Окраска по методу Нейссера для выявления зерен волютина

1. Фиксированный на пламени горелки мазок окрашивают 1 – 2 мин. синькой Нейссера.

2. Синьку сливают, на препарат наносят несколько капель раствора Люголя на 1 мин.

3. Мазок промывают водой, подсушивают фильтровальной бумагой.

4. Докрашивают в течение 2 мин. раствором хризоидина или 1 – 3 мин. раствором везувина.

5. Промывают водой, подсушивают и микроскопируют.

Зерна волютина окрашиваются в синий цвет, тела микробных клеток – в светло-коричневый цвет.

( Волютин - один из типов включений. Непостоянно присутствует у коринебактерий, спирилл, дрожжей. Представляет собой запасной питательный материал в виде комплексов РНК с метаполифосфатами. Выявление В. применяют для идентификации коринебактерий дифтерии, у к-рых В. располагается в виде зерен по концам бактерий. Обнаруживают В. окраской по Нейссеру или Леффлеру )

Окраска по методу Пешкова для выявления бактериальных спор

1. На фиксированный мазок наливают синьку Леффлера и дают краске закипеть. Окрашивание мазка происходит кипящей синькой в течение 20 – 30 с.

2. Препарат промывают водой.

3. Докрашивают 0,5%-ным водным раствором нейтральрота в течение 30 – 60 с.

4. Промывают водой и высушивают.

Споры, окрашенные синькой Леффлера, имеют голубой цвет, вегетативные тела бактерий – красный цвет.

Окраска по методу Ожешко для выявления спор

1. На высушенный нефиксированный препарат (мазок готовится толстым и на краю стекла) наливают несколько капель 0,5%-ного раствора соляной кислоты и подогревают 1 – 2 мин. над пламенем горелки до закипания, после чего остатки кислоты сливают.

2. Остывший препарат промывают водой, подсушивают на воздухе и фиксируют на пламени горелки.

3. Окрашивают карболовым фуксином Циля (фуксин наливают на фильтровальную бумажку) с подогреванием до появления паров.

4. Обесцвечивают 5%-ным раствором серной кислоты в течение нескольких секунд.

5. Промывают водой.

6. Докрашивают синькой Леффлера или 1%-ным водным раствором малахитовой зелени в течение 3 – 5 мин.

Споры, окрашенные фуксином, имеют рубиново-красный цвет, вегетативные тела микробных клеток при докрашивании синькой Леффлера – синий цвет, при применении малахитовой зелени – зеленый цвет.

Окраска по методу Бурри для выявления капсул

На узкий конец предметного стекла наносят каплю туши в петлю исследуемого материала. Смесь перемешивают тщательно петлей, делают мазок, как мазок из крови, высушивают на воздухе и, не фиксируя, микроскопируют с иммерсионной системой. Фон препарата окрашен в темно-дымчатый цвет, микробные тела и их капсулы не окрашиваются тушью и остаются бесцветными, вследствие чего этот способ получил название негативного.

Окраска по методу Гинса для выявления капсул

1. Приготавливают негативно окрашенный по методу Бурри препарат.

2. Фиксируют любым химическим способом: метиловым спиртом, смесью Никифорова или другими смесями.

3. Промывают водой.

4. Окрашивают карболовым фуксином Циля, разведенным 1:3, в течение 3 – 5 мин.

5. Препарат промывают водой, высушивают и микроскопируют с иммерсионной системой.

При микроскопировании на темном фоне препарата контрастно выделяются неокрашенные капсулы, внутри которых находятся бактерии ярко-малинового цвета.

_________________________________________________________________________________

Иммерсионная система — оптическая система, в которой пространство между первой линзой и предметом заполнено жидкостью. Применяемая таким образом жидкость называется иммерсионной.

_________________________________________________________________________________