
- •Реферат
- •Содержание
- •Введение
- •1 Аналитический обзор
- •Транстиретин
- •1.1.1 Строение и функции ттr
- •1.1.2 Роль мутаций гена ттr в образовании амилоидов
- •1.2 Амилоидоз
- •1.2.1 Представления об амилоидозах
- •1.2.2 Структура амилоида и фибрилл
- •1.2.3 Механизм образования амилоидных фибрилл
- •Общие сведения о кардиомиопатии
- •Методы выявления мутаций
- •Патентный поиск
- •Цель и задачи работы
- •Экспериментальная часть
- •Материалы исследования
- •4.1.1 Реактивы
- •4.1.2 Лабораторное оборудование
- •4.2 Методы исследования
- •4.2.1 Стандартные растворы
- •4.2.2 Выделение днк из замороженной крови
- •4.2.3 Электрофоретическое разделение днк в агарозном геле
- •4.2.4 Выделение и очистка амплификатов из агарозного геля
- •4.2.5 Полимеразная цепная реакция
- •4.2.6 Электрофоретическое разделение продуктов амплификации в 8% полиакриламидном геле (пааг)
- •4.2.7 Окрашивание гелей
- •4.2.7.1 Окрашивание бромистым этидием
- •4.2.7.2 Окрашивание пааг нитратом серебра
- •4.2.8 Анализ конформационного полиморфизма одноцепочечной днк (sscp)
- •4.2.9 Анализ полиморфизма длин рестрикционных фрагментов
- •Результаты и обсуждение
- •5.1 Результаты
- •4 Экзона гена ttr в 9% пааг
- •2 Экзона гена ttr в 12% пааг
- •5.2 Обсуждение полученных результатов
- •Список использованных источников
- •Приложение а Охрана труда и окружающей среды
- •1 Опасные и вредные производственные факторы
- •1.1 Химические вредные и опасные факторы
- •1.2 Психофизиологические вредные и опасные факторы
- •2 Категория помещения по взрывопожароопасности
- •3 Вентиляционная установка
- •4 Освещение помещения
- •5 Аптечка и ее содержимое
- •6 Меры первой помощи
- •7 Охрана окружающей среды
- •Приложение б Оценка технико-экономических результатов исследования
- •1 Краткое резюме
- •2 Расчет затрат на проведение исследовательской работы
- •2.1 Затраты на сырье, материалы и реактивы
- •2.2 Энергетические затраты
- •2.3 Затраты на заработную плату
- •2.4 Амортизационные отчисления
- •2.5 Смета затрат на проведение научно-исследовательской работы
- •7 Расчет уровня рентабельности и цены нир
Патентный поиск
По теме дипломной работы был проведен патентный поиск в российской, американской и международной европейской патентных базах данных глубиной 10 лет. Ключевые слова поиска: транстиретин, амилоидоз.
Источники информации: американская патентная база данных http://www.uspto.gov/, международная европейская патентная база данных http://www.ep.espacenet.com/, российская патентная база данных http://ru-patent.info.
Результаты патентного поиска представлены в таблице 3.
Таблица 3 – Результаты патентного поиска
Год |
Страна |
Индекс МПК |
№ заявки (а.с. патента) |
Патенто-владелец |
Название изобретения |
Дата публикации |
2005 |
CША |
A61K31/423; C07D263/57 |
11/134.628 |
Richard Labaudiniere |
Compounds, compositions and methods for stabilizing transthyretin and inhibiting transthyretin misfolding |
20.12.2005 |
2006 |
CША |
A61K38/00 |
11/471.657 |
Ehud Gazit, Ramat-HaSharon |
Peptides directed for diagnosis and treatment of amyloid-associated disease |
19.10.2006 |
Продолжение таблицы 3
Год |
Страна |
Индекс МПК |
№ заявки (а.с. патента) |
Патенто-владелец |
Название изобретения |
Дата публикации |
2007 |
CША |
C07C243/22; C07C229/00; C07C251/32
|
11/350.664 |
Kelly Jeffery W; Johnson Steven M; Petrassi H. Michael |
Inhibitors of transthyretin amyloid fibril formation |
25.12.2007 |
2008 |
CША |
A61K 36/00 |
12/51,716 |
Gerardo M. Castillo, Alan D. Snow |
Composition and methods for treating alzheimer's disease and other amyloidoses |
28.08.2008 |
Цель и задачи работы
Целью дипломной работы является выявление и характеристика мутации в гене транстиретина у больных с кардиомиопатиями жителей Санкт-Петербурга.
Для достижения поставленной цели было необходимо выполнить следующие задачи:
Провести выделение ДНК из лейкоцитов замороженной периферической крови больных с кардиомиопатиями, используя метод Кюнкеля.
С помощью полимеразной цепной реакции (с уже подобранными парами праймеров) получить специфические ПЦР-продукты каждого из четырех экзонов гена транстиретина у каждого больного.
Провести SSCP-анализ экзонов гена транстиретина у каждого больного.
Методом ПДРФ и автоматического секвенирования провести полную идентификацию (установление полной нуклеотидной последовательности) выявленных изменений и характеризовать мутации в случае положительных результатов.
Экспериментальная часть
Материалы исследования