4.3.3. Определение кислоты аскорбиновой

Хроматографическое определение кислоты аскорбиновой в корнях шиповника собачьего Rosa canina L. проводили с использованием бумажной хроматографии восходящим методом в системе растворителей н - бутанол - кислота уксусная - вода в соотношении (4:2:1). Хроматограмму проявляли, опрыскивая ее 0,04% водным раствором 2,6-дихлорфенолиндофенолята натрия. Кислота аскорбиновая проявлялась в виде белого пятна на розовом фоне. Определяли R_f, которое составило 0,37, что соответствует кислоте аскорбиновой. Данные представлены на рисунке 10.

	Рисунок 10 - Хроматографическое определение кислоты аскорбиновой в корнях шиповника собачьего Rosa canina L. в системе: н-бутанол - кислота уксусная - вода (4:2:1) 1) извлечение из корней шиповника собачьего Rosa canina L.; 2) " свидетель " – кислота аскорбиновая.

4.3.4. Определение полисахаридов

2 г измельчённого сырья заливали 30 мл воды очищенной и нагревали на кипящей водяной бане в течение 30 минут. Извлечение фильтровали и с фильтратом проводили следующие реакции:

1) Реакция со спиртом этиловым

К 5 мл фильтрата прибавляли 15 мл 95% спирта этилового. Образовывался кремоватый осадок.

2) Реакция с ацетоном

К 5 мл фильтрата прибавляли 5 мл ацетона. Наблюдали образование аморфного осадка.

3) Реакция с реактивом Фелинга после гидролиза

К 1 мл фильтрата прибавляли 1 мл кислоты хлористоводородной и осторожно нагревали до кипения. После охлаждения приливали к реактиву Фелинга. Наблюдали кирпично-красное окрашивание.

Результаты проведенных реакций свидетельствуют о наличии полисахаридов в корнях шиповника собачьего Rosa canina L.

4.3.5. Определение белка и аминокислот

• Биуретова проба на пептидную связь. В пробирку помещали 0,5 мл водного извлечения, прибавляли несколько капель биуретового реактива, слегка взбалтывали, наблюдали появление сине-фиолетового окрашивания.

• Нингидриновая реакция на a-аминокислоты. В пробирку вносили 0,5 мл водного извлечения прибавляли несколько капель 3 % спиртового раствора нингидрина, нагревали до кипения, наблюдали появление сине-фиолетового окрашивания.

4.3.6. Определение сапонинов

2 г измельчённого сырья (корней шиповника собачьего Rosa canina L.) помещали в круглодонную колбу и заливали 20 мл воды очищенной и нагревали на водяной бане 10 минут. Охлажденное извлечение фильтровали через бумажный фильтр и проводили с ним описанные ниже реакции:

1) Реакция пенообразования

10 мл фильтрата помещали в одну пробирку, в другую – 10 мл воды (контроль). Обе пробирки одновременно энергично встряхивали в течение 1 минуты, отмечали образование стойкой пены в пробирке с фильтратом;

2) Реакция с раствором свинца ацетата

К 2 мл извлечения прибавляли несколько капель ацетата свинца. Выпадал жёлто-зелёный осадок;

3) Реакция с 1% спиртовым раствором холестерина

К 1 мл извлечения прибавляют несколько капель 1% спиртового раствора холестерина. Выпадал желтоватый осадок;

4) Проба Фонтан – Кандела

Брали 2 пробирки, в одну прилили 5 мл 0,1 М кислоты хлороводородной, в другую - 5 мл 0,1 М раствора гидроксида натрия. Затем в обе пробирки добавляли по 3 капли водного извлечения и энергично встряхивали. В обеих пробирках образовывалась пена, равная по объёму и стойкости, что свидетельствует о наличии тритерпеновых сапонинов.