Бактериологическое исследование молока

Для бактериологической оценки молока необходимо установить: 1) сте­пень его микробного загрязнения (количественный анализ) и 2) качествен­ный состав его микрофлоры.

Технология и гигиена молока и молочных продуктов 337

Для исследования в широкие пробирки наливают по 20 мл среды и по­мещают бродильные трубочки. Для анализа пастеризованного молока ста­вят шесть пробирок, содержащих среду, с добавлением в них по 1 мл молока, и три пробирки с добавлением по 0,1 мл молока. Выращивание происходит при 42—43° и длится 48 часов. Изменение окраски среды и газообразование говорят за присутствие кишечной палочки. В дальнейшем делают посев на среду Эндо, выделяют чистые культуры и микроскопируют с окраской по Граму.

За типичную кишечную палочку считается микроб: 1) морфологически соответствующий b. coli commune, 2) подвижный, хотя бы и слабо, 3) грамотрицательный, 4) сбраживающий с образованием газа и кислоты лактозу, 5) не разжижающий желатину, 6) образующий индол.

Результаты учитывают следующим образом: а) если ни в одной из пробирок газообразования не обнаружено, то титр считают превышающим 3 мл; если в одной из пробирок с 1 мл продукта выявлены признаки брожения, то титр принимают за 3 мл; если брожение отмечено более чем в одной про­бирке с 1 мл продукта или хотя бы в одной из пробирок с 0,1 мл, то титр считают равным 0,3 мл; если же брожение установлено во всех пробирках с посевами обоих разведений, а также в том случае, если забродили три про­бирки одного (любого) разведения и две от другого, то титр меньше 0,3 мл;

б) для молока непастеризованного, мало загрязнённого ставят 10 про­ бирок с добавлением по 1 мл молока, три пробирки с добавлением по ОД мл и три пробирки с добавлением по 0,01 мл молока;

в) для загрязнённого молока в каждые три пробирки добавляют по 1 мл, по 0,1 мл, по 0,01 мл, по 0,001 мл и по 0,0001 мл молока.

Для удобства точного отмеривания предварительно делают разведение молока 1:10, 1: 100, 1: 1 000 и 1 : 10 000 и добавляют по 1 мл разведения. Для каждого разведения берут особую стерильную пипетку.

Определение болезнетворных микробов. Выявление присутствия болез­нетворных микроорганизмов, а из них прежде всего бактерий туберкулё­за—весьма важный момент для санитарной оценки молока. Для этого пред­ложено несколько методов.

1. 25 мл молока смешивают с 2 мл аммиака, 50 мл петролейного эфира и 50 мл серного эфира; смесь взбалтывают. После отстаивания нижний слой отсасывают и центрифугируют. Мазок из осадка окрашивают одним из спо­собов, принятых для туберкулёзных палочек.

2. К 5 мл молока добавляют 5 мл алкоголя, 10 мл антиформина и 25 мл физиологического раствора. Молоко взбалтывают и центрифугируют в те­чение 30 минут; мазок из осадка красят по Цилю—Нильсену—Эрлиху.

3. Толстый мазок молока: 1) красят карболфуксином Циля 2 минуты с подогреванием до появления пузырьков, 2) опускают в 10% азотную кислоту на 15 секунд, 3) промывают водой, 4) опускают в 10% азотную кислоту на 10 секунд или больше—до обесцвечивания, 5) промывают водой, 6) обраба­тывают смесью равных частей насыщенного водного раствора пикриновой кислоты и спирта 30 секунд, 7) промывают водой и просушивают. Туберку­лёзные палочки окрашиваются в красный цвет, фон—в ровный слабо­жёлтый.

Необходимо помнить, что всеми этими способами выявляются кислото­упорные бактерии, в молоке же часто встречаются непатогенные кисло­тоупорные бактерии. Присутствие туберкулёзных бактерий можно подо­зревать, когда кислотоупорных бактерий много и часть их находится внутри лейкоцитов.

Наиболее верными способами определения бактерий туберкулёза явля­ются прививка молока морским свинкам (трём—из осадка, трём—из жиро­вого слоя молока) и посев на специальные среды (см. курс бактериологии).

Ветсанэкспертиза молока и молочных продуктов 338