
- •Введение
- •1. Литературный обзор
- •1.1. Молекуляно-генетический анализ количественных признаков.
- •1.2 Подходы для выявления аллельного полиморфизма
- •1.3. Характеристика генов основных белков молока.
- •1.3.1. Гены казеинов молока
- •1.3.2. Бета-лактоголобулин
- •1.4. Характеристика генов гормонов, влияющих на параметры молочной продуктивности
- •1.4.1. Соматотропин (gh)
- •1.4.2. Пролактин (prl)
- •1.5. Гипофизарный фактор транскрипции (pit-1)
- •2. Методы и объекты исследования
- •2.1. Выделение днк из крови
- •2.2. Определение белка в молоке.
- •2.3. Анализ полиморфизма гена каппа-казеина (csn3)
- •2.4. Анализ полиморфизма гена бета-лактоглобулина.
- •2.4.1. Анализ полиморфизма гена бета-лактоглобулина (βLg) по методике Medrano, et al., 1990 .
- •2.4.2. Анализ полиморфизма гена бета-лактоглобулина (βLg) по методике Гладырь е.А., 2001.
- •2.5. Анализ полиморфизма гена соматотропина по MspI-маркеру (gh/MspI)
- •2.6. Анализ полиморфизма гена соматотропина по AluI-маркеру (gh/AluI)
- •2.7. Анализ полиморфизма гена пролактина (prl)
- •2.8. Анализ полиморфизма гена гипофизарного фактора транскрипции (pit-1)
- •2.9. Статистическая обработка результатов
- •3. Результаты и обсуждение
- •3.1. Генетическая структура исследуемых групп крупного рогатого скота по гену каппа-казеина (csn3)
- •3.2. Генетическая структура исследуемых групп крупного рогатого скота по гену пролактина (prl).
- •3.3. Генетическая структура исследуемых групп крупного рогатого скота по гену гипофизарного фактора транскрипции (pit-I).
- •3.4. Генетическая структура исследуемых групп крупного рогатого скота по гену соматотропина (gh).
- •3.4.1. Исследование генетической структуры групп крупного рогатого скота по MspI-маркеру гена соматотропина.
- •3.4.2. Исследование генетической структуры групп крупного рогатого скота по AluI-маркеру гена соматотропина.
- •3.5. Сравнение распространения аллелей гена соматотропина по MspI- и AluI – маркерам у крс в Брянской области и других регионах.
- •3.6. Исследование генетической структуры групп крупного рогатого скота по гену бета-лактоглобулина (βLg).
- •3.7. Анализ сочетания мутаций при определении а и в аллелей гена β-лактоглобулина.
- •3.8. Определение гетерозиготности в изучаемых группах крупного рогатого скота
- •3.9. Анализ состава комплексных генотипов в исследуемых группах крс
- •4.0. Анализ влияния аллельных вариантов исследуемых генов на показатели молочной продуктивности крс.
- •4.1.1. Изучение связи генотипов бета-лактоглобулина с параметрами молочной продуктивности крс.
- •4.1.2. Определение влияния аллельных вариантов гена соматотропина по MspI-маркеру на параметры молочной продуктивности крс.
- •4.1.3. Анализ связи аллельных вариантов гена соматотропина по AluI-маркеру с параметрами молочной продуктивности крс.
- •4.1.4. Комплексное влияние вариантов гена соматотропина по AluI- и MspI - маркерам на молочную продуктивность
- •4.1.5. Анализ связи аллельных вариантов гена гипофизарного фактора транскрипции (pit-1) с параметрами молочной продуктивности крс.
- •Практические рекомендации
- •Список литературы
4.0. Анализ влияния аллельных вариантов исследуемых генов на показатели молочной продуктивности крс.
Молочная продуктивность определяется большим числом генов, с разным индивидуальным вкладом. Эти гены функционально связаны в блоки локусов количественных признаков (QTL). Для объективной оценки количественных признаков следует учитывать полиморфный вклад многих генов QTL, сочетание различных аллелей этих генов будет определять молочную продуктивность КРС.
Из литературных данных известно, что в качестве потенциальных маркеров молочной продуктивности относятся гены: каппа-казеина (CSN), β-лактоглобулина (BLG), пролактина (PRL), ген гипофизарный фактор транскрипции (PIT-1) и соматотропина(GH) по AluI и MspI маркерам.
Ген каппа-казеина (CSN3) - связан с белковомолочностью и технологическими свойствами молока. Аллель CSN3В ассоциирован с положительными технологическими свойствами молока. Пролактина (PRL) стимулирует развитие молочных желез, а также образование и секрецию молока. Соматотропин (гормон роста, GH) - важнейший регулятор, обладающий лактогенным и жиромобилизующим действием. Ряд исследователей выявили ассоциацию полиморфных вариантов гена GH с показателями продуктивности (удой, содержание жира в молоке) [Dybus A., 2002; Lechniak D., 2002; Pawar R.S., 2007; Михайлова М.Е., 2008].
Активное участие этих генов в формировании молочной продуктивности является основанием для наличия ассоциации их вариантов с параметрами молочной продуктивности.
В нашем исследовании мы попытались выявить связь вариантов генов β-лактоглобулина (BLG), гена гипофизарного фактора транскрипции (PIT-1) и соматотропина(GH) по AluI и MspI маркерам с параметрами молочной продуктивности проводили в группе коров черно-пестрой породы ОАО «Снежка-Госома». В связи с тем, что в анализируемой группе коров отмечен низкий уровень полиморфизма генов каппа-казеина и пролактина проанализировать их влияние и параметрами молочной продуктивности не представилось возможным.
4.1.1. Изучение связи генотипов бета-лактоглобулина с параметрами молочной продуктивности крс.
Ген бета-лактоглобулина (BLG) связан с белковомолочностью и показателями биологической ценности молока [Stralkowska N., 2002; Зиновьева Н.А. и др., 2003]. Варианты этого гена по-разному влияют на параметры молочной продуктивности. При анализе литературных данных не складывается однозначного мнения о влиянии конкретных аллелей этого гена на параметры молочной продуктивности.
Полученные нами результаты приведенные в таблице 4.1.1. по продуктивности группы коров чёрно-пёстрой породы OAO «Снежка-Госома» указывают на близкие показатели по среднему удою за месяц животных с генотипами АВ и ВВ, но в молоке коров с генотипом ВВ достоверно выше содержание жира. Животные с генотипом АА достоверно по этому параметру слабее других вариантов, но превосходят их по содержанию белка в молоке.
Таблица 4.1.1
Молочная продуктивность коров чёрно-пёстрой породы с различными генотипами бета-лактоглобулина
генотип |
Средний надой за месяц |
жирность,% |
Белок,% |
BB |
519,1±6,95 a |
3,693±0,0034 a |
3,505±0,27 a |
AB |
515,70±9,9 a |
3,625±0,0021 b |
4,45±0,15 b |
AA |
484,21±16,98 b |
3,6875±0,0015 c |
5,1±0,35 c |
Р≤0,05; a – отличие от групп b и c достоверно; b – отличие от групп a и c достоверно; c – отличие от групп a и b достоверно; значения, обозначенные одной и той же буквой достоверно не отличаются.
На рисунке 4.1.1. показано распределение животных с разными генотипами по уровню среднего надоя за месяц. Из схемы видно, что среди коров с генотипом АА по гену бета-лактоглобулина преобладают особи со значением надоя менее 500 кг. в месяц. В группе животных с генотипом ВВ наибольшая доля особей с надоем 500-550 кг. В месяц. Среди особей с генотипом АВ присутствуют животные с надоем более 550 кг. Многими исследователями отмечено, что при определенных условиях гетерозиготные особи превосходят по некоторым показателям гомозигот.
При переходе от группы животных с генотипом АА к животным с генотипом ВВ, отмечается постепенное понижение доли коров с надоем мене 500 кг. в месяц и увеличение количества животных с надоем от 500 до 550 кг. Это может свидетельствовать о положительном влиянии В-аллеля β-лактоглобулина на уровень надоя.
Рис.4.1.1 - Распределение коров черно-пестрой породы с разными генотипами бета-лактоглобулина по уровню среднего надоя за месяц.
Patel, сообщает, что вариант B ассоциирован с высоким содержанием в молоке казеиновых белков, высоким процентом жира и параметрами казеинового коагулята, а вариант A характеризуется высоким содержанием сывороточных белков и суммарным содержанием белков молока [Patel et al., 2007]. Зариповым было показано что, А-аллель гена β-лактоглобулина оказывает положительное влияние на молочную продуктивность коров (удой, содержание белка, лактозы и сухих веществ в молоке) [Зарипов Г.О., 2010]. В работе Гареевой И.Т., Долматовой И.Ю. по изучение влияния генотипов гена β-лактоглобулина на продуктивность и содержание жира в молоке коров симментальской породы местной и австрийской селекции в Республике Башкортостан отмечается, что в выборке коров местной селекции наибольшей величиной надоев и количеством молочного жира характеризовались особи с генотипом АА-генотип β-лактоглобулина. В группе же коров симменталов австрийской селекции, напротив, наибольшие надои (5103±204,3 кг) отмечены у коров с генотипом АВ, а самые низкие (4567,5±96,5 кг) - у особей с генотипом АА β-лактоглобулина [Гареева И.Т. и др. 2010]. Такие результаты на первое место, прежде всего, выводят комплексное действие сочетаний многих генов сложившихся в результате селекционной работы. В таком случае не исключен случайный характер в выявлении ассоциаций вариантов отдельного гена с параметрами молочной продуктивности, так как связь генотипа может теряться в сложной сети меженных взаимодействий.
Результаты нашего исследования частично соотносятся с данными Зарипова Г.О. и Patel [Зарипов Г.О., 2010; Patel et al., 2007].