Резус-фактор, методика его определения.
Индивидуально, в зависимости от человека, на поверхности красных кровяных телец может присутствовать или отсутствовать «резус-фактор». Этот термин относится только к более имунногенному антигену D резус-фактора системы группы крови или к отрицательному резус-фактору системы группы крови. Как правило, статус обозначают суффиксом Rh+ для положительного резус-фактора (имеющий антиген D) или отрицательный резус-фактор (Rh-, не имеющий антигена D) после обозначения группы крови по системе ABO. Тем не менее, другие антигены этой системы группы крови также являются клинически значимыми. Эти антигены указаны в списке. В отличие от группы крови ABО, иммунизация против резуса в общем случае может иметь место только при переливании крови или плацентарном воздействии во время беременности.
Определение резус-фактора
Резус-фактор в повседневной практике определяется при помощи антирезусных сывороток или моноклинальными анти-D-антителами. Используется универсальная антирезусная сыворотка для экспресс-метода.
Порядок определения резус-фактора:
Кровь для исследования берется из пальца непосредственно перед исследованием (можно использовать консервированную кровь без предварительной обработки), а также эритроциты из пробирки после образования сгустка и отстаивания сыворотки.
Капля стандартной антирезусной сыворотки для экспресс-метода наносится на дно пробирки.
Туда же добавляется капля исследуемой крови.
Осторожными движениями необходимо добиться, чтобы образовавшийся раствор растекся по стеклу пробирки.
Через 3 минуты после внесения эритроцитов добавляется 2-3 мл физиологического раствора.
Пробирка осторожно переворачивается 3 раза, после чего считывается результат:
Rh+ - при наличии агглютинатов на фоне просветленной жидкости;
Rh- - при гомогенно окрашенной жидкости (отсутствие агглютинации).
Определение резус-фактора при помощи цоликлон анти-d супер
Цоликлон анти-D супер выпускается во флаконах 2,5 мл или 10 мл (1 мл содержит 10 доз), срок хранения - 1 год при температуре 2-8°C, вскрытый флакон допускается хранить в холодильнике в закрытом виде в течение 1 месяца.
Порядок определения резус-фактора при помощи моноклинального реагента:
Нанести на тарелку каплю реагента - 0,1 мл.
Поместить рядом маленькую каплю исследуемой крови - 0,01 мл.
Смешать исследуемую кровь с реагентом.
Через 3 минуты считать результат реакции (агглютинация начинается через 10-15 секунд, четко выраженный вид принимает через 0,5-1 мин).
После смешивания реагента с кровью через 30 секунд рекомендовано покачивать, чтобы добиться развития более полной крупнолепестковой агглютинации.
Методика определения резус-фактора
Берут 2-3 мл крови больного в сухую пробирку без стабилизатора. Со дна пробирки набирают эритроциты в собственной сыворотке (5-10 %-я взвесь). На чашку Петри наносят по 2 капли сыворотки антирезус 2-х серий и по 1-й капле крови реципиента, перемешивают стеклянной палочкой. Чашку Петри ставят на водяную баню (45 °С) на 5-7 мин. Результаты просматривают на свету на белом фоне. Если кровь реципиента агглютинируется обеими сериями сыворотки антирезус, то она резус-положительная, а если не агглютинируется, то она резус-отрицательная.
В некоторых случаях не представляется возможным определение резус-принадлежности реципиента, тогда пользуются индивидуальной пробой на резус-совместимость крови донора и реципиента.
На чашку Петри наносят 2 капли сыворотки крови больного и маленькую каплю переливаемой крови, их смешивают и ставят на водяную баню (42-45 °С) на 10 мин. Если наступила агглютинация, то кровь донора несовместима с кровью реципиента и ее переливать нельзя.