
Глава 11
МИКРОБИОЛОГИЧЕСКИЕ МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ
МАТЕРИАЛОВ ПРИ АУТОПСИИ
Микробиологические исследования проводят в случае летального исхода при гнойно - воспалительных заболеваниях, вызванных условно - патогенными бактериями.
В зависимости от клинического диагноза и сделанных в процессе вскрытия патологоанатомических находок материалом для микробиологического исследования служат кусочки органов и тканей, кровь, гной, экссудат и т.д
Трупный материал, исследуемый при основных видах гнойной патологии (Таблица 2)
Виды патологии |
Материал |
||||||
Кровь |
Кусочки ткани |
Содержимое гнойных полостей |
Спинномозговая жидкость |
Экссудат |
|||
Легкого |
Мозговых оболочек |
Прочих органов |
|||||
Сепсис |
+ |
+ |
|
(+) |
+ |
|
+ |
Пневмония |
|
+ |
|
|
|
|
+ |
Перитонит |
(+) |
|
|
|
+ |
|
+ |
Раневая инфекция |
(+) |
|
|
+ |
+ |
|
+ |
Менингит |
|
(+) |
+ |
|
|
+ |
|
Инфекция мочеполового тракта |
|
|
|
+ |
+ |
|
+ |
Примечание: (+)- исследование не обязательно.
Взятие исследуемого материала.
Основным условием для получения достоверных результатов и их правильной интерпретации является раннее, не позднее 12 часов после смерти больного, взятие материала, даже при хранении трупа при пониженной температуре. Материал для микробиологического исследования берет персонал морга (врач и его помощник) с соблюдением правил асептики.
Пробы крови получают из левого желудочка сердца шприцем или пастеровской пипеткой.
Непосредственно после взятия кровь в количестве 5-10 мл засевают во флаконы с 50-100 мл "двойной среды" и "среды для контроля стерильности". Край флаконов при посеве обжигают над пламенем спиртовой горелки.
Пункцию и биопсию проводят после обработки исследуемого участка 3% перекисью водорода и последующего удаления антисептика стерильным физиологическим раствором. С соблюдением правил асептики 2-3 кусочка органов или тканей, величиной по 0,5-1 куб. см помещают для транспортировки в стерильные чашки Петри или в пробирки.
Гной из вскрытых полостей, спинномозговую жидкость и т.д. отсасывают шприцем и в количестве 1-5 мл помещают в стерильные пробирки. Поверхностные секреты собирают на бактериологический тампон.
Материал, взятый от трупа больного с гнойно - воспалительной патологией, вызванной условно - патогенными бактериями, должен быть доставлен в лабораторию в течение 1 часа. В направлении дополнительно указывают дату и время смерти.
Из кусочков тканей, гноя и т.д. готовят мазки - отпечатк
Микроскопия исследуемого материала.и и окрашивают по Граму. При микроскопии отмечают степень обсемененности бактериями, морфологию и тинкториальные свойства микроорганизмов. В зависимости от результатов бактериоскопии, клинического диагноза и данных прижизненного микробиологического обследования вносят коррективы в ход исследования (расширяют набор питательных сред для первичного посева, учитывают вероятность выделения роящихся протеев и т.д.).
Посев исследуемого материала.
Питательные среды: "Двойная среда", "Среда для контроля стерильности" обогащенная - для посева крови; 5% кровяной агар (2 чашки).
Дополнительные среды: желточно - солевой агар; среда Эндо, ЦПХ-агар
Перед микробиологическим исследованием с кусочков органов и тканей стерильным инструментом удаляют поверхностный слой и свежими срезами делают отпечатки (площадь 2 см2) на плотных питательных средах.
Гной и экссудат наносят на среды пипеткой Пастера, а поверхностные секреты - бактериологическим тампоном. Внесенный материал рассеивают петлей по всей поверхности питательной среды. Для подготовки к определению количества бактерий в ткани, а также при посеве на жидкие среды кусочки предварительно измельчают.
Оценка результатов.
При микробиологическом исследовании трупного материала от больных с гнойно - воспалительной патологией следует помнить, что возбудители гнойной инфекции являются условно - патогенными бактериями, представителями нормальной микрофлоры человека, населяющей все области, соприкасающиеся с внешней средой и способной к активной инвазии в кровь, органы и ткани уже в агональный период, в первые же часы после смерти людей и без какой-либо инфекционной патологии. Поэтому, при интерпретации результатов микробиологического исследования трупного материала необходимо сопоставить полученные результаты с данными прижизненного обследования, с клинической картиной болезни, патологическими и гистологическими находками.