным пространствами организма, обмена в костях и выведения почками. Эти процессы контролируются паратгормоном, кальцитонином и кальцитриолом.
На содержание кальция в плазме и других биологических жидкостях оказывают влияние характер питания, состояние эндокринной системы, почек, желудочно-кишечного тракта. Нормальное содержание кальция составляет 2,25 – 2,75 ммоль/л.
Определение кальция в биологических жидкостях проводится следующими методами:
титриметрический (мурексидный) метод. Основное неудобство титриметрического метода состоит в том, что индикаторный переход не всегда удается зафиксировать точно.
Принцип метода:
Содержание кальция в сыворотке крови определяется титриметрическим методом с применением мурексида, который образует с ионами кальция в щелочной среде комплексное соединение, окрашенное в красно-фиолетовый или бледно-розовый цвет (в зависимости от концентрации кальция).
При титровании трилоном Б этот комплекс разрушается и связанный мурексид вновь освобождается, что приводит к появлению его натуральной окраски (фиолетовый или бледно-сиреневый).
2. химический метод с глиоксаль-бис-2-оксианилом. Проведение методики затрудняется нестабильностью формирующегося в щелочной среде комплекса. Наиболее стабильные результаты получаются при временном интервале 6-9 минут. Вместо данного химического реактива могут использоваться и другие реагенты, например α-крезолфталеин комплексон.
3. использование ионселективных анализаторов.
Принцип метода:
Состоит в измерении электрохимического потенциала ионселективного электрода, погруженного в исследуемый раствор. С помощью данного метода возможно надежное определение физиологически активного, ионизированного кальция.
