Протокол лабораторной работы №12 «Реакции на составные компоненты нуклеопротеинов».

№	Название реакции	Определяемый компонент	Алгоритм исследования	Окраска	Вывод/примечание	Оценка
1.
2.
3.
4.

Проверил преподаватель ____________________________

^(Ф.И.О.)

Замечания: _____________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________

Лабораторная работа №13: «Обнаружение действия ферментов»

Реакция №1 «Ферментативный гидролиз крахмала»

Принцип: фермент слюны амилаза при определенных условиях производит гидролиз крахмала до мальтозы и глюкозы.

Н₂О Н₂О Н₂О

( С₆Н₁₀О₅)_{n амилаза} ( С₆Н₁₀О₅)_{х амилаза} у С₁₂Н₂₂О_{11 амилаза} n С₆Н₁₀О₆

Примечание: обнаружение продуктов гидролиза проводят с помощью реакций с раствором йода и реакции Троммера.

Негидролизованный крахмал дает с йодом синее окрашивание (положительная реакция), глюкоза такого окрашивания не дает. Положительную реакцию Троммера (кирпично-красное окрашивание) дает глюкоза, тогда как крахмал такой реакции не дает.

Реактивы: 1) крахмал, 1% раствор; 2) слюна, водный раствор (ополоснуть рот водой, снова набрать в рот немного воды, поддержать 2 минуты, выпустить на приготовленный фильтр, фильтрат использовать для работы); 3) раствор йода, 1% в 2% растворе йодида калия; 4) сульфат меди, 5% раствор; 5) гидроокись натрия, 10% раствор.

Ход определения: берут две пробирки и номеруют, после чего в обе пробирки наливают по 10 капель раствора крахмала. Затем в 1-ю пробирку вносят 5 капель воды (контроль 1), в во 2-ю – 5 капель раствора слюны (опыт 1). Перемешивают и ставят в термостат при температуре 37⁰С для проведения гидролиза крахмала.

Через 15 минут достают пробирки из термостата и проводят реакции на обнаружения действия ферментов.

Из пробирки «контроль 1» отбирают 4 капли и переносят их в чистую центрифужную пробирку («контроль 2»). С содержимым пробирки «контроль 1» проводят реакцию Троммера, а с содержимым пробирки «контроль 2» проводят реакцию с йодом.

Из пробирки «опыт 1» отбирают 4 капли и переносят в центрифужную чистую пробирку («опыт 2»). С содержимым пробирки «опыт 1» проводят реакцию Троммера, а с содержимым пробирки «опыт 2» проводят реакцию с йодом.

Результат реакции записывают в протокол.