Холестерин

ХС представляет собой вторичный одноатомный ароматический спирт. Он обнаруживается во всех тканях и жидкостях человеческого организма, как в свободном состоянии, так и в виде сложных эфиров. ХС является важным компонентом клеточных мембран, служит предшественником образования стероидных гормонов и желчных кислот. У практически здоровых людей 2/3 ХС плазмы содержится в составе атерогенных, 1/3 неатерогенных ЛП, свободный холестерин вместе с фосфолипидами составляет основу липидной структуры плазматических и других мембран.

Не менее 10% населения страдает гиперхолестеринемией. Это может привести к серьезным патологическим изменениям сосудистой стенки. Уровень содержания ХС и ТГ являются наиболее важными показателями липидного обмена.

Существует прямая зависимость между увеличением концентрации ХС в плазме и появлением риска атеросклеротического поражения коронарных сосудов.

В норме уровень общего ХС – 3,9-5,2 ммоль/л. При концентрации ХС в диапазоне 5,2-6,5 ммоль/л рекомендуется исследовать содержание ЛПВП-ХС. Больных обследуют спустя 2-4 недели лечения без приостановки диетической и лекарственной терапии; повторяют обследование с интервалом в 3 месяца.

Материалом для исследования служит сыворотка или плазма.

Методы определения ХС многочисленны, значительное распространение получили:

• химический метод (метод Илька) – в настоящее время не используется;

• ферментативный;

• метод «сухой химии».

Определение общего холестерина по методу Илька.

Принцип метода:

Холестерин в присутствии смеси уксусной и серной кислот, а также уксусного ангидрида дает зеленое окрашивание.

Ферментативный метод определения холестерина.

Принцип метода:

Принцип основан на действии фермента холестериноксидазы, в результате чего образуется холестенол и Н₂О₂.

_ХЭ

Э фиры холестерина + Н₂О холестерин + RCOOH

_ХО

Х олестерин + О₂ ∆⁴ холестенон + Н₂О₂

_ПОД

2 Н₂О₂ + 4-аминофеназон + фенол 4(п-бензохинономоноимино)- феназон + 2 Н₂О

(красная окраска)

Интенсивность окраски пропорциональна концентрации общего холестерина в сыворотке крови.

Материал для исследования:

1. Сыворотка крови;

2. Плазма (антикоагулянт – ЭДТА).

Реактивы:

1. Реагент № 1 буфер;

2. Реагент № 2 лиофилизат;

3. Реагент № 3 стандартный раствор холестерина.

Приготовление рабочего реагента:

Растворить содержимое одного флакона № 2 в 50 мл реагента № 1.

Ход определения:

Реактивы (мл)	Холостая проба	Проба	Стандартная проба
Рабочий реагент	2,00 мл	2,00 мл	2,00 мл
Бидистиллированная вода	0,02 мл	-	-
Стандарт	-	-	0,02 мл
Сыворотка крови	-	0,02 мл	-

Смешать инкубировать 10 мин. при температуре 37ºС. Считывать значение абсорбции пробы (D_о) и стандартной пробы (D_ст) против холостой пробы при длине волны 500 нм.

Расчет результатов:

	Dо
С =	--------------	* концентрацию стандарта
	Dст

Клинико-диагностическое значение:

Содержание ХС в значительной степени зависит от пола, возраста, состава пищи (меньше у вегетарианцев).

Повышение содержания ХС может быть физиологическим при эмоциональном возбуждении, беременности и патологическим:

1. первичным – семейная гиперхолестеринемия

2. вторичным при:

   • атеросклерозе;

   • болезнях печени: желтухи при застое желчи, гепатите, билиарном циррозе;

   • болезнях почек: нефротическом синдроме, ХПН;

   • болезнях поджелудочной железы: хроническом панкреатите, злокачественных опухолях;

   • сахарном диабете;

   • гипофункции щитовидной железы;

   • ожирении и т.д.

Снижение концентрации ХС наблюдается при:

• болезнях печени: циррозе в поздней стадии заболевания, острой инфекции печени; инфекциях, связанных с повреждением печени (при синдроме печеночной недостаточности);

• гиперфункции щитовидной железы;

• голодании;

• сепсисе;

• лихорадочных состояниях;

• злоупотреблении алкоголем и т.д.

Исследование содержания ХС целесообразно у пациентов с ранними факторами риска атеросклероза, с заболеваниями сосудов и сердца, ксантомами, гипертонией, ожирением; людей, злоупотребляющих курением; а также при лечении бета-блокаторами, мочегонными и кортикостероидами.

Если в лаборатории исследуют эфирсвязанный ХС, то соотношение эХС/общий ХС = 0,6-0,7. Уменьшение количества эХС происходит параллельно степени нарушения функции печени и резкое снижение эХС является плохим прогностическим признаком, свидетельствующим о глубоком поражении печени.