
- •Введение
- •1. Литературный обзор
- •1.1. Молекуляно-генетический анализ количественных признаков.
- •1.2 Подходы для выявления аллельного полиморфизма
- •1.3. Характеристика генов основных белков молока.
- •1.3.1. Гены казеинов молока
- •1.3.2. Бета-лактоголобулин
- •1.4. Характеристика генов гормонов, влияющих на параметры молочной продуктивности
- •1.4.1. Соматотропин (gh)
- •1.4.2. Пролактин (prl)
- •1.5. Гипофизарный фактор транскрипции (pit-1)
- •2. Методы и объекты исследования
- •2.1. Выделение днк из крови
- •2.2. Определение белка в молоке.
- •2.3. Анализ полиморфизма гена каппа-казеина (csn3)
- •2.4. Анализ полиморфизма гена бета-лактоглобулина.
- •2.4.1. Анализ полиморфизма гена бета-лактоглобулина (βLg) по методике Medrano, et al., 1990 .
- •2.4.2. Анализ полиморфизма гена бета-лактоглобулина (βLg) по методике Гладырь е.А., 2001.
- •2.5. Анализ полиморфизма гена соматотропина по MspI-маркеру (gh/MspI)
- •2.6. Анализ полиморфизма гена соматотропина по AluI-маркеру (gh/AluI)
- •2.7. Анализ полиморфизма гена пролактина (prl)
- •2.8. Анализ полиморфизма гена гипофизарного фактора транскрипции (pit-1)
- •2.9. Статистическая обработка результатов
- •3. Результаты и обсуждение
- •3.1. Генетическая структура исследуемых групп крупного рогатого скота по гену каппа-казеина (csn3)
- •3.2. Генетическая структура исследуемых групп крупного рогатого скота по гену пролактина (prl).
- •3.3. Генетическая структура исследуемых групп крупного рогатого скота по гену гипофизарного фактора транскрипции (pit-I).
- •3.4. Генетическая структура исследуемых групп крупного рогатого скота по гену соматотропина (gh).
- •3.4.1. Исследование генетической структуры групп крупного рогатого скота по MspI-маркеру гена соматотропина.
- •3.4.2. Исследование генетической структуры групп крупного рогатого скота по AluI-маркеру гена соматотропина.
- •3.5. Сравнение распространения аллелей гена соматотропина по MspI- и AluI – маркерам у крс в Брянской области и других регионах.
- •3.6. Исследование генетической структуры групп крупного рогатого скота по гену бета-лактоглобулина (βLg).
- •3.7. Анализ сочетания мутаций при определении а и в аллелей гена β-лактоглобулина.
- •3.8. Определение гетерозиготности в изучаемых группах крупного рогатого скота
- •3.9. Анализ состава комплексных генотипов в исследуемых группах крс
- •4.0. Анализ влияния аллельных вариантов исследуемых генов на показатели молочной продуктивности крс.
- •4.1.1. Изучение связи генотипов бета-лактоглобулина с параметрами молочной продуктивности крс.
- •4.1.2. Определение влияния аллельных вариантов гена соматотропина по MspI-маркеру на параметры молочной продуктивности крс.
- •4.1.3. Анализ связи аллельных вариантов гена соматотропина по AluI-маркеру с параметрами молочной продуктивности крс.
- •4.1.4. Комплексное влияние вариантов гена соматотропина по AluI- и MspI - маркерам на молочную продуктивность
- •4.1.5. Анализ связи аллельных вариантов гена гипофизарного фактора транскрипции (pit-1) с параметрами молочной продуктивности крс.
- •Практические рекомендации
- •Список литературы
3.8. Определение гетерозиготности в изучаемых группах крупного рогатого скота
По пяти из анализированных генетических маркеров (CSN, PRL, GH/AluI, GH\MspI, PIT-1), в отобранных группах животных, наблюдается преимущественная гомозиготизация в сторону одного из аллелей, приводящая к исчезновению другого. Наиболее гетерогенной группой животных по результатам наших исследований, является частный скот. На фоне отсутствия В-аллеля каппа-казеина, общий уровень гетерозиготности в этой группе по анализируемым маркерам выше, чем в других выборках, за исключение AluI- и MspI-маркеров гена соматотропина (рис. 3.8.1.). По MspI-маркеру в этой группе отмечена самая низкая гетерозиготность из всех опытных групп крупного рогатого скота.
Рис 3.8.1 - Уровень выявленной гетерозиготности (Hobs) в анализируемых группах коров.
1 – черно-пестрая порода, ОАО «Снежка-Госома; 2 – айрширская порода, СПХ Сельцо; 3 - частный скот (Жирятинский р-н, Брянской области).
В литературных источниках имеются сообщения о резком снижении частоты В-аллеля гена каппа-казеина, а в ряде случаев полному его отсутствию у других пород КРС. [Хаертдинов, 1997, Гладырь, 2001, Костюнина, 2004]. В ряде работ приводятся приближенные к установленным нами значениям частот генотипов ВВ гена PRL [Хатами, 2004, Алипанах, 2006]. В некоторых работах отмечается полное отсутствие (-/-) генотипа гена гормона роста и низкая частота VV-генотипа по AluI-маркеру. [Максименко, Хатами, 2004, Lucy, 1993, Kemenes, 1999, Арнаут, 2008]. Преобладание генотипа ВВ локуса PIT-1 отмечается в работе исследователей Cosier с соавторами [Cosier et al., 2008]. Аллель В этого гена широко представлен в группах коров чёрно-пестрой породы в хозяйствах Польши [Dybus, 2004]. Почти одинаковая встречаемость аллелей гена бета-лактоглобулина отмечается в работах Усенбекова и Graml [Усенбекова, 1995, Graml, 1984]. Так же как и в исследуемых нами группах КРС у животных серой украинской породы преобладающим был вариант В β-лактоглобулина [Глазко В. И.] После анализа литературных данных и результатов наших исследований складывается впечатление о существовании общей тенденции по снижению полиморфизма и исчезновению ценных вариантов анализируемых генов.
Косвенно такая картина свидетельствует о гомозиготизации и по аллелям других генов, несущих как положительные, так и патологичные признаки.
В процессе формирования генетической структуры стада по разным причинам участвуют только небольшое число избранных особей, как правило, с неизвестными генотипами. При таком способе селекции возрастает роль генетического дрейфа, из-за которого происходит либо фиксация, либо потеря некоторых хозяйственно ценных аллелей. Потеря аллелей приводит к тому, что генетическая структура стада, вероятно и породы, становится более гомозиготной. Подобная ситуация сложилась в группах коров и телят черно-пестрой породы ОАО "Снежка-Госома", генетические структуры которых резко отличатся. Так, например, в отличие от коров в группе телят утеряны аллель А гена Pit1 и генотип ВВ гена пролактина и произошла еще большая гомозиготизация в сторону (+)-аллеля соматотропина. Использование этих телят в дальнейшей селекционной работе уже не вернет ВВ генотип гена Pit1 и в целом вероятно ускорит темпы обеднения генетической структуры стада.
Кроме того, причинами обеднения генетической структуры стада могут быть:
инбридинг, обусловленный разведением коров в замкнутых популяциях, которое ограничивает приток генов из других популяций и линий [Алтухов Ю.П., 1983; Имашева А.Г., 1998].
искусственный отбор по морфофизиологическим признакам и показателям продуктивности,