3. Хроническая гранулематозная болезнь.
•Первичный иммунодефицит, при котором фагоциты не способны генерировать активные формы кислорода и нарушается “кислородный взрыв”, необходимый для уничтожения бактерий и грибов.
•Известно, что цитохром b558 в мембране фагоцитов представлен в форме
гетеродимера двух цепей (массой 91 и 22 кДа – атомная единица массы). При активации фагоцитов компоненты NADPH-оксидазы в цитоплазме подвергаются фосфорилированию , мигрируют на поверхность мембраны и связывают цитохром b558. Развитие ХГБ обусловлено дефектами этих молекул.
•Клинические проявления: могут возникать у детей в раннем возрасте и у подростков – гнойные поражения кожи (фурункулы, карбункулы, абсцессы с медленным прогрессированием). Заболевание проявляется в виде рецидивирующих инфекционных заболеваний, поражающих органы дыхания, кожу, лимфатические узлы, печень, почки. Характерно возникновение лимфаденита. Особенность ХГБ – формирование в любых органах гранулём, содержащих гигантские многоядерные клетки. У 70-80% детей может развиваться пневмония, осложняемая абсцедированием или эмпиемой плевры. У 15-30% развивается остеомиелит мелких костей, вызванный стафилококками и аспергиллами.
•Диагностика: тесты, помогающие выявить нарушения фагоцитоза – с нитросиним тетразолием, в иммунограмме – снижение высвобождения супероксида из стимулированных фагоцитов до 3-30% от нормы, повышенный уровень IgA,
IgM, IgG.
•Лечение: пожизненная антибактериальная терапия, антимикотические препараты(флуконазол, тербинафин, микогептин и др), генная терапия – введение в
стволовые клетки костного мозга гена gp91phox, поврежденного мутацией при ХГБ.
4. Дефицит глюкозо-6- фосфатдегидрогеназы нейтрофилов.
•Наиболее частая форма энзимопатии, обычно служащая причиной несфероцитарной анемии.
• Отсутствие глюкозо-6-фосфатдегидрогеназы в лейкоцитах |
такие |
лейкоциты неспособны разрушать поглощенные бактерии. |
|
•Механизм развития: заболевание возникает в результате мутации гена, кодирующего глюкозо-6-фосфатдегидрогеназу на хромосоме Xq28.
•Клинические проявления: при тяжелых формах развиваются абсцессы в разных органах, тяжелые пневмонии и признаки гемолитической анемии.
•Диагностика: симптомы гемолитической анемии в комбинации с “патологическим” тестом с нитросиним тетразолием, активность глюкозо-6-фосфатдегидрогеназы в эритроцитах и лейкоцитах определяют флюоресцентным методом.
•Лечение: симптоматическое.
5. Дефицит
миелопероксидазы.
• Вследствие этого дефицита нарушается образование фагоцитами гипохлорной кислоты.
• Механизм развития: миелопероксидаза находится в азурофильных
гранулах и катализирует превращение H2O2 в гипохлорную кислоту. Ген расположен на хромосоме 17q23. Дефицит миелопероксидазы –
врожденное аутосомно-рецессивное заболевание. Описаны вторичные формы дефицита миелопероксидазы при тяжелых инфекционных заболеваниях, СД, миелоидной лейкемии, ходжкинской лимфоме.
• Клинические проявления: больше чем у 95% клинические симптомы не проявляются, не смотря на дефекты киллинга нейтрофилов. При наличии симптоматики выявляют кандидозную инфекцию и иногда СД. Тяжелые инфекционные поражения костей и сепсис развиваются редко.
• Диагностика: определяют дефицит фермента в клетках.
• Лечение: специфического лечения нет. Проводят симптоматическую терапию противогрибковыми препаратами.
6. Циклическая нейтропения.
•Характеризуется нейтропенией, возникающей каждые 3 недели и сохраняющейся в течение 3-6 сут.
•Впервые заболевание описано в 1910 г доктором Чарльзом Лилем у младенцев с рецидивирующими эпизодами лихорадки, инфекционным поражением кожи, стоматитами, нейтропенией.
•У пациентов уровень нейтрофилов колеблется от нормального содержания до полного отсутствия с периодичностью 21 сут.
•При полном исчезновении нейтрофилов повышается риск развития инфекционных заболеваний.
•В целом благоприятное течение, для лечения применя
Г-КСФ (гранулоцитарный
колониестимулирующий фактор)
Дефициты комплемента.
•Комплемент участвует в распознавании, опсонизации, киллинге и элиминации микроорганизмов, иммунных комплесов и разрушенных клеток организма.
•Выделяют 3 основных пути активации комплемента:
1.Классический (С1- зависимый)
2.Лектиновый (зависимый от MBL - лектин, связывающий маннозу)
3.Альтернативный (фактор B,D и пропердинзависимй).
Дефицит MBL – наиболее частая форма недостаточности комплемента.
•Система комплемента насчитывает более 30 белков, бол-во из которых продуцируется гепатоцитами и циркулирует в неактивных формах.
•Активация системы комплемента проиходит по классическому (С1-С9), лектиновому или альтернативному пути.
•Активированные факторы комплемента обладают важными биологическими функциями – распознавание, процессинг, презентация чужеродных молекул, регуляция приобретенного иммунитета, элиминация ИК. Они участвуют в апоптозе, опсонизации и усилении фагоцитоза (С3b), усилении реакций нейтрализации вирусов антителами (С1, С4), опосредовании высвобождения гистамина тучными клетками
(анафилатоксины С3а,С4а, С5а), активации В-лимфоцитов при взаимодействии их с дендритными клетками (С3d).
•Дефицит С1 ингибитора приводит к развитию ангиоотека. У пациентов с
дефицитом разных компонентов комплемента и со снижением активации С3 часто возникают рецидивирующие пиогенные инфекции.
1. Наследственный ангионевротический отёк.
•С1- ингибитор контролирует начальную фазу активации комплемента по классическому пути, прикрепляясь ковалентно к С1r и C1s- компонентам, что приводит к диссонации связи С1 с субстратом. Дефект С1 ингибитора вызывает развитие НАО. Наследование по аутосомно-доминантному типу.
•Клиника: невоспалительные отеки подкожного и подслизистого слоя, сопровождающиеся дилатацией капилляров и венул, увеличение промежутков между эндотелиальнымии клетками. Отеки могут быть на лице, конечностях, гениталиях, в респираторном и пищеварительном тракте. При отеках верх дыхат путей могут возникнуть угрожающие жизни состояния – отек языка, слизистой оболочки глотки, затруднения глотания.
•Диагностика: традиционный СН50 метод, основанный на гемолизе эритроцитов барана, метод ИФА, иммунохимические тесты, генетические методы.
•Лечение: препараты повышающие уровень С1 ингибитора – андрогены (даназол, станазол), во время атаки – свежезамороженная плазма,
так же симптоматическая терапия, антибактериальная терапия.
Методы исследования системы комплемента
•I. Определение общей гемолитической активности классического пути. Сыворотку крови разводят физиологическим раствором 1:10 и вносят в пробирки в объеме от 0,05 до. 0,5 мл. Объем проб доводят до 1,5 мл физиологическим раствором и вносят по 1,5 мл гемолитической системы (смесь равных объемов 3% взвесей бараньих эритроцитов и гемолитической сыворотки). Пробирки инкубируют при 37°С 45 минут,- охлаждают при 4°С для остановки реакции и центрифугируют при 1500 оборотов 4-5 минут. После центрифугирования определяют объем сыворотки, вызывающий лизис 50% сенсибилизированных эритроцитов (условную гемолитическую единицу активности комлемента - СН 50), затем рассчитывают количество СН 50 на мл цельной сыворотки. У здоровых людей титр комлемента (СН 50 на мл) составляет примерно 40-60 СН 50.
•Гемолитическую активность альтернативного пути комлемента определятт также, но вместо сенсибилизированных бараньих эритроцитов используют несенсибилизированные кроличьи эритроциты и физиологический раствор, содержащий ионы Mg, но без Са для блокирования классического пути активации.
•2.Определение функциональной активности отдельных компонентов. Этот метод позволяет определить численность функционально активных молекул в I мл сыворотки крови. Для этого к сенсибилизированным эритроцитам добавляют реагент на определенный компонент комплемента ( в качестве реагента используют либо смесь компонентов комлемента, исключая искомый, либо сывоттку крови, лишенную активности этого компонента. Сыворотку для титрования компонентов классического пути разводят в 40- 50 -раз, а альтернативного - в 5-7 раз. Таким образом можно установить дефект определенных компонентов и определить профиль комплемента при различных заболеваниях.
•3. Иммунохимическое определение концентрации компонентов комплемента. Данный метод исследования позволяет определить концентрацию каждого из белков комплемента, используя антисыворотки (антитела) к ним. Концентрация белков выражается в г\л. Для определения используют метод радиальной иммунодиффузии в arapе.
•4 Определение активности комплемента и его компонентов методом радиального гемолиза в агаровом геле. Гемолитическую систему смешивают с расплавленным агаром в соотношении 1:7 и быстро выливают в стерильные чашки Петри. После застывания в агаре проделывают лунки диаметром 4.мм- (до 15 лунок на 1-ой чашке). Лунки заполняются испытуемыми сыворотками и помещают чашки в холодильник при 4°С
на 21 час для диффузии белков комплемента в агар. Затем чашки помещают в термостат на 60 минут для проявления зон гемолиза. Критерием активности комплемента служит квадрат диаметра зон гемолиза.