7. Методика та техніка посіву виробів, простерилізованих в лпз.

7.1. Для контролю стерильності використовують живильні середовища:

• цукровий бульйон Хоттингера (0,5 і 1% глюкози);

• тіогліколеве середовище;

• бульйон Сабуро.

При контролі стерильності виробів, простерилізованих радіаційним методом, застосовують бульйон Хоттингера з 1% глюкози, простерилізованих газовим і па-ровим методами - з 0,5% глюкози.

Одночасний засів виробів на 3 вищевказаних середовища обов’язковий. При засіві виробу або його частини безпосередньо в живильне середовище кількість середовища в пробірці (колбі, флаконі і т.д.) повинно бути достатнім для повного занурення виробу або його частини.

Засіви в бульйон Хоттингера і тіогліколеве середовище витримують в термо-статі при Т°С 32°С, бульйон Сабуро - при Т°С 20-22°С.

Засіви інкубують в термостаті при відповідній Т°С на протязі 14 діб при конт-ролі виробів, простерилізованих радіаційним і газовим методами, простерилізова-них паровим методом - 8 діб.

7.2. Контроль стерильності виробів проводять шляхом занурення в живильні середовища. У виняткових випадках, коли необхідно перевірити стерильність інструменту більших розмірів, проби забирають методом змиву стерильною сер-веткою розміром 5X5 см², попередньо зволоженою стерильним фізіологічним роз-чином або стерильною водопровідною водою.

7.3.Перед посівом досліджуваний матеріал вносять у передбокснік, попередньо знімаючи зовнішню м'яку упаковку. У передбоксніку пакети, бікси протирають зовні за допомогою стерильного пінцета (корнцанга) стерильною серветкою (ват-ним тампоном), рясно змоченою 6%, розчином перекису водню, перекладають на стерильний лоток і залишають на 30 хвилин. При надходженні виробів у м'якій упаковці перший шар знімають у передбоксніку та вироби у внутрішній упаковці відразу переносять в бокс.

7.4. Посіви на стерильність проводить бактеріолог за допомогою лаборанта.

7.4.1. Посів на стерильність хірургічних інструментів.

Хірургічні інструменти за допомогою стерильного пінцету витягують з бікса або м'якої упаковки і цілком занурюють у пробірки з поживними середовищами. В окремих випадках, якщо всі простерилізовані інструменти в одній упаковці ве-ликих розмірів (голкотримачі, ранорозширювачі і т.д.), проводять змиви з по-верхні 3 інструментів одного найменування стерильними серветками, змоченими в стерильному фізіологічному розчині або стерильній водопровідній воді, і зану-рюють серветку в пробірки з тіогліколевим середовищем, цукровим бульйоном Хоттінгера і бульйоном Сабуро.

7.4.2. Методика посіву на стерильність багаторазових голок і шприців.

Для контролю на стерильність відбирають шприци малої ємності (1,0 або 2,0 мл) і в умовах бактеріологічного боксу з дотриманням правил асептики занурю-ють у пробірки з поживними середовищами окремо циліндр, поршень, голки.

При необхідності контролю шприців великої ємності (10, 20 мл і більше) до-слідження стерильності проводять методом змиву, при цьому стерильними сер-ветками, змоченими в стерильному фізіологічному розчині або водопровідній во-ді, протирають за допомогою пінцета внутрішні і зовнішні частини шприца і занурюють їх у 3 поживних середовища (п.7.1.).

7.4.3. Дослідження на стерильність систем переливання крові багаторазового використання. Від гумового шлангу, ближче до голки, відрізають ножицями за допомогою пінцета невеликі шматочки (1-2 см) і занурюють в пробірки з поживними середо-вищами (п.7.1.), голку окремо занурюють у тіогліколевую середу.

7.4.4. Посів на стерильність катетерів, гумових рукавичок та інших виробів з гуми і пластикатів.

Контроль стерильності зондів, катетерів, гумових рукавичок та інших виробів з гуми проводять шляхом повного занурення дрібних виробів у поживні середови-ща (п.7.1.), від більших за допомогою стерильного пінцета стерильними ножиця-ми відрізають невеликі шматочки (1-2 см) і занурюють у поживні середовища.

7.4.5. Посів на стерильність хірургічного шовного матеріалу.

Перед посівом ємності з відібраними зразками шовного матеріалу в передбокс-ніку протирають стерильною марлевою серветкою, рясно змоченою 6% розчином перекису водню, і залишають на 30 хвилин, потім вносять в бокс.

Підготовлений до роботи кетгут в операційному блоці зберігають у спиртовому розчині йоду. Перед посівом його піддають спеціальній обробці для нейтралізації і відмивання нейтралізуючого розчину. Моток кетгуту, приготовлений для дослід-ження, перекладають стерильним корцангом або пінцетом в стерильний 10% роз-чин гіпосульфіту натрію. Розчин гіпосульфіту натрію готують на дистильованій воді, розливають у пробірки (колби) по 20 - 30 мл, стерилізують при 120°С 30 хв. Кетгут витримують в розчині гіпосульфіту протягом 24 годин при кімнатній Т°С (можливо помутніння розчину за рахунок випадіння сірки), потім перекладають в пробірки з 20-30 мл стерильної дистильованої води, де також витримують протя-гом 24 годин при кімнатній Т°С. Безпосередньо перед посівом моток кетгуту ви-тягують стерильним пінцетом і перекладають в стерильну чашку Петрі, за допо-могою пінцета і ножиць його розрізають на дрібні шматочки довжиною 1-2 см і розсмикують для проростання мікроорганізмів зсередини кетгуту.

Посів роблять у 2 пробірки з тиогликолевим середовищем, 2 пробірки з бульйо-ном Сабуро і 2 пробірки з цукровим бульйоном Хоттингера, поміщаючи в кожну пробірку по 4-5 шматочків досліджуваного матеріалу.

Приготований до роботи шовк (лавсан) в операційних зберігають в спиртовому розчині, тому перед посівом його поміщають на 24 год. в стерильну дистильовану воду при кімнатній Т°С. Перед посівом моток шовку (лавсану) перекладають у стерильні чашки Петрі, розрізають на дрібні шматочки довжиною 1-2 см. Посів роблять також, як і кетгуту.

7.4.6. Дослідження на стерильність апаратів екстракорпорального кровообігу.

Дослідження на стерильність апаратів штучного кровообігу проводять бакте-ріолог і лаборант ЛПЗ в операційній після асептичної збірки апарату.

Контролю підлягають: змив з апарату, перфузат до перфузії,кров після перфузії. Стерильний фізіологічний розчин в кількості не менш 250 мл проганяють через апарат, підготовлений до операції, відбирають 100 мл розчину і засівають на по-живні середовища по 20 мл в 100 мл живильного середовища (п.7.1.). Аналогічно роблять посів перфузата до перфузії та крові після перфузії.

7.4.7. Посів на стерильність перев'язувального матеріалу.

Бинти, ватні кульки, марлеві серветки, турунди і т. п. відбирають з різних місць бікси стерильним пінцетом.

Дрібні вироби цілком занурюють у пробірки з поживними середовищами. Від бинтів (внутрішніх частин) і великих марлевих серветок з допомогою стерильних ножиць відрізають шматочки і занурюють у пробірки з поживними середовищами (п.7.1.). На кожний вид перев'язувального матеріалу використовують по 2 пробір-ки кожного середовища.

7.4.8. Посів на стерильність хірургічної білизни.

Простерилізованою і фламбірованими ножицями (змоченими в спирті і прове-деними через полум'я горілки) за допомогою пінцета від хірургічної білизни відрі-зають невеликі шматочки тканини (зав'язка, внутрішні шви і т. п.) і занурюють у пробірки з поживними середовищами (п.7.1.), по можливості, не торкаючись сті-нок пробірки (колби).