- •Содержание
- •Глава 5. Разработка технологии жидкого экстракта из корней шиповника собачьего rosa canina l.
- •Глава 6. Определение норм качества жидкого экстракта из корней шиповника собачьего rosa canina l.
- •6.5.1. Количественное определение дубильных веществ перманганатометрическим методом
- •Глава 7. Изучение фармакологической активности жидкого экстракта из корней шиповника собачьего rosa canina l.
- •Часть I. Обзор литературы
- •Глава 1. Общие сведения о шиповнике собачьем rosa canina l.
- •1.1. Краткая ботаническая характеристика семейства Rosaceae и рода Rosa l.
- •1.2. Ботанико-систематическая характеристика и географическое распространение Rosa canina l.
- •1.3. Химическая изученность шиповника собачьего Rosa canina l.
- •1.4. Применение в медицине и народном хозяйстве сырья шиповника собачьего Rosa canina l.
- •Глава 2. Основные группы биологически активных веществ и методы их выявления
- •2.1. Дубильные вещества
- •2.1.1. Общая характеристика дубильных веществ. Классификация
- •2.1.2. Способы качественного и количественного определения дубильных веществ в лекарственном растительном сырье
- •2.2. Органические кислоты
- •2.2.1. Способы качественного и количественного определения органических кислот
- •2.3. Полисахариды
- •Глава 3. Теоретические основы технологии суммарных препаратов
- •3.1. Общие сведения о суммарных препаратах
- •3.1.1. Определение и классификация суммарных препаратов
- •3.2. Общие сведения об экстрактах
- •3.2.1. Определение, классификация
- •3.2.2. Способы получения жидких экстрактов
- •3.2.3. Характеристика технологических констант необходимых при экстрагировании
- •3.2.4. Нормирование качества жидких экстрактов
- •Часть II. Собственные исследования
- •Глава 4. Товароведческий анализ и фитохимическое исследование корней шиповника собачьего rosa canina l.
- •4.1. Морфолого-анатомическое изучение корней шиповника собачьего Rosa canina l.
- •4.2. Товароведческие показатели сырья
- •4.2.1. Определение влажности
- •4.2.2. Определение общей золы
- •4.2.3. Определение золы, нерастворимой в 10% кислоте хлористоводородной
- •4.2.4. Определение экстрактивных веществ
- •4.3. Идентификация биологически активных веществ в корнях шиповника собачьего Rosa canina l.
- •4.3.1. Определение органических кислот
- •4.3.2. Определение дубильных веществ
- •4.3.3. Определение кислоты аскорбиновой
- •4.3.4. Определение полисахаридов
- •4.3.5. Определение белка и аминокислот
- •4.3.6. Определение сапонинов
- •4.4. Определение количественного содержания биологически активных веществ в корнях шиповника собачьего Rosa canina l.
- •4.4.1. Количественное определение суммы свободных органических кислот
- •4.4.2. Количественное определение дубильных веществ
- •4.4.2.1. Количественное определение дубильных веществ перманганатометрическим методом
- •4.4.2.2. Количественное определение дубильных веществ (танина) методом вэжх
- •4.4.3. Количественное определение кислоты аскорбиновой
- •4.4.4. Количественное определение сапонинов
- •4.4.5. Количественное определение микроэлементного состава
- •4.4.6. Количественное определение полисахаридов
- •4.4.6.1. Количественное определение полисахаридов гравиметрическим методом
- •4.4.6.2. Количественное определение полисахаридов в пересчёте на безводную глюкозу (спектрофотометрический метод)
- •4.4.7. Количественное определение аминокислот
- •4.4.7.1. Количественное определение аминокислотного состава
- •4.4.7.2. Количественное определение суммы аминокислот в пересчёте на аланин (спектрофотометрический метод)
- •Глава 5. Разработка технологии жидкого экстракта из корней шиповника собачьего rosa canina l.
- •5.1. Определение технологических показателей качества корней шиповника собачьего Rosa canina l.
- •5.2. Выбор оптимальных размеров частиц сырья экстрагента
- •5.3. Определение условий экстракции растительного сырья
- •5.3.1. Определение времени наступления равновесной концентрации в системе экстрагент—сырьё
- •5.3.2. Разработка способа расчета числа диффузоров в батарее
- •5.4. Установление расходных норм на растительное сырьё и экстрагент
- •5.5. Разработка технологической схемы жидкого экстракта из корней шиповника собачьего
- •Технологическая схема производства жидкого экстракта из корней шиповника собачьего
- •5.6. Сопоставление фактической и теоретической эффективности экстракции
- •Глава 6. Определение норм качества жидкого экстракта из корней шиповника собачьего rosa canina l.
- •6.1. Определение тяжёлых металлов
- •6.2. Определение сухого остатка
- •6.3 Определение содержания этилового спирта
- •6.4. Определение подлинности жидкого экстракта из корней шиповника собачьего
- •6.5. Количественное определение содержания дубильных веществ в жидком экстракте из корней шиповника собачьего
- •6.5.1. Количественное определение дубильных веществ перманганатометрическим методом
- •6.5.2. Количественное определение дубильных веществ (танина) методом вэжх
- •Глава 7. Изучение фармакологической активности жидкого экстракта из корней шиповника собачьего rosa canina l.
- •7.1. Изучение антимикробной активности жидкого экстракта из корней шиповника собачьего
- •7.2. Изучение антиоксидантной активности жидкого экстракта из корней шиповника собачьего
- •Список литературы
- •Аминокислотный состав шиповника собачьего (Rosa canina l.) корней / в.Н. Кисилева, н.В.Кобыльченко, н.Н. Вдовенко-Мартынова, а.Н Сепп //
Глава 7. Изучение фармакологической активности жидкого экстракта из корней шиповника собачьего rosa canina l.
7.1. Изучение антимикробной активности жидкого экстракта из корней шиповника собачьего
Определение антимикробного действия жидкого экстракта из корней шиповника собачьего проводили методом диффузии в агар (способ «колодцев»).
Метод основан на оценке угнетения роста тест-микроорганизмов определенными концентрациями испытуемого средства.
Для проверки антимикробной активности мы использовали 24-часовые тест-культуры, выращенные на скошенном мясопептонном агаре (МПА). Микробные культуры с МПА смывали 2-3 мл физиологического раствора и готовили взвесь, содержащую 500 млн. микробных тел в 1 мл по стандарту мутности.
На поверхность агара в чашках Петри одинакового диаметра делали посев сплошным газоном стандартных взвесей используемых тест-культур. Для этого 2 мл взвеси помещали в чашку Петри, взвесь равномерно распределяли по поверхности, а излишки взвеси полностью удаляли. Стерильным сверлом диаметром делали лунки («колодцы») на расстоянии 2,5 см от центра и на одинаковом расстоянии друг от друга. Под крышку чашки Петри помещали стерильный фильтр во избежание попадания конденсата на лунки. В качестве контроля использовали спирт этиловый 40%. Все чашки Петри ставили в термостат (37°С) на 18-20 часов строго горизонтально для получения круглых зон угнетения роста микрофлоры.
После инкубации диаметр зон угнетения роста измеряли с помощью миллиметровой линейки. Оценка результатов проводилась по диаметру зон задержки роста тест-культур микроорганизмов вокруг «колодца», включая диаметр самого «колодца»:
отсутствие зоны задержки роста - испытуемая культура не чувствительна к жидкому экстракту из корней шиповника собачьего;
диаметр зоны задержки роста 10 мм - умеренная чувствительность культуры к жидкому экстракту из корней шиповника собачьего;
диаметр зоны задержки роста более 10 мм - высокая чувствительность испытуемой культуры к жидкому экстракту из корней шиповника собачьего.
Результаты определения антимикробного действия жидкого экстракта из корней шиповника собачьего представлены в таблице 23.
Таблица 23 - Антимикробное действие жидкого экстракта из корней шиповника собачьего
№ п/п |
Диаметр зоны задержки роста тест-культур микроорганизмов, мм |
|||
Жидкий экстракт |
Жидкий экстракт – вода (1:1) |
Спирт этиловый 40% |
Спирт этиловый 40% - вода (1:1) |
|
1 |
12 |
10 |
– |
– |
2 |
14 |
11 |
– |
– |
3 |
12 |
10 |
– |
– |
4 |
– |
– |
– |
– |
5 |
– |
– |
– |
– |
6 |
– |
– |
– |
– |
7 |
14 |
12 |
– |
– |
8 |
16 |
14 |
– |
– |
9 |
11 |
8 |
– |
– |
10 |
11 |
9 |
– |
– |
11 |
23 |
19 |
– |
– |
В качестве тест-культуры использовали:
1. Staphylococcus aureus (209)
2. Staphylococcus aureus (Type)
3. Staphylococcus epidermidis Wood-46
4. Escherichia coli 675
5. Escherichia coli 055
6. Salmonella typhimurium
7. Shigella flexneri
8. Shigella sonnei 3d
9. Bacillus subtilis L2
10. Bacillus anthracoides - 1
11. Pseudomonas aeruginosa
Результаты проведенных микробиологических исследований свидетельствуют, что жидкий экстракт из корней шиповника собачьего обладает выраженным антибактериальным действием в отношении грамположительных кокков рода Staphylococcus, спорообразующих микроорганизмов рода Bacillus, возбудителей дизентерии (Shigella flexneri, Shigella sonnei) и Pseudomonas aeruginosa. Разбавление жидкого экстракта из корней шиповника собачьего в два раза привело к незначительному уменьшению антимикробной активности. В отношении таких штаммов энтеробактерий, как Escherichia coli 675, Escherichia coli 055, Salmonella typhimurium выявлено бактериостатическое действие.