8. Облік результатів.

8.1. Висновок про стерильність досліджуваних зразків, простернлізованих ра-діаційним і газовим методами, роблять після 14 діб інкубації посівів в термостаті, стерилізованих паровими і повітряними методами, після 8 діб.

8.2. При відсутності росту мікроорганізмів у всіх середовищах видають висно-вок про стерильность виробу, завантаження, серії, партії.

8.3. При проростанні живильного середовища хоча б в одній пробірці проводять повторний контроль стерильності подвоєної кількості зразків даного завантажен-ня, серії, партії. Якщо при повторному посіві нових зразків проростання не спо-стерігається, то досліджуване завантаження, серію, партію вважають стерильною.

У разі проростання посівів (помутніння поживного середовища, утворення плів-ки, осадка) готують мазки для бактеріоскопічного підтвердження росту мікробів.

При контролі на стерильність виробів, стерилізованих газовими і паровими ме-тодами ріст в одиничних пробірках вегетативної мікрофлори не враховують, його відносять за рахунок внесення цієї мікрофлори в процесі посіву, матеріал підлягає повторному дослідженню.

8.4. Після дослідження завантаження, серії, партії в журналі відмічають резуль-тати бактеріологічного контролю: "стерильно" або "не стерильно".

9. Спосіб приготування поживних середовищ, використовуваних для контролю ефективності стерилізації.

9.1. Тіогліколеве середовище.

9.1.1.Склад:

- гідролізат казеїну (у перерахунку на сухий залишок) 15 г

- дріжджовий екстракт (10% у перерахунку на сухий залишок) 5 г

- натрій хлористий 2,5 г

- глюкоза 5 г

- цистин 0,75 г

- тіогліколева кислота 0,3 мл

- розчин резазуріна 1: 1000 (свіжовиготовлений) 1 мл

- агар-агар далекосхідний 0,75 г

- вода дистильована до 1000 мл

- рН середовища після стерилізації 7,0-7,2.

9.1.2. Приготування.

Змішують всі компоненти середовища, крім глюкози і тіогліколевої кислоти. Цистін попередньо розчиняють у невеликій кількості дистильованої води при поступовому додаванні 10-20% розчину їдкого натру до його повного розчинення.

Суміш підлужують 10% розчином їдкого натру до рН 8,0-8,2, кип'ятять в котлі з паровою сорочкою або на відкритому вогні при постійному перемішуванні до роз-плавлення агар-агару 5-10хв. або автоклавують 20хв. при 100°.Додають гарячу во-ду до початкового об'єму, вносять глюкозу і тіогліколеву кислоту, фільтрують че-рез полотно"Бельтинг",встановлюють рН7,2-7,3.Додають розчин резазуріна, змі-шують і розливають у стерильні пробірки по 20 мл. Стерилізують 20 хв. при 120°.

Тіогліколеве середовище можна зберігати до посіву, оберігаючи її від світла, при кімнатній Т°С протягом не більше 7 діб з дня приготування.

Примітка: допускається приготування середовища без розчину резазуріна;

допускається застосування інших сортів агар-агару, але з заздалегідь відтитро-ваною кількістю.

9.2. Цукровий бульйон Хоттингера (з 0,5 і 1,0% глюкози).

9.2.1. Склад:

- м'ясної перевар по Хоттінгера до розведення амінного азоту на 140-160 мг%

- натрій хлористий 0,5%

- глюкоза 0,5% (1,0%)

- вода дистильована до 1000 мл

- рН середовища 7,2-7,4

9.2.2. Приготування.

Змішують м'ясної перевар по Хоттингеру з водою в такому співвідношенні, щоб в середовищі містилося 140-160мг% амінного азоту, додають натрій хлористий. Суміш підлужують 10% розчином їдкого натру до рН8,0-8,2, кип'ятять на відкри-тому вогні 10 хв. або автоклавують при 100°С 10 хв. Якщо є википання, доводять об'єм до початкового кип'яченою або дистильованою водою. Фільтрують через ватний тампон, додають 0,5%(1,0%) глюкози, встановлюють рН 7,3-7,4 додаван-ням 5% розчину соляної кислоти. Знову фільтрують через паперовий фільтр або полотно"Бельтинг".Розливають в стерильний посуд. Стерилізують при 110° 30 хв.

9.3. Бульйон Сабуро.

9.3.1. Склад:

- сухий пептон ферментативний 10 г

- глюкоза або мальтоза 100 г

- вода дистильована до 1000 мл

- рН середовища після стерилізації 5,5-5,8

9.3.2. Приготування.

У воду додають пептон і кип'ятять 10 хв. Фільтрують через полотно «Бельтинг». До отриманого обсягу після фільтрації додають глюкозу і мальтозу. Якщо рН ви-ще, ніж 5,7, то слід підкислити 5% розчином соляної кислоти до рН 5.7. Розли-вають у стерильні пробірки по 10 мл. Стерилізують при 110° 30 хв.

9.4. Контроль стерильності живильних середовищ.

Для контролю стерильності поживні середовища після виготовлення і стериліза-ції поміщають в термостат при температурі 32°С на 72 години.

Цукровий бульйон Хоттингера і бульйон Сабуро контролюють повністю (всю приготовану серію пробірок, колб, флаконів).

Тіогліколевую середу витримувати при підвищеній Т°С до використання не до-пускається, тому від кожної серії відбирають 1% від загального числа пробірок, колб, флаконів і витримують їх у термостаті при Т°С 32°С протягом 72 год. Для контролю стерильності цю частину середовища не використовують.

9.5. Підготовка посуду.

Новий посуд до миття кип'ятять у слабкому розчині (1-2%) соляної кислоти, щоб уникнути подальшого вилужування скла.

Миття проводять йоржами з милом і содою, потім ретельно промивають про-точною і обполіскують дистильованною водою, що попереджає випадання сольо-вих залишків при висушуванні.

Підготовлений і висушений посуд загортають у папір і стерилізують.