7.2. Изучение антиоксидантной активности жидкого экстракта из корней шиповника собачьего
Антиоксидантные свойства жидкого экстракта из корней шиповника собачьего устанавливали по его способности ингибировать патологическое перекисное окисление липидов: восстанавливать активность компонентов защитной системы клетки и снижать содержание продуктов перекисного окисления липидов (ПОЛ).
Для исследования антиоксидантной активности использовали модельную систему, представляющую собой суспензию липопротеидов желтка куриных яиц. Выбранная модель имеет ряд преимуществ: она доступна, стабильна при хранении и вместе с тем обладает высокой окисляемой способностью.
Суспензию желточных липопротеидов получали путем гомогенизирования желтка куриного яйца в равном объеме фосфатного буфера (рН 7,45). Перед использованием суспензию разводили в 25 раз тем же буфером.
Метод определения: к 0,7 мл фосфатного буфера добавляли 50 мкл исследуемого материала и 0,15 мл суспензии желточных липопротеидов. ПОЛ во всех пробах индуцировали 0,1 мл 25 мл железа (II) сульфата в 0,002М кислоте хлористоводородной; конечный объем пробы составлял 1 мл. В нулевую пробу добавляли только фосфатный буфер и раствор железа (II) сульфата. Контрольная проба не содержала исследуемого вещества. Пробы инкубировали при 37°С в течении 15 минут при интенсивном перемешивании. Скорость ПОЛ определяли по количеству накопленных продуктов, реагирующих с тиобарбитуровой кислотой (ТБК). Процесс окисления липидов останавливали, приливая к каждой пробе по 0,5 мл 25% кислоты трихлоруксусной. Затем содержимое пробирок перемешивали и центрифугировали 15 мин при 3000 об/мин на центрифуге ОПН-3. К полученному супернатанту добавляли 1 мл 0,5% ТБК в растворе 0,5 М натрия сульфата. Смесь инкубировали в кипящей водяной бане в течении 15 мин. Далее пробирки охлаждали, погружая в воду со льдом и после интенсивного встряхивания измеряли оптическую плотность контрольной и опытной проб против нулевой пробы при длине волны 532 нм. Антиоксидантную активность жидкого экстракта из корней шиповника собачьего выражали в % ингибирования ПОЛ по формуле (40):
(40)
;
, (41)
где: Дк° и Доп° - оптическая плотность до инкубации;
Дк и Доп - оптическая плотность после 15 мин инкубации.
Таблица 24 - Антиоксидантная активность жидкого экстракта из корней шиповника собачьего.
№ п/п |
ΔДоп |
АОА, % |
Метрологические характеристики |
1 |
0,229 |
71,5 |
S = 0,230217 = 0,102959 ΔХ = 0,208538 ±ΔХ=71,46±0,228796 ε = ± 0,32% |
2 |
0,227 |
71,8 |
|
3 |
0,231 |
71,3 |
|
4 |
0,232 |
71,2 |
|
5 |
0,229 |
71,5 |
|
ΔДк |
0,804 |
= 71,46 |
Таким образом, в результате полученных данных можно сделать вывод, что антиоксидантная активность жидкого экстракта из корней шиповника собачьего достаточно высокая и составляет 71,46 ± 0,32%.
ВЫВОДЫ ПО ГЛАВЕ
1. Установлено, что жидкий экстракт из корней шиповника собачьего обладает выраженным антибактериальным действием в отношении грамположительных кокков рода Staphylococcus, спорообразующих микроорганизмов рода Bacillus, возбудителей дизентерии (Shigella flexneri, Shigella sonnei) и Pseudomonas aeruginosa и бактериостатическим действием в отношении таких штаммов энтеробактерий, как Escherichia coli 675, Escherichia coli 055, Salmonella typhimurium.
2. Выявлено влияние жидкого экстракта из корней шиповника собачьего на интенсивность Fe2+-индуцированного перекисного окисления липидов в суспензии желточных липопротеидов, которое составляет 71,46 ± 0,32%.
ОБЩИЕ ВЫВОДЫ
1. Изучено морфолого-анатомическое строение корней шиповника собачьего Rosa canina L., определены диагностические признаки.
2. Установлены товароведческие показатели сырья: влажность - 9,63%, общая зола - 2,86%, зола нерастворимая в 10 % кислоте хлористоводородной - 1,05%. Наибольшее содержание экстрактивных веществ установлено при экстрагировании 40% спиртом этиловым - 23,62%.
3. Выявлено наличие в корнях шиповника собачьего Rosa canina L. следующих биологически активных соединений: водорастворимых полисахаридов - 5,29%, пектиновых веществ - 8,10%, гемицеллюлозы А - 1,29%, гемицеллюлозы В - 0,91%, полисахаридов в пересчете на глюкозу и абсолютно сухое сырьё – 0,65%, кислоты аскорбиновой - 0,262%, суммы органических кислот - 8,06%, аминокислот -3,788%, суммы дубильных веществ - 10,76%, танина – 1,46%, сапонинов - 4,66%, микроэлементного состава.
4. Определены условия экстракции корней шиповника собачьего Rosa canina L. Разработана технологическая схема производства и проведена экспериментальная наработка экстракта шиповника собачьего жидкого. Установлена фактическая эффективность экстрагирования сырья. Относительная эффективность экстракции составляет 0,95.
5. Определены нормы качества в исследуемом экстракте жидком по содержанию суммы дубильных веществ(4,92%), танина (0,744%), спирта этилового (67,83%), сухого остатка (6,57%).
6. Экспериментально получены данные о выраженном антибактериальном действии жидкого экстракта из корней шиповника собачьего.
7. Выявлено влияние исследуемого экстракта на интенсивность Fe2+-индуцированного перекисного окисления липидов в суспензии желточных липопротеидов.