
- •Реферат
- •Содержание
- •Введение
- •1 Аналитический обзор
- •Транстиретин
- •1.1.1 Строение и функции ттr
- •1.1.2 Роль мутаций гена ттr в образовании амилоидов
- •1.2 Амилоидоз
- •1.2.1 Представления об амилоидозах
- •1.2.2 Структура амилоида и фибрилл
- •1.2.3 Механизм образования амилоидных фибрилл
- •Общие сведения о кардиомиопатии
- •Методы выявления мутаций
- •Патентный поиск
- •Цель и задачи работы
- •Экспериментальная часть
- •Материалы исследования
- •4.1.1 Реактивы
- •4.1.2 Лабораторное оборудование
- •4.2 Методы исследования
- •4.2.1 Стандартные растворы
- •4.2.2 Выделение днк из замороженной крови
- •4.2.3 Электрофоретическое разделение днк в агарозном геле
- •4.2.4 Выделение и очистка амплификатов из агарозного геля
- •4.2.5 Полимеразная цепная реакция
- •4.2.6 Электрофоретическое разделение продуктов амплификации в 8% полиакриламидном геле (пааг)
- •4.2.7 Окрашивание гелей
- •4.2.7.1 Окрашивание бромистым этидием
- •4.2.7.2 Окрашивание пааг нитратом серебра
- •4.2.8 Анализ конформационного полиморфизма одноцепочечной днк (sscp)
- •4.2.9 Анализ полиморфизма длин рестрикционных фрагментов
- •Результаты и обсуждение
- •5.1 Результаты
- •4 Экзона гена ttr в 9% пааг
- •2 Экзона гена ttr в 12% пааг
- •5.2 Обсуждение полученных результатов
- •Список использованных источников
- •Приложение а Охрана труда и окружающей среды
- •1 Опасные и вредные производственные факторы
- •1.1 Химические вредные и опасные факторы
- •1.2 Психофизиологические вредные и опасные факторы
- •2 Категория помещения по взрывопожароопасности
- •3 Вентиляционная установка
- •4 Освещение помещения
- •5 Аптечка и ее содержимое
- •6 Меры первой помощи
- •7 Охрана окружающей среды
- •Приложение б Оценка технико-экономических результатов исследования
- •1 Краткое резюме
- •2 Расчет затрат на проведение исследовательской работы
- •2.1 Затраты на сырье, материалы и реактивы
- •2.2 Энергетические затраты
- •2.3 Затраты на заработную плату
- •2.4 Амортизационные отчисления
- •2.5 Смета затрат на проведение научно-исследовательской работы
- •7 Расчет уровня рентабельности и цены нир
7 Охрана окружающей среды
При проведении данной исследовательской работы образовались следующие отходы:
- гели после электрофореза;
- отработанный электродный буфер;
- органические отходы (фенол, хлороформ, проявитель для геля при окраске серебром);
- полипропиленовые пробирки, наконечники от микропипеток, латексные перчатки.
Состав электродного буфера указан в экспериментальной части работы. Этот отход содержал химические вещества в количествах допустимых для слива в канализацию [69]. Органические вещества после использования сливались в отдельную ёмкость и сдавались на утилизацию.
Проявитель содержал вещества, в количествах, допустимых для слива в канализацию.
Гель после электрофореза содержал бромистый этидий, поэтому после обработки сдавался на утилизацию. Характеристика производственных отходов приведена в таблице А3.
Таблица А3 – Характеристика производственных отходов
Наименование отхода |
Агрегатное состояние |
Коли-чество |
Наименование вредных примесей |
Примечание (куда направляется отход) |
Вентиляционные выбросы |
Г |
10 л |
Пары этанола, фенола, хлороформа |
В атмосферу |
Отработанный буфер |
Ж |
10 л |
0,5хTBE |
В канализацию |
Гель после электрофореза |
ТВ |
5000 г |
ПААГ, бромистый этидий |
На утилизацию |
Проявитель для геля при окраске серебром |
Ж |
1 л |
Формальдегид, уксусная кислота, натрий двууглекислый |
В слив |
Органический слив |
Ж |
0,5 л |
Фенол, хлороформ |
На утилизацию |
Отработанный вспомогательный материал (перчатки,наконеч-ники, пробирки) |
ТВ |
1000 г |
Полипропилен |
В сборник твёрдых отходов отдела утилизации |
Приложение б Оценка технико-экономических результатов исследования
1 Краткое резюме
Данная дипломная работа проводилась в Отделе молекулярной генетики НИИЭМ СЗО РАМН. Целью работы было нахождение мутаций в гене транстиретина (TTR) человека у больных с кардиомипатиями.
Транстиретин является одним из белков, приводящих к образованию фибрилл при определенных условиях. Это все связанно с изменением конформации амилоидных белков. Амилоидозы являются широко распространенной группой заболеваний. К ним относятся болезнь Альцгеймера, болезнь Паркинсона, кардиомиопатии. В настоящее время эффективных способов лечения амилоидозов не существует, в этом и заключается актуальность проблемы.
Уже найдено около 100 мутаций этого гена в различных странах.
Исследуя спектр мутаций гена TTR, можно разработать методы быстрого выявления наиболее распространенных в данном регионе мутаций. Подобные исследования проходили в Португалии, Японии, Швеции и других странах, однако, в России такие исследования практически не проводились.
Так как в ходе научно-исследовательской работы не производится никакого продукта, то экономический эффект на данный момент невозможно определить. Но если продолжать двигаться в этом направлении, не исключена возможность разработки тест-систем для определения типа мутации и вида амилоидоза. В рамках дипломной работы мы ограничились только исследовательской частью.