Вопросы для самоподготовки

1. Значение физико-химических методов в фармацевтическом анализе.

2. Принципы классификации физико-химических методов.

3. Требования, предъявляемые к физико-химическим методам с целью применения их в анализе лекарственных форм.

4. Области применения физико-химических методов в фармацевтическом анализе.

5. Основные положения оптических методов: рефрактометрия, поляриметрия.

6. Основные положения методов основанных на поглощении электромагнитного излучения: фотоколориметрия, спектрофотометрия, фототурбидиметрия, фотонефелометрия.

7. Основные положения методов основанных на на испускании излучения: пламенно-эмиссионная спектрофотометрия, флуоресцентный метод, радиохимический метод.

8. Основные положения методов основанных на использовании магнитного поля: спектроскопия ядерного магнитного резонанса (ЯМР), масс-спектрометрия.

9. Основные положения электрохимические методов: потенциометрия, полярография.

10. Основные положения термического методы анализа: дериватография.

11. Основные положения методов разделения (хроматография): ТСХ, ГЖХ, ВЭЖХ, ионообменная хроматография и др.

12. Роль стандартов в физико-химическом анализе лекарственных средств.

Практическая работа

Задание 1. Провести определение подлинности:

Сульфацетамид натрия (сульфацил натрия)

Определение максимума поглощения. 0,1 г препарата помещают в мерную колбу вместимостью 100 мл, растворяют и доводят до метки фосфатным буфером с рН 7,0. 1 мл полученного раствора помещают в мерную колбу вместимостью 100 мл и доводят до метки фосфатным буфером с рН 7,0.

Оптическую плотность измеряют в области между 230 нм и 350 нм, максимум поглощения наблюдается при 255 нм.

Сульфадиметоксин

Снятие УФ-спектра. Около 0,15 г препарата (точная навеска) помещают в мерную колбу вместимостью 200 мл, прибавляют 10 мл 0,1 моль/л раствора натрия гидроксида. Встряхивают до полного растворения навески и доводят объем раствора водой до метки. В мерную колбу вместимостью 250 мл помещают 5 мл полученного раствора и доводят объем раствора водой до метки. По 20 мл полученного раствора помещают в две конические колбы. В первую колбу прибавляют 4 мл 0,5 моль/л раствора натрия гидроксида, во вторую – 0,4 мл концентрированной серной кислоты.

УФ-спектр щелочного раствора препарата, снятый относительно кислого раствора препарата, в области от 240 до 280 нм имеет минимум поглощения при 2602 нм и при 2682 нм.

УФ-спектр кислого раствора препарата, снятый относительно щелочного раствора препарата в области от 285 до 300 нм имеет максимум поглощения при 2882 нм.

Триметоприл

Определение максимума поглощения. Растворяют 0,02 г препарата в 0,1 моль/л раствора натрия гидроксида и доводят тем же растворителем до 100 мл. Разбавляют 1 мл полученного раствора до 10 мл тем же растворителем. Максимум поглощения наблюдается между 230 нм и 350 нм, при 287 нм.

Сульфасалазин

Определение максимума поглощения. Растворяют 0,040 г препарата в 0,1 моль/л раствора натрия гидроксида и разбавляют до 250 мл тем же растворителем. Помещают 5 мл полученного раствора в мерную колбу вместимостью 100 мл содержащего 70 мл воды. Прибавляют 20,0 мл 0,1 моль/л раствора уксусной кислоты и доводят до метки водой. Максимум поглощения между 230 нм и 400 нм, наблюдаются при 238 нм и 359 нм.

Гидрохлортиазид ( гипотиазид, дихлотиазид)

Определение максимума поглощения. Щелочной раствор препарата имеет максимум поглощения при 273 нм и 323 нм.

Глибенкламид

Определение максимума поглощения. В среде метанола и кислоты хлороводородной максимум поглощения наблюдается при 300 нм и 275 нм.

Флуоресценция. Растворяют 0,020 г препарата. Раствор окрашивается и имеет голубую флуоресценцию в УФ-свете (365 нм).

Нитрофурал (Фурацилин)

Определение максимума поглощения. УФ-спектр раствора препарата, приготовленного для количественного определения в области от 245 нм до 450 нм имеет максимумы поглощения при 260 нм ±2 нм и минимум поглощения при 360 нм ±2 нм.

Нитрофурантоин (Фурадонин)

Определение максимума поглощения. УФ-спектр раствора препарата, приготовленного для количественного определения, в области 220 нм и 400 нм имеет два максимума поглощения, при 266 нм и 367 нм.

А при 367 нм

Отношение ------------------- должно быть от 1,36 до 1,42.

А при 266 нм

Рутозид (Рутин)

Определение максимума поглощения. 0,002% раствор препарата в абсолютном спирте при измерении на спектрофотометре в кювете с толщиной слоя 1 см имеет максимумы поглощения при длинах волн 259±1 нм и 362,5±1 нм.

Аценокумарол

Определение максимума поглощения. УФ-спектр 0,001 % раствора в диоксане имеет три максимума поглощения при 271 нм , 283 нм и 306 нм.

Цианокобаламин

Определение максимума поглощения. 0,002 % раствор препарата имеет максимумы поглощения при 278±1 нм; 361±1 нм и 548 ±2 нм.

Клонидин (клофелин)

Снятие ИК-спектра. ИК-спектр клонидина должен соответствовать спектру стандартного образца в виде таблеток с калия бромидом.

Определение максимума поглощения. УФ-спектр 0,03 % раствора препарата в 0,1 моль/л растворе НСl должен иметь два максимума: при 271 нм и при 278 нм.

Метронидазол

Снятие ИК-спектра. ИК-спектр клонидина должен соответствовать спектру стандартного образца в виде таблеток с калия бромидом.

Определение максимума поглощения. УФ-спектр 0,001 % раствора препарата в 0,1 моль/л растворе НСl должен иметь максимум поглощения при 277 нм.

Тинидазол

Снятие ИК-спектра. ИК-спектр тинидазола должен соответствовать спектру стандартного образца в виде таблеток с калия бромидом.

Определение максимума поглощения. УФ-спектр 0,001 % раствора препарата в метаноле имеет один максимум поглощения при 310 нм.

Клотримазол

Снятие ИК-спектра. ИК-спектр клотримазола должен соответствовать спектру стандартного образца в виде таблеток с калия бромидом.

Определение максимума поглощения. УФ-спектр 0,02 % раствора препарата в метаноле имеет один максимум при 259 нм.

Провести определение подлинности.

Пиритинола дигидрохлорид

Снятие ИК-спектра. ИК-спектр препарата должен соответствовать стандарту в калия бромиде.

Определение максимума поглощения. УФ-спектр 0,001 % раствора в растворе 0,02 моль/л растворе НСl имеет максимум поглощения при 297 нм.

Нифедипин

Определение максимума поглощения. УФ-спектр 0,0025 % раствора препарата в метаноле дает максимум при длине волны 235 нм и плечо при 350 и 355 нм.

Соли хинина и хинидина

Флюоресценция сернокислых растворов. К 5мл растворов солей хинина и хинидина (0,1:100) добавляют 2-3 капли разведенной кислоты серной; наблюдается голубая флюоресценция.

Хлорохин (хингимин)

Определение максимума поглощения. 0,001% растворов прeпарата в 0,01 г раствора хлороводородной кислоты имеет в области от 220нм до 350 нм максимумы поглощения около 257, 329 и 343нм.

Тиамина бромид (хлорид), кокарбоксилаза, фосфотиамин

Реакции образования тиохрома. 0,05 г препарата растворяют в 25 мл воды. К 5 мл раствора приливают 1 мл раствора калия гексацианоферрата (III), 1 мл раствора натрия гидроксида 3 5 мл бутилового или изоамилового спирта, хорошо встряхивают и дают отстояться. В верхнем слое наблюдаемая в УФ-свете синяя флуоресценция, исчезающая при подкислении и вновь возникающая при подщелачивании.

Меркаптопурин

Определение максимума поглощения. 0,0005% раствор препарата в 0,1 моль/л растворе хлороводородной кислоты в области от 260 до 350 нм. Имеет один максимум поглощения около 325 нм. Для приготовления 0,0005 % раствора препарата применяют предварительно нагретый 0,1 моль/л раствор хлороводородной кислоты.

Пентоксифиллин

Определение максимума поглощения.0,001 % раствор препарата имеет максимум поглощения при 274 нм.

Кислота фолиевая

Реакция гидролитического окисления. 0,01 г препарата растворяют в 5 мл 0,1 моль/л раствора натрия гидроксида, добавляют 5 мл 0,1 моль/л раствора хлороводородной кислоты и 1 мл раствора калия перманганата. Раствор помещают на 3 минуты в водяную баню с температурой 80-85⁰С. К охлажденному раствору прибавляют по каплям раствор пероксида водорода до обесцвечивания и фильтруют. Фильтрат имеет флуоресценцию в УФ-свете.

Определение максимумов поглощения. 0,001 % раствор препарата в 0,1 моль/л растворе натрия гидроксида имеет максимумы поглощения при 256, 283 и 365 нм.

А при 256 нм

Отношение ----------------------- составляет 2,8 - 3,0

А при 365 нм

Рибофлавин

Флуоресценция в УФ-свете. 0,01 г препарата растворяют в 100 мл воды, раствор имеет яркую зеленовато-желтую окраску. При просматривании в УФ-свете обнаруживается интенсивная зеленая флуоресценция, исчезающая при добавлении кислоты хлороводородной и натрия гидроксида; при добавлении натрия гидросульфита исчезают и флуоресценция и окраска.

Хлордиазепоксид

Реакция с кислотой серной. К 10 мг хлордиазепоксид прибавляют 0,3 мл конц. кислоты серной; наблюдается желто-оранжевая флюоресценция, которая при добалении воды переходит в синею.

Диазепам

Реакция с кислотой серной. К 10 мг диазепама прибавляют 3 мл 0,1 моль/л раствора кислоты серной и нагревают до кипения в течение 3 мин; наблюдается желто- зеленая флюоресценция.

Задание 2. Проведите количественное определение следующих лекарственных веществ:

Хлорамфеникола (левомицетин)

Спектрофотометрия.0,1 г препарата помещают в мерную колбу вместимостью 100 мл и растворяют при нагревании, около 50⁰С, охлаждают и доводят водой до метки. 1 мл полученного раствора помещают в мерную колбу вместимостью 100 мл, доводят водой до метки и измеряют оптическую плотность полученного раствора при длине волны 278 нм.

А^1%_{1см (при 278 нм)} = 298

Сульфасалазин

Спектрофотометрия. 0,150 г препарата (точная навеска) помещают в мерную колбу вместимостью 100 мл, растворяют и доводят до метки 0,1 моль/л раствором натрия гидроксида. Помещают 5 мл полученного раствора в мерную колбу вместимостью 1000 мл, содержащую около 750 мл воды, перемешивают, прибавляют 20,0 мл 0,1 моль/л раствора кислоты уксусной и доводят водой до метки. Определяют оптическую плотность полученного раствора и стандартного раствора с концентрацией 7,5 мкг/мл стандартного сульфасалазина, при длине волны 359 нм.

Расчет количественного содержания проводится по формуле:

А_х . 20 . С_ст

С = ---------------------

А _ст

где А_х,, А _ст – оптические плотности исследуемого и стандартного растворов, соответственно;

С_ст – концентрация стандартного раствора, в мкг/мл