2. Порядок выполнения работы.

ЗАДАНИЕ 1. Определение концентрации раствора сахара на поляриметре (модели П-161 и 829).

1. Установите прибор перед источником света и поворачивая осветительное зеркало 4 (рис.9), направьте свет в прибор. Добейтесь максимальный и равномерной освещенности поля зрения.

2. Вращением муфт 1 окуляра и муфты 2 отсчетной лупы (рис.8) установите на резкость линии раздела поля зрения (рис.10) и шкалу анализатора (рис.11).

3. Поворотом анализатора 3 (рис.8) добейтесь получения одинаковой освещенности во всех частях поля зрения (рис. 10б). Сделайте отсчет (нулевая установка). Отсчет должен быть близким к нулю. Затем сбить положение анализатора (поворачивая его влево или вправо) и вновь добиться получения одинаковой освещенности. Снять отсчет. Опыт повторить не менее 3-5 раз. Средняя величина из 3-5 отсчетов являются нулевым отсчетом прибора или поправкой на «0».

4. Поместите кювету В с раствором сахара в трубку Б прибора (рис.8) и повторите пункт 3. Сделайте отсчет .

5. Результаты измерений и вычислений занесите в таблицу 1.

6. Определите концентрацию раствора сахара по формуле:

С = 2 ( ) % (1)

7. Сделайте выводы.

Таблица 1

Результаты эксперимента

№ п/п			С,%	, %	Ес, %
1. 2. 3. 4. 5.
Сред.

Лабораторная работа № 25

ОПРЕДЕЛЕНИЕ СПЕКТРА ПОГЛОЩЕНИЯ БЕЛКА

ЦЕЛЬ РАБОТЫ: исследование поглощения света различными веществами.

ПРИБОРЫ И ПРИНАДЛЕЖНОСТИ: спектрофотометр СФ-26 (или аналогичный спектрофотометр), раствор сыворочного альбумина (яичного альбумина или пенсина) в воде.

5. Краткие теоретические сведения

Поглощение (абсорбцией) света называется явление уменьшения энергии световой волны при ее распространении в веществе вследствие преобразования энергии волны в теплоту и другие виды энергии. Это происходит одновременно с рассеянием света. Рассеяние света происходит в средах при условии, что размеры неоднородностей соизмеримы с длиной волны света. При рассеянии света энергия сохраняет свою электромагнитную природу.

Поглощение света в веществе описывается законом Бугера:

, (1)

где J₀ и J – интенсивности плоской монохроматической световой волны на входе и выходе слоя вещества толщиной d;  - коэффициент поглощения зависящий от длины волны  света, химической природы и состояния вещества и не зависящий от интенсивности света. При интенсивность света J по сравнению с J₀ уменьшается в «е» раз (т.е.  2,72 приблизительно в три раза).

Показатель поглощения характеризуется поглощательную способность вещества.

Постепенное убывание интенсивности света при прохождении через среду вследствие рассеяния также подчиняется закону Бугера, формула (1) которого с учетом поглощения и рассеяния принимает вид:

, (2)

где -  - показатель ослабления света вследствие рассеяния.

Исследования поглощения монохроматического света растворами окрашенных веществ (при условии, что расворитель не поглощает света данной длины волны и раствор имеет невысокую концентрацию). Бер показал, что оно также подчиняется закону Бугера.

Закон Бера гласит:

«показатель поглощения  прямо пропорционален концентрации вещества в растворе:

, (3)

где х – показатель поглощения для раствора единичной концентрации». Для разных веществ зная (3) и (1) имеем:

- закон Бугера-Бера (4)

или в системе десятичных логарифмов

, где .

Отношение - называют коэффициентом пропускания или прозрачностью, а величину - оптической плотностью. Учитывая выше приведенную формулу оптическая плотность раствора

D = xcd (5)

где D – оптическая плотность,

с – концентрация вещества,

х – коэффициент экстинкции х = 0,434х^’.

На практике закон Бугера-Бера выполняется в некоторых пределах, концентрации (до значения оптической плотности D=0,3 до D=1,5. Эти условия подбирают, изменяя концентрацию или длину оптического пути (толщину кюветы).

Оптическая плотность раствора зависит от длины волны измеряемого света и не зависит от его интенсивности. Кривая выражающая эту зависимость называется спектром поглощения.