78.Зависимость интенсивности люм. От с,т,рН,примесей.

В области малых конц-й между I_фл и конц-й действ-т прямая пропорц-я зав-сть I_фл=КС. Эта обл и исп-ся для колич. ан-за.Она обычно охват-т область конц-й от 10^-7до 10^-4моль/л. С повышением конц-и интенс-сть флуорес-ции станов-ся пост-й, а затем резко падает(концентрационное гашение). Чаще всего повышение температуры приводит к снижению интенс-сти флуор-ции(температурное гашение фл-ции).Для некоторых флуоресцирующих веществ интенс-сть свечения с ростом рН увелич-ся, для других-падает, а некоторые в-ва флуоресцируют только в опред-м интервале значений рН.Такие в-ва наз-ся флуоресцентными индикаторами. Гашение фл-ции посторонними в-ми м.б. связано как с химическими, так и с физич-ми проц-ми. Если спектры поглощения анализируемого в-ва и гасителя нах-ся в одной спектр-й области, то происх-т сильное гашение фл-ции – небольшие добавки такого гасителя резко снижают инт-сть свечения. Если спектры ан-го в-ва и гасителя отлич-ся сильно, обмен энергией между ними происх-т менее инт-но и влияние такого гасителя на инт-сть фл-ции значит-но меньше. Например, некоторые в-ва способны гасит фл-цию(КМпО4), а некот-е СП-ны вызывать усиление фл-ции.

79.Гашение флуоресценции.

Сущ-т 3 вида гашения. Концентрационное гашение флуоресценции-уменьшение интенс-сти фл-ции с увеличением конц-ции. Это явление объясн-ся след-м:1)при увелич. конц-и происх-т сближение флуоресцирующих молекул, изменение их энергетических уровней и увелич-е кол-ва безызлучательных переходов;2)при сближении молекул возник-т возм-сть резонансного взаимод-я с передачей энергии, что приводит к потере энергии и уменьш-ю интенс-сти флуоресц-ции;3)при сближении мол-л увелич-ся взаимод-е мол-л м-у собой и мол-ми рас-ля с образованием нефлуоресцирующих ассоциатов. Температурное гашение фл-ции объясн-ся тем, что с ростом Т увелич-ся колебательная энергия мол-л и возрастает кол-во безызлучат-х переходов, а также температура диссоциации молекул.Примесное гашение (посторонними в-ми), м.б. связано как с хим-ми процессами, так и с физич-ми. При хим-м гашении флуоресцирующая мол-ла вступ-т во взаимод-е с примесью, образуя нефлуоресцируюшее соед-е(н-р,О₂). При физ-м гашении осущ-ся передача части энергии возбужденной мол-лы постороннему в-ву за счет безызлучательных переходов.

80 Прямой флуоресцентный анализ.

Прямые определения ведут непосредственно по флуоресценции исследуемого образца. Они применяются чаще при ан-зе органич-х в-в, способных флуоресцировать самостоятельно.Этот метод м.б. исп-н и для кач-го и для колич-го ан-за неорганич-х ионов. Эти определения осн-ны на пртек-и след-х р-ций, к-е приводят к:1)возникн-ю фл-ции в присутствии определяемого катиона при использов-и нефлуоресцирующего реагента 2)изменению флуоресценции реагента в присутствии анализируемого катиона 3)гашению флуоресценции органического реагента в присутствии анализируемого катиона.(это колич. Ан-з). Качеств. Ан-з. Различные флуоресцирующие в-ва имеют спектры флуоресц-ции разного вида, расположенные в различных интервалах шкалы длин волн. Вид и положение флуоресценции на частотной шкале позволяет отличить одно флуоресцирующее в-во от другого. В простейшем случае кач-е опред-е природы флуоресцирующего в-ва м.б. опред-но по его цвету. Н-р, кокаин светит светло-синим цветом, кодеин-слабо-желтым.По цвету фл-ции можно различать разные типы битумов, марки стекол, сорта смаз-х масел..Однако точная идентиф-я орг-х вев прямым мет-м затруднит-на, т.к. спектры фл-ции растворов большинства орг-х в-в малоспецифичныШирокие спектры получ-ся.