5 31 ,7,24(28)-Ергостатриенол

5 32 ,7,22,24(28)-Ергостатетраенол

Ергостерин

ферменти: 1 – гексокіназа (2.7.1.1);

2 – глюкозо-6-фосфатізомераза (5.3.1.9);

3 – 6-фосфофруктокіназа (2.7.1.11);

4 – фруктозодифосфатальдола-за, клас ІІ (4.1.2.13);

5 – триозофосфатізомераза (5.3.1.1);

6 – гліцеральдегід-3-фосфатдегідрогеназа (1.2.1.12);

7 – фосфогліцераткіназа (2.7.2.3);

8 – 2,3-дифосфогліцератзалежна фосфогліцератмутаза (5.4.2.1);

9 – енолаза (4.2.1.11);

10 – піруваткіназа (2.7.1.40);

11 – піруватдегідрогеназа E1 (компонент β-субодиниці) (1.2.4.1);

12 – піруватдегідрогеназа E2 (компонент дигідроліпоамід ацетил-трансферази) (2.3.1.12);

13 – ацетил-КоА C-ацетилтрансфераза (2.3.1.9);

14 – гідроксиметилглутарил-КоА-синтаза (2.3.3.10);

15 – гідроксиметилглутарил-КоА-редуктаза (1.1.1.34);

16 – мевалонаткіназа (2.7.1.36);

17 – фосфомевалонаткіназа (2.7.4.2);

18 – дифосфомевалонатдекарбоксилаза (4.1.1.33);

19 –дифосфатфарнезілсинтаза (2.5.1.1, 2.5.1.10);

20 - фарнезілдифосфат фарнезілтрансфераза (2.5.1.21);

21 – скваленмонооксигеназа (1.14.13.132);

22 – ланостеринсинтаза (5.4.99.7);

23 – цитохром Р450, 51 сім'ї (14-стеролдеметилаза) (1.14.13.70);

24 – Δ-14-стерол-редуктаза (1.3.1.70);

25 – метилстеролмонооксигеназа (1.14.13.72);

26 – стерин-4-α-3-карбоксилатдегідрогеназа (1.1.1.170);

27 – 3-кетостеро-їдна редуктаза (1.1.1.270);

28 – стерол-24-C-метилтрансфераза (2.1.1.41);

29 – C-8-стеролізомераза (5.-.-.-);

30 – ланостеролоксидаза (1.14.21.6);

31 – C-22-стеролдесатураза (1.14.14.-);

32 – Δ-24-стеролредуктаза (1.3.1.71) [40].

Розділ 6. Опис технологічного процесу біосинтезу ергостерину

1. Розрахунок кількості стадій підготовки посівного матеріалу

Загальний об’єм ферментера, в якому здійснюється культивування продуцента ергокальциферолу (попередника вітаміну D₂) – Saccharomyces cerevisiae, 10 м³. Коефіцієнт заповнення К_зап. = 0,5. Тобто, робочий об’єм ферментера:

V_роб. = V_заг. × К_зап. = 10 × 0,5 = 5 м³ = 5000 л.

Визначаємо кількість стадій підготовки посівного матеріалу, для приготування 5000 л культуральної рідини. Кількість посівного матеріалу становить близько 10 % від загального об’єму поживного середовища.

1) Для приготування 5000 л культуральної рідини, потрібно: 5000 × 0,1 = 500 л посівного. Таку кількість посівного матеріалу можна приготувати у ферментері об’ємом 1 м³.

2) Щоб приготувати 500 л культуральної рідини, потрібно: 500 × 0,1 = 50 л посівного матеріалу. Таку кількість посівного можна приготувати у ферментері об’ємом 100 л.

3) 50 л культуральної рідини можна приготувати, засіявши поживне середовище 50 × 0,1 = 5 л посівного матеріалу (приготування здійснюють у ферментері об’ємом 10 л).

4) Щоб приготувати 5 л культуральної рідини, потрібно мати: 5 × 0,1 = 500 мл посівного матеріалу. Таку кількість посівного можна приготувати на качалочних колбах.

Тобто, процес підготовки поживного середовища проходитиме в 4 етапи, п’ятим – буде сам процес біосинтезу.