32 Распред хроматография(бумажная и тонкослойная)

Тонкослойная хроматография (ТСХ) является планарной разновидностью жидкостной хроматографии, в которой подвижная фаза (ПФ) движется в пористой среде слоя адсорбента.

Процесс подобен бумажной хроматографии, но его преимуществом является большая скорость анализа, более высокое качество разделения, и возможность выбора одной из неподвижных фаз, обладающей наиболее подходящими свойствами. В настоящий момент тонкослойная хроматография (ТСХ)является одним из основных методов анализа смесей органических веществ в научных лабораториях и полностью вытеснил бумажную хроматографию.

Самым простым вариантом планарной хроматографии является бумажная хроматография, когда разделение производят с использованием специальной бумаги.

Для разделения используются пластины на основе оксида алюминия и силикагеля. Наиболее распространены пластины на основе силикагеля. Оксид алюминия и силикагель, как правило, размещается на стеклянной, металлической или пластиковой основе. В ряде случаев к сорбенту добавляется флуоресцентный индикатор синего или зелёного цвета.

Аналитическая ТСХ является качественным методом анализа веществ. Необходимо помнить, что интенсивность цвета пятен далеко не всегда является даже приблизительной количественной характеристикой. Такая оценка возможна при использовании универсальных проявителей, тогда детектирование производится визуально либо с помощью денситометра.

Препаративная ТСХ является методом выделения вещества или группы близких веществ из смеси. В этом случае смесь наносится на старт в виде сплошной полосы. Далее отрезается край пластины (или закрывается вся остальная часть) и производится проявление. Часть пластины, соответствущая целевому веществу соскребается, вещество отделяется от адсорбента. Препаративную ТСХ следует использовать, если в лаборатории нет высокоэффективного жидкостного хроматографа.

Бумажная хроматография — метод анализа состава исследуемого образца.

Бумажной хроматографию, как и хроматографию вообще, можно разделить на распределительную, адсорбционную и ионообменную, а также на препаративную и аналитическую. В распределительной бумажной хроматографии можно выделить нормальную и обращённо-фазную хроматографию. В последнем случае (в отличие от нормального подхода)неподвижная фаза более липофильна, чем подвижная. Этот метод применяется для разделения липофильных веществ. В бумажной хроматографии вещества различаются по их относительному положению на бумаге после того, как растворитель пройдёт определённое расстояние. Отношение расстояния, пройденного пятном, к расстоянию, пройденному растворителем стандартно обозначается Rf. Эта величина зависит от вещества, бумаги и природы растворителя. Бумажные хроматограммы могут проявляться в восходящем, нисходящем и горизонтальном токе растворителя, что слабо отражается на их качестве.

Пятна на хроматограммах могут быть обнаружены по цвету, флуоресценции, с помощью химических реакций, для чего бумагу опрыскивают или погружают в различные реагенты, или же по радиоактивности. Идентификацию проводят обычно путём сравнения с образцами с известными величинами Rf или после элюирования, которое сводится к вырезанию зоны, содержащей пятно, и последующему промыванию её соответствующим растворителем.