Билет 11

1) Структура бактериальной клетки. Нуклеоид. Биологические функции, методы выявления.

Бактериальная клетка состоит из клеточной стенки, цитоплазматической мембраны, цитоплазмы с включениями и ядерного аппарата, называемого нуклеоидом. Имеются другие структуры: мезосома, хроматофоры, тилакоиды, вакуоли, включения полисахаридов, жировые капельки, капсула (микрокапсула, слизь), жгутики, пили. Некоторые бактерии способны образовывать споры.

Нуклеоид - основной генетический аппарат бактерий. Это суперспирализованная (компактно упакованная) двунитевая цепь ДНК, которая в развернутом состоянии замкнута в кольцо. Не имеет ядерной мембраны и белков-гистонов. Расположена непосредственно в цитоплазме. Количество нуклеоидов зависит от фазы деятельности клетки: в состоянии покоя бактерии гаплоидны (1 нуклеоид), в перод размножения - 2, 4 и более нуклеоидов. Выявляется электронной микроскопией и методом Романовского- Гимзы:

• фиксируем препарат жидкость Карнуа;

• промываем дистилированной водой;

• используем раствор HCl, t=40-60С;

• промываем дистилированной водой;

• красим краской Романовского-Гимзы (азур, эозин, метиленовый синий), ждем 40-60 мин;

• промываем дистилированной водой, сушим, микроскопируем.

Результат: т.к. РНК клетки разрушилось под действием HCl, только ДНК окрасится в синий цвет (метиленовым синим), а цитоплазма окрасится эозином в красный/розовый цвет.

2) Дисбактериоз. Профилактика и коррекция. Биопрепараты.

Дисбактериоз (дисбиоз) – это клинико-лабораторный синдром, характеризующийся количественным и качественным изменением нормофлоры определенного биотопа, а так же транслокацией некоторых представителей в несвойственные биотопы с последующими метаболическими и иммунными нарушениями.

Результат дисбиотических изменений: снижение колонизационной резистентности, угнетение функций иммунной системы => повышение восприимчивости к инфекционным заболеваниям, возможно нарушение обменных процессов.

При бактериальном исследовании наблюдается снижение количества/элиминация одного или нескольких видов индигенной микрофлоры, прежде всего лактобацилл и бифидобактерий с одновременым увеличением коичества условно-патогенной микрофлоры.

Причины:

• длительная антибиотико-, химио-, гормонотерапия;

• воздействие жесткого гамма-излучния (облучение, лучевая терапия);

• заболевания ЖКТ инфекционной и неинфекционной этиологии, другие длительные заболевания, иммуно-дефицитные состояния;

• неправильное питание, гипо- и авитаминоз, неблагоприятная экологическая обстановка;

• стрессовые и экстремальные ситуации;

• длительное пребывание в стационарах (госпитальные инфеции) и в замкнутых пространствах (подводные лодки, космические станции);

• у детей раннего возраста: недоношенность, пороки развития, инфицирование условно-патогенной микрофлорой (особо стафилококками) в родильном доме, наличие дисбактериоза у матери, нарушение режима и качества питания ребенка.

Стадии (степени) дисбиоза:

• 1 стадия – компенсированная форма. Снижение кол-ва одного вида индигенных микроорганизмов. Это латентная стадия, без клинических проявлений, выявляется лабораторным исследованием. Коррекция: рациональная диета с использованием функциональных продуктов питания.

• 2 стадия – субклиническая стадия. Элиминация или снижение количества отдельных представителей нормофлоры (бифидо/лактобактерий) с увеличением количества условно-патогенных микроорганизмов. Расстройство функций кишечника, местные воспалительные процессы. Коррекция: диета, функциональное питание, пробиотики и пребиотики.

• 3 стадия – декомпенсированная форма. Условно-патогенные микроорганизмы доминируют, их отдельные представители распространяются в нехарактерные биотопы (например, Е.coli – в желчные пути, Candida - в моче). Выражены патологические изменения, чаще – воспалительные, вплоть до тяжелых септических форм. Коррекция: «селективная деконтаминация»: антибиотики группы фторхинолонов, монобактамов, аминогликозидов – у них избирательная активность к энтеробактериям (они не нарушают колонизационную резистентность). Завершается коррекция использованием пребиотиков, пробиотиков, диеты.

Коррекция дисбиозов - комлексная, с учетом основного заболевания и причин дисбиоза:

• устраняют причину дисбиоза;

• проводят коррекцию питания с учетом возраста больного и состояния ЖКТ:

  • диеты с кисломолочными продуктами, растительные продукты питания; детям раннего возраста: адаптированные смеси, обогащенные представителями микрофлоры (Малютка, Бифидок, Бифилакт);

  • функциональное питание: пищевые продукты с добавлением биопрепаратов, каратиноидов, антиоксидантов, пищевых волокон. Детям в неонатальном периоде – лиофилизированное грудное молоко, обогащенное B.bifidum;

  • При необходимости назначить ферментные препараты, энтеросорбенты, поливитамины с минеральными добавками.

• восстановить нормальную микрофлору пре-, про-, синбиотиками;

• при тяжелой форме дисбактероза: селективная деконтаминация или препараты бактериофагов.

Клинически здоровые дети 1,5-2 лет при обнаружении транзиторной микрофлоры с должным уровнем бифидобактерий не требуют активного лечения (т.к. условно-патогенные микроорганизмы элиминируются под влиянием созревающего адаптивного иммунитета).

Биопрепараты: пробиотики, пребиотики, синбиотики.

Пробиотики – живые представители нормофлоры (лактобациллы, бифидобактерии, эшерихии), на основе которых создан биопрепарат. При продвижении по ЖКТ сохраняет жизнеспособность. Временно благоприятно модифицируют состав и метаболическую активность кишечника.

Выделяют: монокомпонентные (монокультура одного вида микроорганизмов) и поликомпонентные (микроорганизмы разных видов или несколько штаммов одного вида + могут быть вещества, повышащие активность препарата).

• Бифидосодержащие. Бифидобактерии – с высокой антагонистической активность. Повышают колонизационную резистентность.

  • Монокомпонентные: - Бифидумбактерин – живые лиофильно высушенные B.bifidum с концентрацией в дозе - 10⁸.

  • Поликомпонентные: - Бифиформ (бифидобактерии и энтерококки) - Бификол (бифидобактерии и эшерихии) - Бифилиз (комбинированный препарат – бифидобактерии и лизоцим) - Бифидумбактерин-форте и Пробифор (B.bifidum, адсорбированные на активированном угле) - Флорадофилюс (БАД, лиофильно высушенная смесь бифидобактерий, лактобактерий, стрептококков(S.thermophylus))

• Лактосодержащие препараты. Лактобациллы – с высокой антагонистический активностью (кислые продукты, лизоцим, перикись водорода)

  • Монокомпонентные: - Лактобактерин - Биобактон - Гастрофарм

  • Поликомпонентные: - Ацилакт – живые лиофильно высушенные L.acidophilus трех штаммов - Линекс – живые диофилизированные L.acidophilus, B.infantis, S.faecalis - Аципол - L.acidophilus и полисахарид кефирных грибков (иммуностимулятор) - Примадофилюс – БАД; живые лиофильно высушенные лактобацилы и бифидобактерии

• Колисодержащие: живые лиофильно высушенные E.coli Бификол, Биофлор; Колибактерин (при дефиците E.coli, штамм М-17, высокая антаонистическая активность) ;

• Хилак-форте – не содержит живых бактерий, только субстраты E.coli, S.faecalis, L.acidophilus, набор солей и молочная кислота. Способствует нормализации микрофлоры, нормализует синтез витаминов В и К, кислотность и водно-электролитный баланс;

На кафедре РНИМУ разработали:

• Бифидумбактерин антибиотикоустойчивый;

• ЖЛЕСК (живой лечебный стрептококк кишечника) – живые лиофильно высушенные S.faecalis, для коррекции микрофлоры кишечника;

• ЖЛЕМИК (женский лечебный микроб) – живые штаммы L.fermentum, для коррекции микрофлоры влагалища.

Пребиотики – препараты немикробного происхождения, не адсорбируются в верхних отделах ЖКТ, стимулируют рост и метаболическую активность нормофлоры кишечника. Часто это олигосахариды, которые содержатся и в грудном молоке и некотрых пищевых продуктах.

• Лактулоза (дюфалак) – синтетический дисахарид. Гидролизуется микрофлорой кишечника до молочной кислоты, которая стимулирует перистальтику, способствует снижению рН, способствует жизнедеятельности бифидобактерий и лактобацилл.

• Пантотенат кальция – используется бифидобактериями, стимулирует их жизнедеятельность.

Синбиотики – это комбинации пробиотиков и пребиотиков, которые избирательно стимулируют рост и метаболическую активность индигенной микрофлоры, повышают факторы естественной резистентности организма.

• Биовестинг-лакто - бифидогенные факторы и биомассу бифидобактерий и лактобацилл.