2.1.2. Способы качественного и количественного определения дубильных веществ в лекарственном растительном сырье

Наиболее распространенным методом выделения дубильных веществ является экстракция горячей водой или спиртоводными смесями с последующей обработкой экстракта растворами солей свинца. Полученные комплексы обрабатывают разбавленными кислотами и выделяют очищенную сумму дубильных веществ. Суммарное извлечение дубильных веществ разделяют на индивидуальные компоненты с помощью различных видов хроматографии: 1) адсорбционной хроматорграфии; 2) ионообменной; 3) распределительной хроматографией на колонках силикагеля; 4) противоточного распределения; 5) гельфильтрации.

Качественный анализ сырья, содержащего дубильные вещества, основан на их способности образовывать окрашенные продукты с солями железа (III), осадки с солями тяжелых металлов, алкалоидами и белками. В частности, конденсированные дубильные вещества дают с раствором железоаммонийных квасцов черно-зеленую окраску и осадки с бромной водой.

Гидролизуемые дубильные вещества дают с раствором железоаммонийных квасцов черно-синюю окраску, и при взаимодействии с нитратом аммония в кислой среде - коричневое окрашивание.

Для установления структуры дубильных веществ пользуются спектральными методами (УФ-, ИК-спектроскопии), а также применяют методы ферментативного и кислотно-щелочного гидролиза.

Дубильные вещества способны к реакциям окисления-восстановления, что позволяет широко применять методы оксидиметрии для их определения их количественного содержания.

Все методы количественного определения можно разделить на четыре основные группы:

1. Гравиметрические методы - основаны на количественном осаждении дубильных веществ желатином, солями тяжелых металлов или адсорбцией кожным порошком. В технических целях наиболее широко используется последний метод (весовой единый метод - ВЕМ). Основан на способности дубильных веществ осаждаться на поверхности кожного порошка из экстрактов. В дальнейшем, по разности массы сухого остатка экстракта, обработанного кожным порошком, и необработанного, судят о количественном содержании дубильных веществ в сырье.

2. Титриметрический - основан на окислительных реакциях. Этот метод (перманганатометрии) включен в ГФ Х и ГФ XI. [73]

3. Фотоколориметрические — основаны на цветных реакциях с солями окисного железа, фосфорновольфрамовой кислоты и т. д.

4. Методы нефелометрические, хроматоспектрофотометрические - используются в основном в исследовательских целях.

Вяжущий и противовоспалительный эффект дубильных соединений основан на их взаимодействии с белковыми веществами и образовании на слизистых оболочках защитной пленки, препятствующей дальнейшему развитию воспалительного процесса. Дубильные вещества, нанесенные на обожженные места, ссадины и раны, свертывают белки с образованием защитной пленки, чем объясняется их использование как кровоостанавливающих, рано- и ожогозаживляющих средств. [2]

2.2. Органические кислоты

2.2.1. Способы качественного и количественного определения органических кислот

Органические кислоты являются постоянными составными частями растений. Содержатся они во всех органах растений, причем могут находится в свободном состоянии или в виде солей. Кислоты определяют не только вкус, но и запах растений. Наиболее распространены в растениях яблочная кислота, щавелевая, винная, аскорбиновая кислоты.

Учитывая высокую активность аскорбиновой кислоты, многие авторы выделяют ее определение. Кислота аскорбиновая (витамин С) является противоцинготным фактором. В химическом отношении представляет собой g-лактон-2,3-дегидро-a-гулоновую кислоту.

Кислота аскорбиновая синтезируется растениями и большинством животных, человек не способен синтезировать витамин С и должен получать его с пищей. Главным свойством кислоты аскорбиновой является ее окислительно-восстановительная функция, т. е. способность обратимо окисляться и восстанавливаться. В организме человека кислота аскорбиновая выполняет ряд важнейших функций: она участвует в регулировании углеводного, белкового, липидного обменов, в регенерации тканей, образовании стероидных гормонов, нормализации проницаемости капилляров.

Наиболее распространенным методом качественного определения органических кислот является хроматография. Разделение органических кислот проводят в системе растворителей н-бутанол - кислота муравьиная - вода (250:25:297). В качестве проявителя используют бромфеноловый синий. Хроматографическое определение сырья на присутствие кислоты аскорбиновой проводят в системе этилацетат - кислота ледяная уксусная (80:20), используя в качестве проявителя раствор 2,6-дихлорфенолиндофенолята натрия.

Количественное определение органических кислот проводят титриметрически, титруя свободные органические кислоты и связанные (после гидролиза). В качестве титранта используют растворы едкого натра. Точку эквивалентности определяют по индикаторам: раствором фенолфталеина и метиленового синего. Для определения кислоты аскорбиновой в плодах шиповника используют 0,001 М раствор 2,6-дихлорфенолиндофенолята натрия.