- •Реферат
- •Содержание
- •Введение
- •1 Аналитический обзор
- •Транстиретин
- •1.1.1 Строение и функции ттr
- •1.1.2 Роль мутаций гена ттr в образовании амилоидов
- •1.2 Амилоидоз
- •1.2.1 Представления об амилоидозах
- •1.2.2 Структура амилоида и фибрилл
- •1.2.3 Механизм образования амилоидных фибрилл
- •Общие сведения о кардиомиопатии
- •Методы выявления мутаций
- •Патентный поиск
- •Цель и задачи работы
- •Экспериментальная часть
- •Материалы исследования
- •4.1.1 Реактивы
- •4.1.2 Лабораторное оборудование
- •4.2 Методы исследования
- •4.2.1 Стандартные растворы
- •4.2.2 Выделение днк из замороженной крови
- •4.2.3 Электрофоретическое разделение днк в агарозном геле
- •4.2.4 Выделение и очистка амплификатов из агарозного геля
- •4.2.5 Полимеразная цепная реакция
- •4.2.6 Электрофоретическое разделение продуктов амплификации в 8% полиакриламидном геле (пааг)
- •4.2.7 Окрашивание гелей
- •4.2.7.1 Окрашивание бромистым этидием
- •4.2.7.2 Окрашивание пааг нитратом серебра
- •4.2.8 Анализ конформационного полиморфизма одноцепочечной днк (sscp)
- •4.2.9 Анализ полиморфизма длин рестрикционных фрагментов
- •Результаты и обсуждение
- •5.1 Результаты
- •4 Экзона гена ttr в 9% пааг
- •2 Экзона гена ttr в 12% пааг
- •5.2 Обсуждение полученных результатов
- •Список использованных источников
- •Приложение а Охрана труда и окружающей среды
- •1 Опасные и вредные производственные факторы
- •1.1 Химические вредные и опасные факторы
- •1.2 Психофизиологические вредные и опасные факторы
- •2 Категория помещения по взрывопожароопасности
- •3 Вентиляционная установка
- •4 Освещение помещения
- •5 Аптечка и ее содержимое
- •6 Меры первой помощи
- •7 Охрана окружающей среды
- •Приложение б Оценка технико-экономических результатов исследования
- •1 Краткое резюме
- •2 Расчет затрат на проведение исследовательской работы
- •2.1 Затраты на сырье, материалы и реактивы
- •2.2 Энергетические затраты
- •2.3 Затраты на заработную плату
- •2.4 Амортизационные отчисления
- •2.5 Смета затрат на проведение научно-исследовательской работы
- •7 Расчет уровня рентабельности и цены нир
1.2 Амилоидоз
1.2.1 Представления об амилоидозах
Амилоидозы – группа заболеваний, причиной которых является неправильное отложение белка в виде нерастворимых фибрилл в различных органах и тканях [24]. Амилоидный белок может накапливаться в определенной области и быть безвредным или воздействовать только на одну ткань. Такую форму амилоидоза называют локализованным амилоидозом. Амилоидоз, который затрагивает ткани по всему организму, известен как системный амилоидоз. Эта форма может вызывать серьезные заболевания фактически любого органа [25].
Амилоидозы принято относить к группе конформационных заболеваний, т.е. таких, при которых происходит изменение третичной (пространственной) структуры соответствующего белка. Этот термин был введен в 1997 году [26]. Это понятие стоит использовать только в случае, когда именно стабильные изменения пространственной организации белковой молекулы являются причиной развития болезни.
Современная классификация амилоидозов отражает разнообразие локализации, особенности клинического проявления и патогенеза, а также имеющиеся представления о биохимической природе амилоидных субъединиц, составляющих тот или иной тип амилоидных отложений. Основой классификации служат те белки, которые формируют амилоид. К настоящему времени их около 30 [27]. В это число входят только те белки, которые обнаружены в составе амилоида. В таблице 2 представлены основные амилоидные болезни и вызывающие их белки.
С клинической точки зрения следует разделять амилоидозы на первичные (часто наследственные) и вторичные (осложнения), развитие которых происходит на фоне основного заболевания. Необходимо выделять формы амилоидоза в зависимости от характера поражения (системные и локализованные, о них говорилось выше) и превалирования определенной систематики (с преимущественным поражением нервной ткани, тканей сердца и других органов).
Таблица 2 – Амилоидные болезни и белки-предшественники амилоидов
№ |
Обозначение амилоидоза |
Белок-предшественник фибриллогенного производного |
Название болезни и локализация поражения |
Этиология |
1 |
A |
Белок-предшественник пептидов болезни Альцгеймера |
Классическая болезнь Альцгеймера, ЦНС |
Наследственные и старческие формы |
2 |
A2M |
2-микроглобулин |
Гемодиализный амилоидоз, соединительная ткань |
Хроническая почечная недостаточность- гемодиализ |
3 |
AA |
Сывороточный амилоидных белок |
Вторичный классический системный амилоидоз |
Хронические инфекции |
4 |
AANF |
Предсердный натриуретический фактор |
Локализованный амилоидоз предсердий |
|
5 |
AApolA1 |
Аполипопротеин A1 |
Системный или локализованный амилоидоз |
Наследственные формы |
6 |
AApolA2 |
Аполипопротеин A2 |
Системный амилоидоз |
Наследственные формы |
7 |
AApolA4 |
Аполипопротеин A4 |
Системный амилоидоз |
Спорадический связанный со старением |
8 |
ABri |
ABriPP |
Системный амилоидоз, семейная деменция |
Наследственные формы |
9 |
ACal |
Прокальцитонин |
Локализованный амилоидоз при C-клеточных опухолях щитовидной железы |
|
10 |
ACys |
Цистатин C |
Системный амилоидоз |
Наследственные формы |
11 |
ADan |
ADanPP |
Семейная деменция |
Наследственные формы |
12 |
AFib |
-цепь фибриногена |
Системный амилоидоз |
Наследственные формы |
13 |
AGel |
гельсолин |
Системный амилоидоз |
Наследственные формы |
Продолжение таблицы 2
№ |
Обозначение амилоидоза |
Белок-предшественник фибриллогенного производного |
Название болезни и локализация поражения |
Этиология |
14 |
AH |
Тяжелые цепи иммуноглобулинов |
Локализованный или системный первичный или связанный с миеломой амилоидоз |
Физиологический мутагенез – образование специфических молекул иммуноглобулинов |
15 |
AIAPP |
Островковый амилоидный полипептид - амилин |
Локализованный амилоидоз островков Лангерганса |
Инсулиномы, диабет типа 2 |
16 |
AIns |
Инсулин |
Локализованный амилоидоз |
Ятрогенный |
17 |
AKer |
Керато-эпителин |
Семейное поражение роговицы |
Наследственные формы |
18 |
AL |
Легкие цепи иммуноглобулинов |
Локализованный или системный первичный или связанный с миеломой амилоидоз |
Физиологический мутагенез – образование специфических молекул иммуноглобулинов |
19 |
ALac |
Лактоферрин |
Локализованное поражение роговицы |
|
20 |
ALys |
Лизоцим |
Системный амилоидоз |
Наследственные формы |
21 |
AMed |
Медин – производное лактадгерина |
Локализованный амилоидоз аорты |
Старческий бессимптомный амилоидоз |
22 |
AOAAP |
Одонтогенный амелобласт-ассоциированный белок |
Локализованный амилоидоз |
Одонтогенные опухоли |
23 |
APro |
Пролактин |
Локализованный амилоидоз |
Пролактиномы |
24 |
APrP |
Белок-предшественник приона |
Прионовые болезни, спонгиозная энцефалопатия |
Заражение, спонтанные и наследственные формы |
25 |
ASem1 |
Семеногелин 1 |
Локализованный амилоидоз семенных пузырьков |
|
Окончание таблицы 2
№ |
Обозначение амилоидоза |
Белок-предшественник фибриллогенного производного |
Название болезни и локализация поражения |
Этиология |
26 |
ATau |
Белок Tau |
Локализованный амилоидоз, болезнь Альцгеймера, другие формы поражения ЦНС |
|
27 |
ATTR |
Транстиретин |
Системный или редко локализованный амилоидоз периферической нервной ткани, сердца и других органов |
Спорадические и наследственные формы |
Место накопления амилоидных фибрилл может зависеть от ряда факторов, способствующих формированию фибрилл. К ним относятся высокая концентрация амилоидогенного белка в месте локализации, низкие значения рН, наличие префибриллярных структур. Также может играть важную роль специфическое взаимодействие глюкозаминов или рецепторов поверхности клетки с тканью [28]. Для вторичных амилоидозов наличие таких факторов устанавливается достаточно легко, а вот для первичных амилоидозов они не известны.