67.Методы генетических исследований человека-близнецовый метод.

Близнецовый метод,изучающий степень зависимости признака от насл.особенностей орг-ма и условий среды,имеет большое значение среди методов генетики человека.Близнецы у человека имеют разное происхождение.Монозиготные близ-ы развив-ся из 1 зиготы.Партнеры монозиг.близнецов имеют идентичные генотипы,схожи по признакам.Различие их признаков зависит от условий среды.Дизиготные рождают из различ.зигот.Партнеры дизиготн.близнецов генетически различны,не схожи по признакам.Сущность близн.метода закл-ся в сравнении внутрипарного сходства в группах монозиготных и дизиготных,что позволяет с пом.специальных формул оценить относ.роль насл-ти и среды в резвитии конкретного признака:

Н=(Смz-Cdz)/(100-Cdz)*100%; E=100-H,

где Н–коэф-т неследуемости,

Е-влияние среды

Cmz-процент конкордантных пар в группе монозиг.

Cdz-то же в группе дизигот.

Значение метода:в анализе фенотипической вариации индивид-го генотипа,генетике развития,фенотипических проявлениях наслед.аномалий.

68.Методы генетических исследований:цитогенетический метод.

этот метод занимает существенное место среди многих методов изучения наследств.патологии человека.С пом.цитогенетического метода возможен анализ материальных основ насл-ти кариотипа человека в норме и патологии,изучение нектр закономерностей мутационного и эволюционного процессов.

Методы цитогенетического анализа:

1.Изучение ядер делящихся клеток(кариотипирование):а)метафазных клеток прямым методом хромосом в клетках костно мозга;б)исслед-ие метафазных клеток непрямым методом(культуры клеток перифер.крови,кожи,фибробластов). Чаще используется культура лейкоцитов периф.крови.ж культивируют лейкоциты в присутствии фитогемаглютинина,способствующего делению лейкоцитов.Обработав эту культуру клеток колхицином и гипотоническим раствором хлорида натрия,получают хорошо различимые при микроскопировании хромосомные метафазные пластинки,необходимые для кариологического анализа. Препараты окрашивают рутинным методом,используя азуры,основной фуксин,орсеин и др. В наст.время применяют специал.методы дифференциального окрашивания хромосом. Основываясь на дифференц.спирилизации хромосом по длине,дифференц.окрашивание хромосом проводят флюорохромами( Q-окраска) и основными нефлюоресцирующими красителями(окраска по Романовскому-Гимза)-G,R,C-окраски.Q-окраска проводится флюорохромами:акрихин,акрихин-иприт,акрихит-пропил,акридиновый оранжевый. В люминесцентный микроскоп видно дифференц.свечение по длине хромосомы. Рисунок кажд.хромосомы специфичен по числу, положению,размерам по-разному светяхщихся сегментов. С пом.Q-окрашивания хорошо выявляется длинное плечо У-хромосомы.G-окраска-число,величина,расположение сегментов в хромосоме аналогичны рисунку при Q-окраске.R-окраска-рисунок противоположен G-окраске.С-окраска выявляет центромерный и околоцентромерный районы в хзромосомах. По локализации выделяют 4 типа С-хроматина:1)собственно-центромерный;2)гетерохроматин вторичных околоцентромерн.перетяжек1,9,16;3)гетерохроматин коротких плеч акроцентрических аутосом;4)гетерохроматин длинного плеча У-хромосомы.

2.Изучение ядер интерфазных клеток:определение Х-полового хроматина и У-хроматина(F-тельца)в клетках слизистой оболочки рта,влагалища,волосяной луковицы,в ядрах сегментоядерных лейкоцитов,в сперме.Для экспресс-диагностики Х-полового хроматина исп-ют краситель орсеин,У-полового хроматина Q-окраску.

Для диагностики наслед.болезней плода проводят амниоцентез(на 14-16 неделе берем-ти).В околоплодных водах клетки плода исп-ют для кариотипирования,определения Х- и У-полового хроматина,околоплодная жидкость исп-ся для биохим.анализа.