Паразитологическое исследование

Макро и микроскопические паразитологические методы лабораторной диагностики являются прямыми методами обнаружения гельминтов, их фрагментов, яиц и личинок гельминтов; вегетативных и цистных форм простейших. Используемые в диагностике микроскопические методы применяются по показаниям.

Материал, предназначенный для исследования, помещают в чисто вымытую посуду, которую закрывают крышкой или пробкой, упаковывают в деревянный ящик или бюкс и транспортируют в лабораторию.

1.Макроскопическое исследование. Исследование начинают с осмотра всей порции кала для обнаружения невооруженным глазом или с помощью лупы целых гельминтов или их фрагментов. Фекалии разводят водой до жидкой консистенции и небольшими порциями рассматривают в стеклянном кристаллизаторе или чашке Петри при хорошем освещении на темном фоне.

Чтобы лучше просмотреть кал, применяют метод отстаивания. В высоких стеклянных банках смешивают кал с большим количеством воды и отстаивают. Жидкость сливают, а осадок снова разводят водой. Так проделывают несколько раз, пока жидкость не станет прозрачной. Осадок исследуют с помощью лупы. Все образования, подозрительные на фрагменты гельминтов, рассматривают между двумя предметными стеклами, под лупой в капле глицерина, а при необходимости под микроскопом.

Дифференциация отдельных видов гельминтов основана на их анатомо-морфологических особенностях.

Определение вида нематод возможно по целям особям, реже - по крупным фрагментам, сохранившим характерные органы. Цестоды идентифицируют по зрелым членикам, гермафродитным членикам и сколексам.

Макроскопическое исследование позволяет обнаружить острицы, членики или обрывки стробилы.

2.Микроскопическое исследование.

Метод мазка. Деревянной палочкой или спичкой из разных мест порции берут 30-50мг фекалий и растирают на предметном стекле с несколькими каплями 50% раствора глицерина. Мазок накрывают покровным стеклом. Глицерин хорошо просветляет препарат.

Препарат изучают под малым увеличением микроскопа в темном поле зрения. Для выявления деталей строения яиц гельминтов микроскопируют при большом увеличении.

Метод обогащения. Метод обогащения позволяет концентрировать и выявлять яйца гельминтов из относительно большого количества испражнений (до 5,0г и более). Он основан на разности относительной платности яиц гельминтов и применяемого солевого раствора: если относительная плотность яиц больше относительной плотности жидкости, они концентрируются в осадке, в том случае, когда относительная плотность яиц меньше относительной плотности жидкости, они всплывают (методы флотации). Применение методов флотации наиболее эффективно для обнаружения яиц анкилостомы, некатора, власоглава, карликового цепня.

Максимальное количество яиц анкилостом всплывает через 10 мин, карликового цепня – через 15-20 мин, аскариды – через 1-2 часа, власоглава – 2-3 часа.

Методы осаждения. Примерно 1,5 гр. кала перемешивают деревянной палочкой с 5 мл 50% раствора соляной кислоты в химическом стаканчике. Смесь переливают в пробирку, добавляют 5 мл эфира, закрывают пробкой и энергично встряхивают несколько раз. Затем фильтруют в течение 1 мин через металлическую сетку. При этом образуются три слоя: верхний, содержащий эфир с растворенными жирами и продуктами их расщепления; средний – соляная кислота с растворенными солями и нижний, в котором остались непереваренные частицы пищи и яйца гельминтов. Верхние два слоя сливают, добавляют воду и опять центрифугируют. После этого 2-4 капли осадка пипеткой переносят на предметное стекло, накрывают покровным и микроскопируют. Этот метод позволяет обнаружить яйца гельминтоз, трематод.