3. Депротеинизация

4. Обратная транскрипция – синтез ДНК-копии. ОТ обладает несколькими активностями: ДНК-полимеразная (катализирует синтез ДНК, комплементарной вирусной), рибонуклеазная (расщепляет вирионную РНК), интегразная (катализирует встраивание ДНК-копии в хромосомную ДНК клетки, образуя провирус). С образованием провируса инфекция становится долговременной, клетка будет нести инфекционное начало до конца своей жизни, передавая потомству.

5. Вторая часть жизненного цикла ВИЧ – производство новых вирионов, при активации гена tat идет синтез НК и белков вируса, сборка вирионов и выход вируса путем почкования.

Резистентность. ВИЧ малоустойчив в окружающей среде. При комнатной температуре сохраняется до 4 суток, после обработки спиртом, эфиром инактивируется через 5-10 минут, быстро гибнет при действии моющих средств. При кипячении быстро погибает. ВИЧ достаточно устойчив к высушиванию, малочувствителен к УФИ.

Патогенез ВИЧ-инфекции

Источник инфекции: больной СПИДом и носитель ВИЧ. Вирус в организме инфицированного человека содержится во всех биологических жидкостях: в крови, в сперме, в слюне, в моче, в материнском молоке, в поте и т.д. Пути передачи ВИЧ: половой контакт, парентеральный, вертикальный. Не доказана передача ВИЧ контакта и трансмиссивно. Патогенез имеет 2 стадии: поражение иммунной системы и развитие оппортунистических инфекций и злокачественных опухолей.

Основной мишенью для ВИЧ являются клетки, несущие СD4-рецепторы. В первую очередь это Т-хелперы и моноциты, а также астроциты, сперматозоиды и др. Репродукция вируса из провируса начинается при стимуляции Т-хелперов любыми АГ.

Разрушение Т-хелперов приводит к глубокому нарушению системы иммунитета. Соотношение Тх/Тс становится меньше 1,0 (норма 1,4-2,0). Снижается абсолютное число Тх (менее 400 клеток в 1 мл крови при норме 800-1000 клеток /мл). Ослабляются иммунные реакции, снижается продукция иммуноглобулинов В-лимфоцитами, ИФ, комплемента, ИЛ. В результате заражения макрофагов они активируются, выделяют ИЛ1 и aФНО, которые индуцируют воспаление. Эти цитокины, особенно aФНО, стимулируют транскрипцию вируса, интегрированного в геном клетки. Макрофаги становятся основным резервуаром вируса в организме. Они переносят вирус в разные органы (мозг, почки и др.), а также инфицируют Т-хелперы при контакте с ними в лимфоузлах.

Стадии ВИЧ-инфекции:

• Инкубационный период – от момента заражения до появления первых симптомов или АТ. Продолжительность от нескольких недель до нескольких месяцев (в среднем – 6 месяцев, иногда 2-4 и более лет).

• Острая ВИЧ-инфекция развивается в 50-90% случаев и характеризуется лихорадкой, гриппоподобным синдромом, лимфаденопатией и др. Длительность от нескольких дней до нескольких месяцев.

• Латентная (бессимптомная) – может длиться годами (в среднем 2 года)

• Персистирующая генерализованная лимфаденопатия – характеризуется системным увеличением лимфатических узлов всех групп, частыми ОРВИ, может развиваться туберкулез и др.

• СПИД-ассоциированный симптомокомплекс:

1. Пре-СПИД – немотивированная лимфаденопатия, потеря массы тела, лихорадка, диарея, хроническая усталость, ночные поты.

2. СПИД

3. Оппортунистические инфекции и опухоли при СПИДе - СПИД-индикаторные болезни По ВОЗ: кандидоз, пневмоцистная пневмония, токсоплазмоз головного мозга, герпетическая инфекция (более 1 месяца), злокачественные опухоли: саркома Капоши и лимфома мозга.

Особенности ВИЧ-инфекции у детей

• Задержка темпов физического развития: отсутствие прибавки массы тела (дефицит составляет 10-20% и более от должной)

• Задержка нервно-психического развития

• Увеличение лимфатических узлов

• Длительная лихорадка

• Часто повторяющиеся бактериальные и вирусные инфекции

• Увеличение печени и селезенки

• Длительная диарея

• Редкие случаи саркомы Капоши

• Быстро прогрессирующее течение

Подходы к лечению ВИЧ-инфекции: Этиотропная терапия противовирусными препаратами (азидотимидин и др.) – ингибиторы ОТ; ингибиторы протеазы ВИЧ (инвираза). Иммуномодулирующая и иммунозаместительная терапия. Лечение вторичных инфекций.

Диагностика ВИЧ-инфекции

• Определение наличия вируса, его АГ или копий РНК в материалах от больного или ВИЧ-инфицированного.

• Серологическая диагностика, основанная на выявлении специфических АТ к поверхностным (gp120 и gp41) и внутренним (p18 и p24) белкам ВИЧ. У 90% больных антитела появляются в течение первых 3 месяцев после заражения, у 5-9% – через 6 месяцев, а у 1% – позже. Это исследование проводят в 2 этапа: на первом из них определяют АТ к вирусным белкам при помощи иммуноферментного анализа (ИФА). На втором этапе положительные сыворотки исследуют методом иммуноблотинга, в котором выявляют антитела против индивидуальных антигенов вируса. При выявлении антител не менее чем к трем антигенам (gp120, gp41, р24) человека считают ВИЧ-инфицированным.

• Выявление специфических для ВИЧ-инфекции изменений в иммунной системе.

• Лабораторная диагностика оппортунистических инфекций (СПИД-ассоциированных заболеваний).

Профилактика ВИЧ-инфекции

Специфическая профилактика ВИЧ-инфекции не разработана. Продолжаются интенсивные исследования по созданию вакцины. Неспецифическая очень активная.

145. ДНК-вирусы: классификация. Натуральная оспа: специфическая профилактика, эрадикация. Аденовирусы: классификация, характеристика. Аденовирусные инфекции: патогенез, иммунитет, этиологическая диагностика.

ДНК-геномные вирусы. Эти вирусы менее изменчивы, более консервативны, чем РНК-геномные; большинство из них реплицируются в ядрах клеток.

Семейства:

Adenoviridae – линейная, 2-нитчатая, нет суперкапсида.

Herpesviridae – линейная, 2-нитчатая, суперкапсид, простой гепатит, цитомегалия, ветряная оспа, инфекционный мононуклеоз.

Hepadnaviridae – кольцевая с 1-нитчатым участком, 2-нитчатая, суперкапсид, гепатит В.

Papovaviridae – кольцевая, 2-нитчатая, суперкапсида нет, папиллома, полиома.

Poxviridae – замкнутая, 2-нитчатая, суперкапсид, осповакцина, натуральная оспа.

Parvoviridae – линейная, 1-нитчатая, суперкапсида нет, аденоассоциированный вирус.

Семейство adenoviridae

Аденовирусные инфекции – группа ОРВИ, которая характеризуется поражением эпителия миндалин и слизистых оболочек дыхательных путей, глаз, кишечника и симптомами интоксикации.

Роды: Mastadenovirus (млекопитающих - 80) и Aviadenovirus (птичьи - 15), Atadenovirus, Siadenovirus.

Морфология.

- форма икосаэдра

- имеет капсид, фибры (нити) - рецепторы вируса, дезоксинуклеопротеид.

- линейная двунитевая ДНК, которая вместе с протеинами формирует плотную сердцевину вируса – дизоксирибонуклеопротеид, образующий 12 петель.

Антигенная структура.

- гексоны: группоспецифический антиген А, общий для аденовирусов.

- у основании пентонов имеется антиген В, по которому аденовирусы делят на 3 группы.

- в фибрах присутствуют антиген С, определяющий типоспецифические свойства, по нему различают серовары аденовирусов.

Антигенные свойства положены в основу классификации аденовирусов. Наиболее часто встречаются серовары 3,4,7,8,14,21. Аденовирусы обладают идентичным комплемент-связывающим АГ, поэтому их антигены выявляют в РСК с помощью группоспецифической антисыворотки. Пентоны и фибры обусловливают гемагглютинирующие свойства вирусов.

Эпидемиология и патогенез.

По способности к поражению клеток аденовирусы разделяют на 6 групп (А-G). Вирусы группы А вызывают трансформирующую инфекцию – появление опухолей у животных. Вирусы группы В (3,7,11,14,21) и группы Е (4) вызывают острые инфекции, группы С (1,2,5,6) индуцируют более легкие поражения, склонны к длительной персистенции в тканях аденоидов, миндалин, брыжеечных л.у.

• ОРВИ гриппоподобные (1, 2, 4-6)

• Фарингоконъюнктивиты (3, 7)

• Эпидемический кератоконъюнктивит (8, 19, 37)

• Инфекции легких: у новорожденных – по типу бронхиолитов, 1,2,5 серовары. Тяжелые пневмонии у организованной молодежи (войска) (4, 7).

• Гастроэнтериты – обычно у детей младшего возраста, серотипы 40,41,38; возможна инвагинация вседствие поражения (увеличения) лимфоузлов брыжейки.

• Редко вызывают менингоэнцефалиты и геморраги-ческие циститы ( 11, 21) – дети старшего возраста.

Источник инфекции – больной человек, который выделяет вирусы из носоглотки в острый период заболевания, а в более поздние сроки – с фекалиями. Механизм заражения – воздушно-капельный, в некоторых случаях – фекально-оральный. Возможны эпидемические вспышки инфекции в коллективах. Наиболее восприимчивы дети от 6 месяцев до 5 лет. До 6 месяцев у детей естественный пассивный иммунитет от матери. У 95% взрослых в сыворотке крови есть АТ к наиболее распространенным сероварам вирусов. Входные ворота – слизистые оболочки ВДП, глаз, кишечника. Вирус прикрепляется фибрами к эпителиальным клеткам и проникает в них, после репликации вируса клетки разрушаются.

Инкубационный период – 5-9 дней. По типу поражений чувствительных клеток выделяют три варианта инфекций: продуктивная инфекция сопровождается гибелью клеток после выхода вирусов; персистирующая инфекция протекает хронически, бессимптомно; трансформирующая инфекция – при заражении новорожденных грызунов (мыши, крысы, хомяки) аденовирусы группы А вызывают у них образование опухолей.

Иммунитет после инфекции типоспецифический за счет sIgA-антител. Повторные инфекции вызывают другие серовары.

Лечение. При легкой форме – симптоматические средства. При среднетяжелых и тяжелых формах – противовирусные препараты, донорский иммуноглобулин.

Профилактика. Изоляция больных, в детских коллективах – стимуляторы интерферона, по показаниям применяют вакцину из инактивированных серотипов 3,4,7,8.

Лабораторная диагностика

Материал – смыв из носоглотки, отделяемое конъюнктивы, реже – фекалии, обработанные антибиотиками, моча, биопсийный матерьял.

Вирусологический метод: Культивируют в культурах клеток человека (эпителиальные клетки, клетки амниона, почек), а также в культурах клеток Hela, Hep-2. Они реплицируются в ядрах клеток.

ЦПД проявляется через 24-96 часов:

• Мелкоклеточная дегенерация («виноградные гроздья»).

• Округление клетки, вакуолизация, ядерные и цитоплазматические включения, пикноз и распад ядра.

Идентификация по данным РСК, РН, РИФ с диагностическими сыворотками против наиболее часто встречающихся сероваров.

Молекулярно-биологический: ПЦР

Серологический: ИФА, РСК, РТГА – с парными сыворотками.

Семейство Poxviridae.

После получения Э.Дженнером (1796) вакцины против оспы началась активная борьба с этой болезнью. В СССР она была ликвидирована к 1937 г., но завозные случаи регистрировались до 1960 г.

Свойства. Вирус натуральной оспы крупный, имеет кирпичеобразную форму с закругленными углами. В центре располагается сердцевина в форме гантели, окруженная белковым капсидом. В ней содержится ДНК, внутренние белки. Наружная оболочка вириона содержит липиды и трубчатые белковые структуры, которые образуют выступы. ДНК двунитевая, нефрагментированная. Характерно ЦПД в виде очаговой дегенерации клеточного пласта. Поксвирусы – единственные из ДНК-геномных вирусов, которые размножаются в цитоплазме клеток хозяина.

Источником инфекции являются больные люди в течение всего периода болезни. Передается воздушно – капельным и контактным путем.

Патогенез и клиника. Входные ворота – слизистая оболочка ВДП. Первичное размножение происходит в лимфоидной ткани кольца Пирогова, а далее вирус проникает в кровь и поражает клетки ретикулоэндотелиальной ткани, в них размножается, опять возникает вирусемия. Дерматропное действие вируса связано с его способностью проникать из крови в эпидермис, вызывать пролиферацию шиповидных клеток и дегенерацию клеток мальпигиева слоя.

Инкубационный период 8-18 дней, заболевание начинается остро. Через 2-4 дня на слизистой оболочке полости рта и коже появляется характерная сыпь (стадии папулы, пустулы, рубца). Все элементы сыпи появляются одновременно и локализуются на лице и конечностях. С появлением сыпи температура снижается, а затем повышается, когда образуются пустулы. От момента появления сыпи до отпадения корочек проходит около трех недель. При классическом тяжелом течении болезни летальность достигает 40%, при легкой форме заболевания летальность не превышает 2%.

Лабораторная диагностика

Микроскопия окрашенных по Морозову мазков для выявления телец Пашена и внутриклеточных включений Гварниери, которые располагаются в цитоплазме клеток.

Серологическая идентификация включает постановку РН на куриных эмбрионах, РТГА и РПГА, ИФА, ПЦР.

Специфическая профилактика. В 1967 г. ВОЗ разработала план мероприятий по ликвидации оспы во всем мире, широкую материальную помощь в этой программе оказали СССР, США, Швеция. Использовались живые вакцины, в состав которой входил вирус осповакцины. В 1977 г. в Сомали был зарегистрирован последний случай оспы в мире. Таким образом, оспа исчезла как нозологическая форма благодаря вакцинации населения. В настоящее время по рекомендации ВОЗ обязательная вакцинация против оспы отменена.