
- •Курсовая работа по дисциплине «Микробиологические методы контроля»
- •Минск 2013 Реферат
- •Содержание
- •Введение
- •1 Основная часть
- •1.1 Характеристика потерь сельскохозяйственного сырья и пищевых продуктов от микробиологической порчи
- •1.1.1 Уровень загрязненности сельскохозяйственного сырья и пищевой продукции микроорганизмами
- •1.1.2 Потери сельскохозяйственной продукции в процессе хранения
- •1.1.3 Способы защиты продукции от микробиологической порчи
- •1.2 Микробиологическая безопасность пищевых продуктов и ее характеристика
- •1.2.1 Показатели микробиологической безопасности пищевых продуктов
- •1.2.2 Требования нормативной документации к микробиологической безопасности продукции
- •1.2.3 Способы повышения микробиологической безопасности пищевых продуктов
- •1.3 Клетки микроорганизмов и их лизис
- •1.3.1 Строение клеточных стенок бактерий
- •1.3.2 Лизис клеточных стенок бактерий с сохранением и подавлением жизнеспособности клеток
- •1. Гомогенизация
- •2. Растирание клеток
- •3. Обработка ультразвуком
- •4. Френч-прессование
- •5. Ферментативный лизис клеток
- •1.3.3 Строение клеточных стенок гриба и их разрушение
- •1.4 Протопласты микроорганизмов
- •1.4.1 Методы получения протопластов микроорганизмов и оценки их выхода
- •1.4.2 Свойства протопластов микроорганизмов
- •1.4.3 Методы слияния протопластов клеток
- •1.4.4 Ревертация протопластов к клеточным формам
- •2 Экспериментальная часть
- •2.1 Материалы и оборудование
- •2.1.1 Микроорганизмы и питательные среды для культивирования микроорганизмов
- •2.1.2 Выделение чистых культур микроорганизмов, устойчивых и чувствительных к тяжелым металлам
- •2.2 Методы анализа
- •2.2.2 Метод получения протопластов микроорганизмов и оценки их выхода
- •2.2.3 Метод регенерации протопластов и оценка выхода регенерантов
- •2.2.4 Характеристика жизнеспособности протопластов и клеток редуктазным методом
- •2.2.5 Характеристика ростовой активности микроорганизмов
- •2.2.6 Определение тяжелых металлов методом комплексонометрии
- •2.2.7 Определение сорбции тяжелых металлов микроорганизмами
- •2.3 Результаты и их обсуждение
- •2.3.1 Получение устойчивых и адаптированных форм микроорганизмов к тяжелым металлам
- •2.3.3 Характеристика сорбции тяжелых металлов протопластами и клетками микроорганизмов
- •Заключение
- •Список использованной литературы
1.2 Микробиологическая безопасность пищевых продуктов и ее характеристика
1.2.1 Показатели микробиологической безопасности пищевых продуктов
Гигиеническиенормативывключаютконтрольза 4 группами микроорганизмов.
1. Санитарно-показательные:
количествомезофильныхаэробныхифакультативноанаэробныхмикроорганизмов, МАФАМ (вколониеобразующихединицах - КОЕ/г);
бактериигруппыкишечныхпалочек, БГКП (коли-формы);
бактериисемействаЕnterobacteriaceae;
энтерококки.
2. Условно-патогенныемикроорганизмы: Е.соli, S. aureus, бактерииродаРroteus, В. сеreus, сульфитредуцирующиеклостридии, парагемолитическийвибрион (Vibrio parahaemolyticus).
3. Патогенныемикроорганизмы, вт. ч. сальмонеллы, листерии (Listeriamonocytogenes), бактерииродаиерсений (Yersinia). лочно-кислыемикроорганизмы.
Длябольшинствагруппмикроорганизмовнормируетсямассапродукта,вкоторойнедопускаютсягруппыкишечныхпалочек, большинствоусловно-патогенныхмикроорганизмов, атакжепатогенныемикроорганизмы, вт.ч.сальмонеллы. Вдругихслучаяхнормативотражаетколичествоколониеобразующихединицв 1 г (мл) продукта (КОЕ/г, мл).
Впродуктахмассовогопотребления, длякоторыхотсутствуютмикробиологическиенормативы, патогенныемикроорганизмы, вт. ч. сальмонеллыи Listeria monocytogenes, недопускаютсяв 25 гпродукта. Вовсехвидахдоброкачественнойрыбнойпродукциинедолжнобытьболее 10 КОЕ/гпарагемолитическоговибриона. Контрольсодержанияэтогомикроорганизмапроводитсяприэпидемиологическомнеблагополучииврегионе. Приэпидемиологическомнеблагополучиипроводитсяиконтрольсодержаниявготовыхпродуктах (салатыисмесиизсырыховощей) бактерийрода Yersinia (недопускаютсяв 25 гпродукта).
Приполучениинеудовлетворительныхрезультатованализа, хотябыпоодномуизмикробиологическихпоказателей, проводятповторныйанализудвоенногообъемавыборки, взятогоизтойжепартии. Результатыповторногоанализараспространяютсянавсюпартию.
Впродовольственномсырьеипищевыхпродуктахнедопускаетсяналичиевозбудителейпаразитарныхзаболеваний (гельминты, ихяйцаиличиночныеформы). Вмясеимясныхпродуктахнедопускаетсяналичиевозбудителей: финны (цистицеркоиды), личинкитрихинеллиэхинококков, цистысаркоциститоксоплазм. Врыбе, ракообразных, моллюсках, земноводных, пресмыкающихсяипродуктахихпереработкинедопускаетсяналичиеживыхличинокпаразитов, опасныхдляздоровьячеловека. Прямоеибыстроеопределениепатогенныхмикроорганизмоввобъектахвнешнейсредыосуществлятьтрудно. Поэтомувместопрямогоопределенияприменяюткосвеннуюсанитарнуюоценкуобъектоввнешнейсредыприпомощикачественногоиколичественногоопределенийсанитарно-показательныхмикроорганизмов.
Санитарно-показательныемикроорганизмы - этотакиемикроорганизмы, которыепостояннонаходятсявестественныхполостяхчеловеческогоилиживотногоорганизмаинеобитаютвовнешнейсреде. Присутствиесанитарно-показательныхмикроорганизмоввразличныхобъектахвнешнейсредысвидетельствуетозагрязненииихвыделениямичеловекаилиживотных. Чембольшесанитарно-показательныхорганизмоввовнешнейсреде, темболеевероятноприсутствиетакжеиспецифическихвозбудителейинфекционныхзаболеваний.
Мезофильныеаэробныеифакультативноанаэробныемикроорганизмы(МАФАМ) ―этомикроорганизмы, оптимальнаятемператураростакоторых 25...40°Свусловияхдоступакислородаиливегоотсутствии. Показателемсанитарно-гигиеническогосостоянияпродуктаявляетсяобщаяобсемененностьМАФАМ, тоестьобщаячисленностьмикроорганизмов. Вовсеммиреидутпоискиновыхиндикаторныхмикроорганизмов. Внастоящеевремявкачестветест-бактерийпредлагаетсяиспользоватьэнтерококки, являющиесяпоказателемфекальногозагрязнения, стрептококки―длякосвеннойиндикациивозбудителейвоздушно-капельныхинфекцийиэнтеровирусы.
Бактериигруппыкишечныхпалочек (БГКП) делятна 4 подгруппы: бактерии Escherichia coli commune, Escherichia coli citrovorum, E. coli aerogenes иE. paracoli. Наиболеечастовстречаются E. coli commune и E. paracoli. БГКПоченьизменчивыи, попадаявовнешнююсреду, ониутрачиваютмногиехарактерныепризнаки. Поэтомуксанитарно-показательныммикроорганизмамотносятвсеразновидностикишечнойпалочки.
Обнаружениекишечнойпалочкивисследуемомпродуктевыявляетнарушениетехнологическогорежимаегополучения. Посколькубактерии E.coli легкопогибаютдажеприщадящихрежимахобработки, топрисутствиеихвконсервированномпродуктеуказываетнаявныенарушениярежимаконсервирования, следовательно, нельзягарантировать, чтовпродуктенесодержатсядругие, болееопасныебактерии.
Определеннуюрольввозникновениипищевыхзаболеванийлюдеймогутигратьнекоторыебактерии, объединяемыеназваниемусловно-патогенные. КнимотносятгруппыкишечнойпалочкиE.coli, которыечащеявляютсявиновникамипищевыхзаболеваний. Этибактериидовольноширокораспространенывовнешнейсреде,встречаютсяилипостояннообитаютвкишечникеживотныхичеловека. Заисключениемнекоторых, являютсяподвижными, грамотрицательны, спорикапсулнеобразуют, аэробы, хорошорастутнаобычныхпитательныхсредах. Название «кишечнаяпалочка» носитсобирательныйхарактер, таккаквключаетвсебябольшоеколичестворазновидностей, отличающихсядруготдругакультуральными, биохимическими, серологическимиипатогеннымисвойствами. ВэтугруппувходятподгруппыВ. colicommune, colicitrovorum,aerogenes и paracoli.
Средивсейэтойгруппыбактерийвстречаютсяпатогенные,условно-патогенныеидажеполезныедлячеловека. ПолезнаяролькишечнойпалочкисводитсякееучастиювсинтезевитаминовкомплексаВиК, атакжевантагонистическомдействиинасибиреязвенныеидизентерийныепалочки,стафилококкиидр. Биохимическикишечныепалочкивесьмаактивны. Всеонирасщепляютлактозу, глюкозу, маннит, мальтозу, декстрозу, галактозуиксилозу; разжижаютжелатин, редуцируютнитратывнитриты, подавляющеебольшинствообразуетиндол, ноонинеразлагаютинозитаинеобразуютсероводород.
Всеусловно-патогенныебактерииобладаютотносительновысокойустойчивостью. Наразличныхобъектахвнешнейсредысохраняютсяот 10 днейдо 6 месяцев, устойчивыквысокимконцентрациямповареннойсолииквысыханию, непогибаютприминусовыхтемпературах, жизнеспособнывсыройводопроводнойводеит. д. Быстропогибаютэтибактериипритемпературе 68°Сивыше[4].