5.2.3 Обсуждение результатов исследования маркеров гена Lr24

Оценка эффективности изучаемых маркеров на контрольных Lr-линиях показала их различие в идентификации данного гена. Маркеры J09 и SC-H5 у использованных контролей выявляли ген Lr24 только у линии с этим геном. Таким образом, полученные нами результаты не согласуются с результатами Chelkowski и соавторов [76], у которых в аналогичном эксперименте при использования маркера J09 был выявлен характерный компонент дополнительно на линии с геном Lr25, а при использовании маркера гена SC-H5 дополнительно еще на 30 линиях.

При использовании маркеров Sr24≠12 и Sr24≠50 характерный фрагмент амплификации достоверно определен на линии с геном Lr24, Наличие фрагментов на образцах-носителях генов Lr42 и Lr43 при тестировании контрольных линий также, по сути, не является противоречием, поскольку данные линии в своей родословной имеют сорта-носители гена Lr24. Линия KS91WGRC11 донор гена Lr42 имеет в родословной сорт Centuru, а линия KS91WGRC16 донор гена Lr43 сорт ТАМ200. Вероятно, образцы, ДНК-пробы которых несли положительный фрагмент, не являются чистыми линиями. Полученный фрагмент у линии Lr41 при использовании других репродукций контроля этого гена не подтвердил наличие Lr24 у этого образца.

Проверка эффективности микросателлитного маркера barc71 показала его низкую эффективность для практического использования, и не позволила получить полноценные результаты с ним.

При дополнительной проверке достоверности всех маркеров с включением в набор 15 сортов, 11 из которых по литературным данным несли этот ген, также выявлена их различная эффективность.

При использовании маркера Sr24≠12 характерный фрагмент амплификации размером 500 п.о. был выявлен у 6 образцов (Agent, Collin, Siouxland, Arapahoe, Osage, TcLr24).

При использовании маркера Sr24≠50 характерный фрагмент амплификации размером 200 п.о. был выявлен у 8 образцов (Agent, Arapahoe, Collin, Siouxland, TAM 106, Arapahoe, Osage, TcLr24).

При использовании маркера SC-H5 характерный фрагмент амплификации размером 700 п.о. был выявлен у 5 образцов (Agent, Arapahoe, Collin, Siouxland, Arapahoe).

При использовании маркера J09 характерный фрагмент амплификации размером 310 п.о. был выявлен у 6 образцов (Agent, Arapahoe, Collin, Siouxland, Arapahoe, Osage).

Проверка наличия гена Lr24 у сортов мягкой пшеницы показала, что при использовании маркеров Sr24≠12 и Sr24≠50 наличие данного гена подтверждено для большего числа сортов, чем при использовании маркеров J09 и SC-H5, что указывает на их большую эффективность для массового использования. Кроме этого, данные маркеры являются универсальными для идентификации транслокаций обоих типов, по сравнению с маркерами J09 и SC-H5.

5.3 Изучение маркеров гена Lr34

5.3.1 Оценка специфичности трех днк-маркеров гена Lr34

В наших экспериментах при использовании микросателлитного маркера Xgwm130 гена Lr34 не выявлено контрастных различий между пробами TcLr34 и другими идентифицируемыми, как и при использовании второго микросателлитного маркера Xbarc352 (Рисунок 16, 17).

Рисунок 16 — Использование микросателлитного маркера Xgwm130 для идентификации гена Lr34

Рисунок 17 — Использование микросателлитного маркера Xbarc352 для идентификации гена Lr34

В настоящее время наибольшее распространение для идентификации гена Lr34 получил STS – маркер csLV34. При его использовании в ПЦР с ДНК-пробами Lr-линий аналогичный фрагмент амплификации был выявлен у линии с геном Lr34, а также у сортов Pavon 76 (Lr46), CSP 44 (Lr48) и VL 404 (Lr49) (Рисунок 18).

Рисунок 18— Использование STS - маркера csLV34 для идентификации гена Lr34