Добавил:
Upload Опубликованный материал нарушает ваши авторские права? Сообщите нам.
Вуз: Предмет: Файл:
Mikra_bilety.docx
Скачиваний:
0
Добавлен:
01.05.2025
Размер:
494.96 Кб
Скачать

Билет 31

1) Генотип и фенотип. Транспозоны. Бактериальные хромосомы и плазмиды.

Бактериальный геном состоит из генети­ческих элементов, способных к самостоятель­ной репликации, т. е. репликонов. Репликонами являются бактери­альная хромосома и плазмиды.

Наследственная информация хранится у бактерий в форме последовательности нуклеотидов ДНК, которые определяют после­довательность аминокислот в белке. Каждому белку соответствует свой ген, т. е. дискретный участок на ДНК, отличаю­щийся числом и специфичностью последова­тельности нуклеотидов.

Бактериальная хромосома представлена одной двухцепочечной молекулой ДНК кольцевой фор­мы. Размеры бактериальной хромосомы у различ­ных представителей царства Procaryotae варьируют. Бактериальная хромосома формиру­ет компактный нуклеоид бактериальной клетки. Бактериальная хромосома имеет гаплоидный на­бор генов. Она кодирует жизненно важные для бактериальной клетки функции.

Плазмиды бактерий представляют собой двухцепочечные молекулы ДНК. Они кодируют не основные для жизнедеятельности бактериальной клетки функции, но придающие бактерии преиму­щества при попадании в неблагоприятные условия существования.

Свойства микроор­ганизмов, как и любых других организмов, определяются их генотипом, т.е. совокупностью генов данной особи. Термин «геном» в отношении микроорганизмов — почти синоним по­нятия «генотип».

Фенотип представляет собой результат взаимодействия меж­ду генотипом и окружающей средой, т. е. проявление генотипа в конкретных условиях обитания. Фенотип микроорганизмов хотя и зависит от окружающей среды, но контролируется генотипом, так как характер и степень возможных для данной клетки сте­нотипических изменений определяются набором генов, каждый из которых представлен определенным участком молекулы ДНК.

Подвижные генетические элементы. В состав бактериального генома, как в бак­териальную хромосому, так и в плазмиды, входят подвижные генетические элементы. К подвижным генетическим элементам от­носятся вставочные последовательности и транспозоны.

Транспозоны — это сегменты ДНК, облада­ющие теми же свойствами, что и IS-элементы, но имеющие структурные гены, т. е. гены, обеспечивающие синтез молекул, обладаю­щих специфическим биологическим свойс­твом, например токсичностью, или обеспечи­вающих устойчивость к антибиотикам.

2) Реакция агглютинации и преципитации, их сходства и различия.

Реакция агглютинации - это склеивание корпускулярных антигенов (агглютиногенов) - микробов, других клеток или частиц, носителей антигена, под воздействием специфических антител с образованием видимых глазом аггломератов - хлопьев; реакция происходит только в присутствии электролита (0.85% NaCl).

В реакции агглютинации участвуют антитела IgG и IgM.

В основе реакции лежит образование "решетки": в 1й фазе поливалентные антигены и двухвалентные антитела образуют комплексы по типу решетки, во 2й фазе под действием электролита снижается заряд комплексом и они осаждаются на дно в виде хлопьев.

Различают О и Н агглютинацию в зависимости от участваующих антигенов бактериальных клеток. Жгутиковые бактерии -> Н-агглютинация, протекает быстро с образованием крупных хлопьев. Без жгутиков -> О-агглютинация, реакция медленная и с мелкозернистым осадком.

Применяют пластинчатую и развернутую реакцию агглютинации.

  • Пластинчатая (на предметном стекле): на предметное стекло наносят каплю диагностической сыворотки и каплю физ. раствора (контроль). Испытуемую культуру берут с агара и помещают в обе капли. В капле с диагностической сывороткой - хлопья, контроль - мутная жидкость.

  • В пробирках (развернутая): устанавливают 7 пробирок, 5 первых - опытные, 6 и 7 - контроль. В опытных готовят серийные 2кратные разведения (1:100, 1:200 и т.д.) в объеме 1 мл. В каждую пробирку вносят по 3 капли диагностикума. 6я пробирка - контроль антигена (1 мл физ. раствора и 3 капли диагностикума), 7я - контроль сыворотки (сыворотка в разведении 1:25). В термостат на 2 часа при 37C -> предварительный учет, окончательный на следующий день после комнатной температуры -> положительный результат: образование хлопьев и просветление жидкости; отрицательный: содержимое равномерно мутное; контроли: в антигене содержимое равномерно мутное, в сыворотки - прозрачное, без осадка.

Титр сыворотки - наибольшее разведение, в котором еще наблюдается агглютинация.

Реакция преципитации - это осаждение растворимых антигенов (преиципитиногенов) специфическими антителами сыворотки в присутствии электролита (0.85% раствора NaCl).

Механизм реакции заключается в том, что полидетерминантные антигены, представляющие собой прозрачный коллоидный раствор, и двухвалентные антитела (преципитирующие антитела - IgG) образуют комплексы по типу решетки, в присутствии электролита снижается заряд, уменьшается растворимость и образовавшийся преципитат выпадает в осадок, видимый невооруженным взглядом.

Реакцию преципитации применяют для выявления антигенов по известной иммунной преципитирующей сыворотке или антител с использованием известных антигоенов-диагностикумов. На практике: преципитация в жидкой среде (кольцепреципитация, флокулляция) и полужидком геле (метод двойной иммунодиффузии по Оухтерлони, метод радиальной диффузии по Манчини, иммуноэлектрофорез).

Соседние файлы в предмете [НЕСОРТИРОВАННОЕ]