Выбор кювет

Кюветы подбираются по окраске растворов, полученных после проведения цветной реакции для данного вещества.

Выбирая толщину рабочего слоя кюветы для полученных растворов, необходимо еще ориентироваться на то, чтобы их измеренные оптические плотности при выбранном светофильтре находились в интервале 0,1-1,0 единиц.

Это объясняется тем, что толщина слоя кюветы ограничивает длину пути светового луча в исследуемом растворе и оптическая плотность вещества в растворе находится в прямо пропорциональной зависимости от этой величины, т. е. чем толще рабочий слой кюветы, тем выше будет оптическая плотность измеряемых в ней растворов вещества (увеличение толщины слоя кюветы соответственно увеличивает чувствительность определения. Обычно для фотометрических измерений в видимой области спектра применяются стеклянные кюветы с толщиной рабочего слоя 0,5 см и 1,0 см.

Алгоритм выбора толщины слоя кюветы

1. Готовят стандартный раствор с максимальной концентрацией анализируемого вещества из эталонного раствора.

2. По интенсивности окраски приготовленного раствора подбирают визуально кювету. Если раствор темный, то берут кювету с малой толщиной рабочего слоя — 0,5 см, если раствор слабоокрашенный раствор, то берут кювету с рабочей длиной в 1 см.

3. Выбранную кювету заполняют этим раствором до метки на боковой стенке и определяют его оптическую плотность на ФЭКе.

Перед измерением оптической плотности необходимо вначале установить подобранный светофильтр для этого вещества.

Если оптическая плотность приготовленного раствора укладывается в интервале 0,1-1,0 единиц, то кювета выбрана правильно.

Правила работы с кюветами

1. Кюветы должны быть чистыми. Их моют концентрированной соляной кислотой, тщательно промывают водой, а потом ополаскивают дистиллированной водой.

2. Перед каждым измерением оптической плотности нового раствора кювету ополаскивают 2 раза небольшой порцией этого раствора.

3. Заполняют кюветы раствором обязательно до метки, которая указана на ее боковой поверхности. Нельзя касаться пальцами рабочих участков (боковых поверхностей) кюветы!

4. Перед установкой кювет с раствором в кюветное отделение их боковые стенки насухо вытирают фильтровальной бумагой.

5. Кюветы устанавливают в кюветодержатель кюветного отделения в строго вертикальном положении. Нельзя наклонять заполненные кюветы.

6. По окончании измерений кюветы тщательно моют, ополаскивают дистиллированной водой и в перевернутом виде ставят их на фильтровальную бумагу.

Стандартный ряд окрашенных растворов

Стандартный ряд окрашенных растворов необходим для построения градуировочной кривой.

Стандартный ряд окрашенных растворов готовят в мерных колбах емкостью 25, 50, 100 мл (можно использовать градуированные пробирки) в количестве 5-10 растворов из эталонного раствора с такой областью известных концентраций определяемого компонента в исследуемых растворах.

Эталонный раствор — это раствор с известной концентрацией (титром) определяемого компонента, входящего в состав анализируемого вещества.

Обычно в колориметрии применяется растворы, содержащие в 1 мл 0,1, 0,01, 0,001 г растворенного вещества. Титр эталонного раствора определяют по формуле:

T_эт=(m*M₂*1000)/(V*M₁)

T_эт — титр эталонного раствора, мг/мл

m — масса растворяемого вещества, г

M₁ — молярная масса растворяемого вещества, г/моль

M₂ — молярная масса определяемого компонента (вещества), г/моль

V — заданный объем, мл

Эталонный раствор готовится обычно предварительно.