Добавил:
Upload Опубликованный материал нарушает ваши авторские права? Сообщите нам.
Вуз: Предмет: Файл:
микроба приложения.docx
Скачиваний:
1
Добавлен:
01.04.2025
Размер:
40.2 Кб
Скачать

Б) выявление зёрен волютина простым методом леффлера

Техника окраски:

1. Исследуемый материал наносят на чистые обезжиренные предметные стекла, растирают его тонким равномерным слоем по поверхности стекла, высушивают на воздухе.

2. Препарат фиксируют 3 мин в 96% этиловом спирте и высушивают.

3. На высушенный препарат наносят каплю 1% щелочного раствора метиленового синего по Леффлеру и окрашивают в течение 3 - 10 минут.

3. Промывают погружением в стакан с водопроводной водой.

4. Высушивают на воздухе и микроскопируют с иммерсионной системой.

Оценка результата. При правильном окрашивании в микроскопируемом препарате видны голубые бактерии на бесцветном или слабо голубом фоне.

Выявление капсул у бактерий методом бурри – гинса

Техника окраски:

  1. Черную тушь смешивают с культурой, делают мазок препарата, как мазок крови и высушивают препарат.

  2. После этого проводят фиксацию препарата химическим способом: смесью Никифорова или другими смесями.

  3. Промывают водой.

  4. Окрашивают тела микробных клеток карболовым фуксином Циля, разведенным 1:3, в течение 3-5 минут.

  5. Препарат промывают водой, высушивают и микроскопируют с иммерсионной системой.

Оценка результата. На темном фоне препарата хорошо видны бесцветные капсулы, внутри которых находятся тела бактерий красного/ярко-малинового цвета.

Выявление спор у бактерии методом ожешко

Техника окраски:

  1. На высушенный нефиксированный препарат (мазок готовится толстым и на краю стекла) наливают несколько капель 0,5% раствора хлористоводородной кислоты (HCl) и подогревают 1 - 2 мин над пламенем горелки/спиртовки до закипания, после чего остатки кислоты сливают.

  2. Препарат (остывший) промывают водой, подсушивают и фиксируют над пламенем горелки/спиртовки.

  3. Мазок окрашивают карболовым фуксином Циля (основной краситель) при нагревании до появления паров.

  4. Обесцвечивают 5% раствором серной кислоты (дифференцирующее вещество) в течение нескольких секунд.

  5. Промывают водой.

  6. Докрашивают 3 - 5 мин метиленовым синим Леффлера (дополнительный краситель), высушивают и микроскопируют с иммерсией.

Оценка результатов. Споры бактерий окрашиваются в красный цвет, цитоплазма приобретает синий цвет, вегетативные тела микробных клеток – голубого цвета.

ОПРЕДЕЛЕНИЕ ПОДВИЖНОСТИ БАКТЕРИЙ МЕТОДОМ ПОСЕВА:

1. Метод шукевича:

Испытуемую культуру бактерий засевают в конденсационную воду косого МПА, не прикасаясь к его поверхности.

Ставят в термостат при +37С° на 18-24 часа.

Учёт результатов ведут по феномену роения, в процессе которого растущая культура ползёт по «косячку» вверх. Неподвижная культура развивается только в конденсате, а «косячок» МПА остаётся стерильным.

2. Метод посева в столбик полужидкой среды по пешкову:

Испытуемую культуру осторожно бактериальной петлёй засевают в столбик 1-1,5 % МПА.

Ставят в термостат при +37С° на 18-24 часа.

Учёт результатов производят по характеру роста: а) неподвижные бактерии растут строго по ходу укола; б) подвижные бактерии дают рост, напоминающий ёршик с расходящимися в стороны шипами. Оценка роста проводится визуально.

Соседние файлы в предмете [НЕСОРТИРОВАННОЕ]