4.3. Идентификация биологически активных веществ в корнях шиповника собачьего Rosa canina l.

4.3.1. Определение органических кислот

Для доказательства наличия органических кислот в корнях шиповника собачьего Rosa canina L. использовали бумажную хроматографию.

1 г сырья помещали в колбу, вместимостью 20 мл, прибавляли 10 мл смеси эфира диэтилового и ацетона (2,5:7,5), закрывали пробкой, взбалтывали 30 минут - для экстрагирования свободных органических кислот. Для определения свободных и связанных в виде солей органических кислот, добавляли несколько капель 20%- ного раствора кислоты серной. Раствор фильтровали в фарфоровую чашку, выпаривали. Сухой остаток растворяли в 1 мл воды очищенной. Хроматографический анализ проводили на бумаге восходящим методом в системе н - бутанол - кислота муравьиная - вода (250:25:297). В качестве свидетелей использовали 1% спиртовые растворы щавелевой, янтарной, винной, лимонной, яблочной кислот. Проявляли хроматограммы 0,1%-ным раствором бромфенолового синего в 96% спирте этиловом (рН 6,7). При проявлении органические кислоты окрашиваются в ярко - желтый цвет на голубовато-синем фоне. Идентификацию органических кислот проводили по величинам R_f, сопоставляя с R_f кислот свидетелей. Данные представлены на рисунке 9.

Рисунок 9 - Хроматографическое определение органических кислот в корнях шиповника собачьего Rosa canina L. в системе: н- бутанол - кислота муравьиная -вода (250:25:297) 1 - извлечение из корней Rosa canina L.; 2 - кислота винная (Rf 0,41); 3 - кислота лимонная (Rf 0,47); 4 - кислота яблочная (Rf 0,37); 5 - кислота щавелевая (Rf 0,49); 6 - кислота янтарная (Rf 0,69).

Результаты хроматографического анализа свидетельствуют о наличии в корнях шиповника собачьего - винной, щавелевой, лимонной, яблочной и янтарной кислот.

4.3.2. Определение дубильных веществ

2 г измельчённого сырья (корней шиповника собачьего Rosa canina L.) помещали в круглодонную колбу и заливали 20 мл воды очищенной и нагревали на водяной бане 30 минут. Охлажденное извлечение фильтровали через бумажный фильтр. С фильтратом проводили следующие реакции:

1) Реакция с железоаммониевыми квасцами. При добавлении к 2 мл фильтрата 4 -5 капель раствора железоаммониевых квасцов, появлялось черно-синее окрашивание. Что свидетельствует о наличии гидролизуемых дубильных веществ.

2) Реакция с раствором желатина. К 2 мл фильтрата прибавляли по каплям 1 % раствор желатина. Появлялась муть, исчезающая при добавлении избытка желатина

3)Реакция с раствором хинина сульфата. К 2 мл фильтрата прибавляли несколько капель раствора хинина сульфата. Выпадал аморфный осадок.

4)Реакция с ацетатом свинца. К 1 мл фильтрата добавляли 2 мл 10% кислоты уксусной и 1 мл 10% соли ацетата свинца. Выпадал осадок жёлтого цвета.

Результаты реакций свидетельствуют о наличии гидролизуемых дубильных веществ в корнях шиповника собачьего Rosa canina L.