Задача «Основы биохимии и методами клинико-биохимических исследований»

У женщины К. с желтухой при исследовании печени методом УЗИ в главном желчном ходе обнаружен камень. Биохимические показатели в сыворотке:

Общий белок 79г/л ЩФ - 522 МЕ/л Альбумин 45г/л ГГТ - 240 МЕ/л

Общий билирубин – 340мкмоль/л АсАТ - 40 МЕ/л Конъюгированный билирубин- 280 мкмоль/л АлАТ - 38 МЕ/л

Неконъюгированный билирубин- 60 мкмоль/л

Задания:

1. Назовите причины повышенного билирубина в крови и появление желтухи.

2. Оцените результаты лабораторных данных, применяя терминологию.

3. Скажите, повышение активности, каких ферментов указывает на холестаз.

4. Поясните, соответствуют ли результаты лабораторных исследований диагнозу больной К.

Эталон ответа:

1 Общий билирубин повышается при обтурационной желтухе из-за нарушения оттока конъюгированного билирубина в кишечник; при гемолитической желтухе из-за усиленного распада эритроцитов и увелечения конъюгированной фракции; в результате нарушения экскреции в желчные капилляры за счёт конъюгированного билирубина и снижения способности гепатоцитов к образованию глюкуронидов при паренхиматозной желтухе за счёт неконъюгированного.

2. Общий белок – нормопротеинемия, альбумин - нормоальбуминеинемия;

ЩФ, ГГТ – гиперфертемия;

АсАТ, АлАТ – нормоферментемия;

Билирубин – гиперферментемия.

3. На холестаз указывает повышение активности щелочной фосфатазы и гамма-глутамилтрансферазы.

4. Соответствуют, так как при холестазе повышается активность ЩФ, ГГТ, общего билирубина за счёт конъюгированного.

Задача

«Методы клинических исследований»

В лаборатории была исследована моча, случайно несколько часов простоявшая возле батареи центрального отопления. При исследовании отмечена выраженная мутность, резкий аммиачный запах. При микроскопии осадка много живых подвижных бактерий, дрожжеподобные грибы.

Задания:

1. Дайте оценку результату анализа.

2. Предположите, чем могли быть вызваны подобные патологические изменения в моче.

3. Назовите правила хранения пробы мочи, если нет возможности исследовать ее сразу.

4. Назовите, как обозначают в бланке исследования прозрачность мочи?

Эталон ответа к задаче:

1. Данный результат не подлежит оценке, так как моча долго простояла в тепле. За это время в ней могли размножиться бактерии и грибы, вызвавшие аммиачное брожение. Необходимо повторить анализ свежесобранной мочи,

2. Мутность мочи обусловлена большим количеством бактерий и дрожжеподобных грибов. Аммиачный запах вызван аммиачным брожением.

3. Если нет возможности исследовать мочу сразу, ее необходимо хранить в холодильнике с добавлением консервантов.

4. Прозрачность мочи в бланке обозначают как: прозрачность полная, неполная, мутноватая и мутная.

Задача

«Микробиология с основами эпидемиологии и методами исследования»

В санитарно-бактериологическую лабораторию доставлены пробы смывов с рук медицинского персонала хирургического отделения больницы для проведения санитарно-бактериологического контроля.

Задания:

1. Перечислите правила взятия смывов с рук на санбакконтроль.

2. Расскажите, с какой целью проводится санбакконтроль ЛПУ.

3. Объясните, какие питательные среды используются для данного исследования.

4. Объясните, почему кишечной палочка является санитарно-показательным микроорганизмом.

Эталон ответа к задаче:

1. При взятии смыва с рук тщательно протирают стерильными ватным тампоном или салфеткой (5х5 см) тыл кисти, ладонную поверхность, межпальцевые промежутки, ногтевые ложи, подногтевые пространства сначала с левой, а затем с правой руки.

2. Целью данного исследования является контроль за соблюдением санитарно-гигиенического режима в ЛПУ. В последние десятилетия наблюдается рост внутрибольничных инфекций (ВБИ), вызываемых патогенными возбудителями (стафилококк, шигеллы, сальмонеллы), а также условно-патогенными микроорганизмами (протей, синегнойная палочка, дрожжеподобные грибы). Основным источником инфекции в ЛПУ является больной и медицинский персонал.

3. Проводится посев смыва в среду Кесслера, подращивание в течение суток при температуре 37⁰С. При наличии брожения в среде Кесслера делается высев на среду Эндо, ЖСА и кровяной агар. Выросшая культура микроорганизма подвергается дальнейшей идентификации.

4. Кишечная палочка является санитарно-показательным микроорганизмом по следующим причинам:

а) является представителем нормальной микрофлоры;

б) нетребовательна к питательным средам;

в) не имеет другого природного резервуара, кроме организма человека;

г) после выделения в окружающую среду сохраняет жизнеспособность в течение сроков, близких к срокам выживания микробов.

д) не размножается в окружающей среде и не изменяет свои биологические свойства.

Эталон ответов к билету № 32

Задача

«Основы биохимии с методами клинико-биохимических исследований»

Больному Ф. с подозрением на опухоль простаты исследовали активность кислой фосфатазы (КФ) и её простатического изофермента. Результаты исследования следующие: общая активность КФ - 368 нмоль/(с •л), тартратстабильная фракция КФ – 147 нмоль/(с•л)

Задания:

1. Дайте характеристику ферменту КФ.

2. Объясните, на чём основано определение простатического изофермента КФ.

3. Рассчитайте активность простатического изофермента.

4. Оцените результаты исследований, применяя терминологию

Эталон ответа:

1. КФ – фермент лизосом. Кислая фосфатаза – это гидролаза, которая отщепляет остаток фосфорной кислоты от органических эфиров. КФ имеет несколько изоферментов, которые различаются по месту локализации, оптимуму рН, по отношению к ингибиторам и активаторам. Наиболее богатым источником КФ является предстательная железа, активность КФ в ней превышает в 1000 раз активность КФ в костной ткани, печени, селезёнке, почках. КФ также содержится в эритроцитах и тромбоцитах.

2. Простатический изофермент в противоположность остальным кислым фосфатазам ингибируется тартратом. На этом основано определение простатического изофермента.

3. Тартратлабильная фракция (простатическая КФ) = Ощая КФ – тартратстабильная КФ = 368 – 147 = 221 нмоль/(с•л).

4. Гиперферментемия за счёт тартратлабильной КФ (простатического изофермента), так как норма обшей КФ 67 – 167 нмоль/(с•л), а тартратлабильной КФ 0 – 16,7 нмоль/(с•л).

Задача

«Методы клинических исследований»

При микроскопическом исследовании препарата из волос обнаружено: пораженные волосы окутаны чехликом из мелких спор диаметром 1-3 мкм, расположенных мозаично, кучками, тесно прилегающих друг к другу. При надавливании на покровное стекло чехол разрушается и внутри волоса можно видеть септированные нити мицелия и кучки мелких спор.

Задания:

1. Назовите, какое заболевание волос дает подобную микроскопическую картину?

2. Расскажите технику приготовления препарата из волос.

3. Назовите способы выявления очагов пораженных волос при микроскопии.

4. Расскажите, как уничтожается материал из волос, кожи, ногтей после исследования.

Эталон ответа к задаче:

1. Подобную микроскопическую картину дает микроспория.

2. Волосы помещают на предметное стекло, измельчают скальпелем, наносят 1-2 капли едкой щелочи (20-30% КОН) и подогревают над пламенем горелки (не доводя до кипения). Препарат покрывают покровным стеклом, оставляют на 5 мин и микроскопируют.

3. При подозрении на микроспорию используют ультрафиолетовую лампу Вуда, в лучах которой волосы, пораженные микроспорумом, отдают зеленоватым свечением. Благодаря такой флюоресценции удается быстро обнаружить даже единичные пораженные волосы.

4. После исследования материал из кожи, ногтей и волос, а также бумага, в которую был упакован материал, сжигают.

Задача

«Микробиология с основами эпидемиологии и методами исследования»

В санитарно-бактериологическую лабораторию из хирургического отделения доставлен перевязочный материал (марля, салфетки, тампоны, ватные шарики, бинты) с целью санитарно-бактериологического контроля.

Задания:

1. Перечислите правила сбора образцов перевязочного материала для санбакконтроля.

2. Перечислите правила доставки перевязочного материала в лабораторию.

3. Объясните, каковы способы проведения посевов перевязочного материала Вы знаете.

4. Поясните, какие питательные среды используются для исследования образцов перевязочного материала.

Эталон ответа задачи:

1. В хирургическом отделении перевязочный материал выборочно отбирается стерильным корцангом и помещается в стерильный бикс.

2. Стерильные биксы доставляются в лабораторию в стерильных мешках.

3. В лаборатории бинты, ватные шарики, тампоны достают из разных мест бикса стерильным пинцетом и у пламени горелки опускают в пробирки или колбы с питательными средами (каждый образец засевают в 2 пробирки каждой среды). Если материал большой, то стерильными ножницами отрезают небольшой кусочек. Засеянный материал должен быть помещён в среду целиком. Для выделения споровых бактерий по одной пробирке в течение 20 минут прогревают в водяной бане при 80⁰С.

4. Для исследования образцов перевязочного материала используется сахарный бульон и среда Китт-Тароцци. Инкубирование при 37⁰C в течение 2-7 суток.

Эталон ответов к билету № 33

Задача

«Основы биохимии с методами клинико-биохимических исследований»

В инструкции к набору реактивов для определения лактатдегидрогеназы (ЛДГ) кинетическим методом указано, что калибровочный коэффициент для длины волны 340 нм равен 16030. При фотометрировании получены показатели экстинкции:

Е начальная - 0,278

Е на 1-й минуте - 0,253

Е на 2-й минуте - 0,228

Е на 3-й минуте - 0,203

Задания:

1. Расскажите принцип метода определения ЛДГ кинетически.

2. Объясните, какой тест положен в основу определения многих ферментов кинетическим методом.

3. Рассчитайте активность ЛДГ.

4. Оцените результат исследования, применяя терминологию.

Эталон ответа:

1.∆Е/мин = │(Енач - Е1) + (Е1 – Е2) + (Е2 – Е3)│: 3 = 0,025

∆Е/мин х16030 = 0,025х16030 = 400,75 U/л

2.Нормоферментемия, так как норма ЛДГ в сыворотке при 37ºC равна

225 - 450 U/л.

3.В основу кинетического метода определения активности ферментов положен тест Варбурга, который основан на том, что при длине волны 340 нм окисленная форма НАД имеет максимум поглощения, в то время как восстановленная форма НАДН не поглощает при этой длине волны. НАД является коферментом многих ферментов, что позволяет его использовать для определения ферментов.

4. Пируват превращается в лактат при каталитическом действии лактатдегидрогеназы. Скорость окисления НАДН в НАД пропорциональна активности ЛДГ.

Задача

«Методы клинических исследований»

В микологической лаборатории при микроскопическом исследовании препарата из волос обнаружено: контур волоса четкий, внутри волоса редкие септированные нити мицелия, тонкие и толстые. Споры полиморфные – круглые, прямоугольные, крупные и мелкие, расположены в виде скоплений и цепочками. Местами – пузырьки воздуха и капли жира.

Задания:

1. Предположите заболевание волос с подобной микроскопической картиной.

2. Назовите возбудителя данного заболевания.

3. Приведите классификацию микозов.

4. Назовите этапы лабораторной диагностики микозов.

Эталон ответа задачи:

1. Подобную микроскопическую картину волоса дает заболевание – парша (фавус).

2. Возбудителем парши является Трихофитон Шенлейна.

3. Классификация микозов:

а) кератомикозы;

б) дерматомикозы;

в) кандидамикозы;

г) глубокие микозы.

4. Этапы лабораторной диагностики микозов:

а) обнаружение возбудителя (микроскопия патологического материала);

б) выделение возбудителя (посевы на питательную среду);

в) идентификация возбудителя по выросшим колониям;

г) изучение ответной реакции макроорганизма по серологическим, иммунологи­ческим, реакциям, а также гистологические исследования и экспериментальное заражение животных.

Задача

«Микробиология с основами эпидемиологии и методами исследования»

В санитарно-бактериологическую лабораторию из хирургического отделения больницы поступил шовный материал (кетгут, шёлк) с целью санитарно-бактериологического контроля.

Задания:

1. Расскажите, каковы правила взятия шовного материала на исследования.

2. Перечислите правила доставки шовного материала в баклабораторию.

3. Поясните, какие питательные среды, используются для санбакконтроля шовного материала и каковы сроки культивирования на этих питательных средах.

4. Дайте ответ, как правильно провести посев шовного материала на питательные среды.

Эталон ответа к задаче:

1. Шовный материал (кетгут, шёлк) отбирают в количестве 1-2 мотка из каждой банки стерильным корнцангом и помещают в сухую стерильную пробирку, обжигая края в пламени горелки.

2. Пробирки и колбы снабжают этикетками, заворачивают в стерильную марлю, упаковывают в чистую бумагу и пересылают в лабораторию. Кетгут хранится в спиртовом растворе йода.

3. Перед исследованием кетгут извлекают из спиртового раствора йода, помещают на 24ч. В 10% раствор гипосульфита для нейтрализации йода и затем на 24ч. В стерильную дистиллированную воду. Шелк сохраняют в спирте, а перед посевом выдерживают 24 час в стерильной дистиллированной воде. Подготовленный таким образом шовный материал стерильным пинцетом извлекают из дистиллированной воды, кладут в чашку Петри, разрезают стерильными ножницами на куски в 1-2 см и помещают в 4 пробирки со средами по 4-5 кусочков. Ставят в термостат на 12-14 суток.

4. Для санитарно-бактериологического контроля используют среды – сахарный бульон – для определения кокковой флоры; среду Китт-Тароцци – для определения анаэробов и среду Сабуро – для определения дрожжеподобных грибов. Посевы с сахарным бульоном выдерживают в термостате 7 суток, со средой Китт-Тароцци – 10-12 суток. При наличии роста в пробирках материал считается нестерильным. Из пробирок с признаками роста делают мазки и окрашивают по Грамму. Дальнейший ход исследования проводится микробиологическим методом исследования.

Эталон ответов к билету № 34

Задача

«Основы биохимии и методами клинико-биохимических исследований»

В лабораторию была доставлена моча новорождённого с предположительным диагнозом фенилкетонурия. Методом распределительной радиальной хроматографии на бумаге в моче была выявлена аминокислота, наличие которой подтверждает предполагаемый диагноз.

Задания:

1. Назовите аминокислоту, которая появляется в моче при фенилкетонурии.

2. Объясните принцип распределительной радиальной хроматографии на бумаге.

3. Расскажите, как проводилась идентификация аминокислоты методом хроматографии.

4. Поясните, что такое коэффициент распределения.

Эталон ответа:

1. При фенилкетонурии в моче накапливается аминокислота фенилаланин.

2. При распределительной хроматографии разделение происходит вследствие различной растворимости определяемых веществ в двух несмешивающихся фазах. Для этого необходима система, состоящая из неподвижной фазы (носителя) и подвижной фазы (растворителя). На неподвижную фазу наносится смесь веществ, и через неё пропускается ток растворителя. Чем лучше данное вещество растворимо в подвижной фазе, тем дальше оно продвинется по направлению тока растворителя.

3. В контрольный сектор хроматографической полоски наносят аминокислоту - фенилаланин, а в опытный - мочу больного ребёнка. Проводят хроматографию, Хроматограммы фиксируют, окрашивают, затем рассчитывают коэффициенты распределения аминокислот в контрольном и опытном секторах. Если коэффициенты распределения одинаковые, то в опытном секторе находится та же аминокислота, что и в контрольном.

4. Коэффициент распределения (Rf) – это отношение пути, пройденного аминокислотой к пути, пройденному растворителем. Каждая аминокислота имеет свой коэффициент распределения в данном растворителе