
- •Введение
- •1. Литературный обзор
- •1.1. Молекуляно-генетический анализ количественных признаков.
- •1.2 Подходы для выявления аллельного полиморфизма
- •1.3. Характеристика генов основных белков молока.
- •1.3.1. Гены казеинов молока
- •1.3.2. Бета-лактоголобулин
- •1.4. Характеристика генов гормонов, влияющих на параметры молочной продуктивности
- •1.4.1. Соматотропин (gh)
- •1.4.2. Пролактин (prl)
- •1.5. Гипофизарный фактор транскрипции (pit-1)
- •2. Методы и объекты исследования
- •2.1. Выделение днк из крови
- •2.2. Определение белка в молоке.
- •2.3. Анализ полиморфизма гена каппа-казеина (csn3)
- •2.4. Анализ полиморфизма гена бета-лактоглобулина.
- •2.4.1. Анализ полиморфизма гена бета-лактоглобулина (βLg) по методике Medrano, et al., 1990 .
- •2.4.2. Анализ полиморфизма гена бета-лактоглобулина (βLg) по методике Гладырь е.А., 2001.
- •2.5. Анализ полиморфизма гена соматотропина по MspI-маркеру (gh/MspI)
- •2.6. Анализ полиморфизма гена соматотропина по AluI-маркеру (gh/AluI)
- •2.7. Анализ полиморфизма гена пролактина (prl)
- •2.8. Анализ полиморфизма гена гипофизарного фактора транскрипции (pit-1)
- •2.9. Статистическая обработка результатов
- •3. Результаты и обсуждение
- •3.1. Генетическая структура исследуемых групп крупного рогатого скота по гену каппа-казеина (csn3)
- •3.2. Генетическая структура исследуемых групп крупного рогатого скота по гену пролактина (prl).
- •3.3. Генетическая структура исследуемых групп крупного рогатого скота по гену гипофизарного фактора транскрипции (pit-I).
- •3.4. Генетическая структура исследуемых групп крупного рогатого скота по гену соматотропина (gh).
- •3.4.1. Исследование генетической структуры групп крупного рогатого скота по MspI-маркеру гена соматотропина.
- •3.4.2. Исследование генетической структуры групп крупного рогатого скота по AluI-маркеру гена соматотропина.
- •3.5. Сравнение распространения аллелей гена соматотропина по MspI- и AluI – маркерам у крс в Брянской области и других регионах.
- •3.6. Исследование генетической структуры групп крупного рогатого скота по гену бета-лактоглобулина (βLg).
- •3.7. Анализ сочетания мутаций при определении а и в аллелей гена β-лактоглобулина.
- •3.8. Определение гетерозиготности в изучаемых группах крупного рогатого скота
- •3.9. Анализ состава комплексных генотипов в исследуемых группах крс
- •4.0. Анализ влияния аллельных вариантов исследуемых генов на показатели молочной продуктивности крс.
- •4.1.1. Изучение связи генотипов бета-лактоглобулина с параметрами молочной продуктивности крс.
- •4.1.2. Определение влияния аллельных вариантов гена соматотропина по MspI-маркеру на параметры молочной продуктивности крс.
- •4.1.3. Анализ связи аллельных вариантов гена соматотропина по AluI-маркеру с параметрами молочной продуктивности крс.
- •4.1.4. Комплексное влияние вариантов гена соматотропина по AluI- и MspI - маркерам на молочную продуктивность
- •4.1.5. Анализ связи аллельных вариантов гена гипофизарного фактора транскрипции (pit-1) с параметрами молочной продуктивности крс.
- •Практические рекомендации
- •Список литературы
3.4.2. Исследование генетической структуры групп крупного рогатого скота по AluI-маркеру гена соматотропина.
После обработки продукта ПЦР длиной 223 н.п. эндонуклеазой AluI в анализируемых группах крупного рогатого скота были с разной частотой выявлены L и V- аллели гормона роста по AluI-маркеру. На рисунке 3.4.2.1, приведена электрофореграмма с рестрикционным анализом при определении генотипов соматотропина по AluI-маркеру. Частоты встречаемости аллелей и генотипов соматотропина по AluI -маркеру представлены в таблице 3.4.2.1.
Из таблицы 3.4.2.1. видно, что в группах коров и телят черно-пестрой породы, содержащихся ОАО "Снежка-Госома" отсутствует VV-генотип. Несмотря на это, не отмечено достоверного отклонения выявленных частот аллелей от теоретически рассчитанных по Харди-Вайнбергу. Вероятно, V-аллель в этих группах в достаточном количестве представлен в гетерозиготном состоянии, это отражается в превышении значений Hobs над Hex.
В группах коров айрширской породы и частного скота встречаются единичные животные с VV генотипом, основная масса V аллеля также находится в гетерозиготном состоянии. В этих группах отмечаются приближенные значения наблюдаемой и ожидаемой гетерозиготности.
Рис 5. Электрофоретический анализ продуктов рестрикции при определении генотипа соматотропина по AluI-маркеру. 1 – маркер молекулярных масс М27 (СибЭнзим); Генотипы образцов 2-9 указаны на фотографии. Генотипу LL соответствует продукт 171 и 52 п.н., генотипу LV – 223, 171 и 52 п.н. и генотипу VV – 223 п.н.
Таблица 3.4.2.1
Генетическая структура анализируемых групп коров по AluI-маркеру гена соматотропина.
Группы животных |
n |
Частота встречаемости генотипов |
χ2 |
Частота встречаемости аллелей |
Hobs |
Hex |
|||
LL |
LV |
VV |
L |
V |
|||||
Коровы черно-пестрой породы |
55 |
0,7 |
0,3 |
0 |
1,0537 |
0,85 |
0,15 |
0,3 |
0,255 |
Телята черно-пестрой породы |
16 |
0,63 |
0,36 |
0 |
0,3399 |
0,81 |
0,19 |
0,3636 |
0,2975 |
Коровы айрширской породы |
50 |
0,553 |
0,361 |
0,085 |
0,0964 |
0,74 |
0,26 |
0,362 |
0,390 |
Частный скот |
146 |
0,59 |
0,36 |
0,05 |
0,0514 |
0,76 |
0,22 |
0,3585 |
0,3604 |
Н
а
рисунке 3.4.2.2 приведена гистограмма с
соотношением частот генотипов
соматотропина по MspI-
и AluI
– маркерам в анализируемых группах
КРС. Из гистограммы видно, что во всех
анализируемых группах преобладают
животные с гомозиготным генотипом LL
и (+/+). Наивысшая частота LL
генотипа выявлена в стаде коров
черно-пестрой породы, (+/+) -генотип чаше
встречается в группе частного скота.
Генотип VV
во всех группах встречались намного
реже. В стаде коров Айрширской породы,
по сравнению с другими группами, была
установлена наивысшая частота гетерозигот
по двум маркерам, но практически не
отсутствовал (-/-)-генотип.
Рис.3.4.2.2 - Соотношение частот генотипов соматотропина по MspI- и AluI – маркерам в анализируемых группах КРС. 1 – группа коров черно-пестрой породы, ОАО «Снежка-Госома; 2 – частный скот (Жирятинский р-н, Брянской области); 3 – группа коров айрширской породы, СПХ Сельцо.