- •Введение
- •1. Литературный обзор
- •1.1. Молекуляно-генетический анализ количественных признаков.
- •1.2 Подходы для выявления аллельного полиморфизма
- •1.3. Характеристика генов основных белков молока.
- •1.3.1. Гены казеинов молока
- •1.3.2. Бета-лактоголобулин
- •1.4. Характеристика генов гормонов, влияющих на параметры молочной продуктивности
- •1.4.1. Соматотропин (gh)
- •1.4.2. Пролактин (prl)
- •1.5. Гипофизарный фактор транскрипции (pit-1)
- •2. Методы и объекты исследования
- •2.1. Выделение днк из крови
- •2.2. Определение белка в молоке.
- •2.3. Анализ полиморфизма гена каппа-казеина (csn3)
- •2.4. Анализ полиморфизма гена бета-лактоглобулина.
- •2.4.1. Анализ полиморфизма гена бета-лактоглобулина (βLg) по методике Medrano, et al., 1990 .
- •2.4.2. Анализ полиморфизма гена бета-лактоглобулина (βLg) по методике Гладырь е.А., 2001.
- •2.5. Анализ полиморфизма гена соматотропина по MspI-маркеру (gh/MspI)
- •2.6. Анализ полиморфизма гена соматотропина по AluI-маркеру (gh/AluI)
- •2.7. Анализ полиморфизма гена пролактина (prl)
- •2.8. Анализ полиморфизма гена гипофизарного фактора транскрипции (pit-1)
- •2.9. Статистическая обработка результатов
- •3. Результаты и обсуждение
- •3.1. Генетическая структура исследуемых групп крупного рогатого скота по гену каппа-казеина (csn3)
- •3.2. Генетическая структура исследуемых групп крупного рогатого скота по гену пролактина (prl).
- •3.3. Генетическая структура исследуемых групп крупного рогатого скота по гену гипофизарного фактора транскрипции (pit-I).
- •3.4. Генетическая структура исследуемых групп крупного рогатого скота по гену соматотропина (gh).
- •3.4.1. Исследование генетической структуры групп крупного рогатого скота по MspI-маркеру гена соматотропина.
- •3.4.2. Исследование генетической структуры групп крупного рогатого скота по AluI-маркеру гена соматотропина.
- •3.5. Сравнение распространения аллелей гена соматотропина по MspI- и AluI – маркерам у крс в Брянской области и других регионах.
- •3.6. Исследование генетической структуры групп крупного рогатого скота по гену бета-лактоглобулина (βLg).
- •3.7. Анализ сочетания мутаций при определении а и в аллелей гена β-лактоглобулина.
- •3.8. Определение гетерозиготности в изучаемых группах крупного рогатого скота
- •3.9. Анализ состава комплексных генотипов в исследуемых группах крс
- •4.0. Анализ влияния аллельных вариантов исследуемых генов на показатели молочной продуктивности крс.
- •4.1.1. Изучение связи генотипов бета-лактоглобулина с параметрами молочной продуктивности крс.
- •4.1.2. Определение влияния аллельных вариантов гена соматотропина по MspI-маркеру на параметры молочной продуктивности крс.
- •4.1.3. Анализ связи аллельных вариантов гена соматотропина по AluI-маркеру с параметрами молочной продуктивности крс.
- •4.1.4. Комплексное влияние вариантов гена соматотропина по AluI- и MspI - маркерам на молочную продуктивность
- •4.1.5. Анализ связи аллельных вариантов гена гипофизарного фактора транскрипции (pit-1) с параметрами молочной продуктивности крс.
- •Практические рекомендации
- •Список литературы
3.9. Анализ состава комплексных генотипов в исследуемых группах крс
В основе системы генетического совершенствования пород лежит не просто селекция, но и сознательный поиск удачных сочетаний вариантов генов. Это делает структуру породы ещё более сложной.
Молочная продуктивность это количественный признак, развивающийся на основе совместного (аддитивного) действия многих генов, которые составляют разные пары аллелей, занимают разные локусы, часто в разных хромосомах. Обычно в число аллелей множественных генов входят варианты, положительно и отрицательно влияющие на развитие признака. В связи с этим, особенно важно, в рамках селекционной работы выявлять и формировать наиболее продуктивные сочетания аллелей генов влияющих на молочную продуктивность.
В нашей работе мы у каждой особи анализировали генотип по генам каппа-казеина, пролактина, гипофизарного фактора транскрипции, соматотропина по MspI и AluI- маркерам и бета-лактоглобулина. В связи с этим стало возможным определить сочетания вариантов генотипов по этим генам в пределах одного животного и выявить частоту комплексных генотипов в стаде.
В таблице 3.9.1. представлен состав выявленных комплексных генотипов выявленных в группах коров черно-пестрой, айрширской пород и частного скота.
Таблица 3.9.1
Сводная таблица комплексных генотипов, встреченных более одного раза.
порода |
Кол-во повторов |
CSN3 |
PRL |
GH/AluI |
GH/MspI |
βLG |
PIT-1
|
Айрширская порода |
8 |
AA |
AА |
LL |
+/- |
BB |
BB |
4 |
АА |
АА |
LL |
+/+ |
ВВ |
BB |
|
3 |
AA |
AA |
LV |
+/+ |
BB |
AA |
|
Частный скот |
5 |
AA |
AA |
LV |
+/+ |
BB |
AB |
3 |
AA |
AA |
LL |
+/+ |
AB |
AB |
|
Черно-пёстрая |
4 |
AA |
AA |
LV |
+/+ |
BB |
BB |
2 |
AA |
AA |
LL |
+/- |
AA |
BB |
|
2 |
AA |
AA |
LL |
+/+ |
AB |
BB |
В группе коров черно-пестрой породы ОАО «Снежка-Госома», удалось выявить три наиболее часто встречающихся комплексных генотипа. Частота наиболее часто встречающегося комплексного генотипа составляет 8%. Все приведенных в таблице комплексные генотипы объединяет то, что в их состав входят АА генотипы каппа-казеина, пролактина и ВВ-генотип PIT-1. Основными отличиями являются вариации по генотипам соматотропина по двум маркерам и бета-лактоглобулина. Надо отметить, что генотипы (LV ), (+/-) генотипы соматотропина и ВВ-генотип β-лактоглобулина по частотам не самые распространенные в анализируемой группе коров черно-пестрой породы, значения их часто соответственно составляют – 0,3; 0,26; 0,33.
В группе коров айрширской породы СПХ «Сельцо» также удалось выявить только три наиболее часто встречающихся комплексных генотипа.
В этой группе частота одинаковых комплексных генотипов несколько выше, чем в группе коров черно-пестрой породы. В состав комплексных генотипов животных этой группы входят достаточно редкие генотипы анализируемых генов. Так, например, в состав одного из комплексных генотипов, входит (+/-), частота встречаемости которого составляет 0,299, а в или генотип АА PIT-1, который встречается еще реже (0,113).
Основные отличия комплексных генотипов этой группы состоят в вариациях генотипов гена соматотропина по двум маркерам и наличии генотипа АА PIT-1, чего не наблюдалось в группе коров черно-пестрой породы.
Наиболее гетерогенной оказалась группа коров частного скота. В этой группе мы выявили только два варианта комплексных генотипов с самой низкой частотой из всех анализированных групп.
В составе выявленных в этой группе комплексных генотипов также встречаются не самые распространенные варианты генотипов конкретных генов. Это, например, АВ-генотип гипофизарного фактора транскрипции (PIT-1), частота которого составляет 0,25.
В целом из таблицы 3.9.1. видно, что наиболее однородной является группа коров айрширской порода СПХ Сельцо. В этой выборке частота одинаковых совокупных генотипов достигает 16% и самое высокое присутствие гомозиготных генотипов. В группе частного скота частота повторений сочетаний генотипов была минимальной, всего 3%.
Для каждой группы КРС были характерны специфические сочетания генотипов, которые не повторялись в других анализируемых выборках. Различия совокупных генотипов всех анализируемых групп заключались в изменении генотипов GH/AluI, GH/MspI βLG и PIT-1. По локусам CSN3 и PRL все сочетания были одинаковы.
На этих этапах работы на молекулярно-генетическом уровне охарактеризована генетическая структура двух пород КРС и частного скота на территории Брянской области по ДНК-маркерам, участвующих в формировании признака молочной продуктивности. Отмечен высокий уровень гомозиготности и отсутствие некоторых вариантов генов.
Проведенные исследования позволяют выявить возможности генетического совершенствования коров чёрно-пёстрой и айрширской пород в направлении повышения качества и технологических свойств молока, путем накопления в стадах животных, несущих в своём геноме желательные аллельные варианты анализируемых генов.