Эталоны ответов к билету №21.

1. Хроматография является эффективным методом анализа сложных смесей веществ. Этот метод вызвал большой интерес среди широкого круга химиков, биологов и медиков, приобрел важное значение в исследовательской работе и нашел применение в промышленности и медицине в качестве экспресс-метода.

Для медицины имеет большое значение определение следующих соединений:

• антиоксидантов

• аминокислот

• белков, пептидов,

• алкалоидов

• стероидов (холестерин, желчные кислоты, стероидные гормоны)

• витаминов (жиро- и водорастворимых)

2. Для исследования ферментного кардиоспектра определяют активность следующих ферментов:

Кретинкиназа сердечная – КК-МВ – используется для ранней диагностики инфаркта миокарда, т.к. активность КК увеличивается уже через 4 часа и возвращается к референтным пределам через 8-12 час.

Аминотрансферразы – АлТ и АсТ – активность увеличивается через 12 часов и возвращается к референтным пределам через 48 час.

Лактатдегидрогеназа сердечная – ЛДГ₁ – используется для поздней диагностики инфаркта миокарда, т.к. активность ЛДГ₁ увеличивается через 72 часа и возвращается к референтным пределам на 6 - 8 сутки.

3. Белки сыворотки крови помещают в щелочной буфер с рН=8,4. При этом белковые молекулы приобретают отрицательный заряд и под действием постоянного электрического поля движутся от катода к аноду. Скорость движения при горизонтальном электрофорезе прямо пропорциональна величине заряда, и обратно пропорциональна молекулярной массе.

Эталоны ответов к билету №22.

1. Изоферменты – группа ферментов, катализирующих одну и ту же реакцию. Многие ферменты имеют изоформы – свои аналоги – которые обладают одинаковым активным центром. Изоформы имеют: ЛДГ, фосфатаза и некоторые другие ферменты. Изоферменты отличаются друг от друга некоторыми свойствами:

Локализацией – разные изоформы синтезируются в определенных клетках (например, изоформы ЛДГ - лактатдегидрогеназы) или в разных участках клетки (например, АсТ - аспартатаминотрансферраза - имеет цитозольную и митохондриальную изоформы)

рН – разные изоформы проявляют активность при разных рН (например, КФ (кислая фосфатаза – 5,0) и ЩФ (щелочная фосфатаза – 8-9)

Скоростью катализируемой реакции – есть медленные (реакция протекает в пролонгированном режиме) и быстрые (реакция протекает в ускоренном режиме) изоформы

Органами-мишенями – активность разных изоформ направлена на строго определенные клетки и ткани

2. Энзимодиагностика заболеваний печени включает определение активности ферментов:

Щелочная фосфатаза – ЩФ – ее активность увеличивается при гепатитах вирусного происхождения, циррозе и некоторых новообразованиях

Гаммаглутамилтранспептидаза – ГГТп – ее активность увеличивается при алкогольном гепатите и алкогольном циррозе печени

Аминотрансферразы – АсТ и АлТ – их активность увеличивается при изменении проницаемости мембран гепотоцитов, предшествующем любой патологии печени; при этом сначала возрастает активность АлТ, т.к. это цитозольный фермент, который сразу выходит в кровь; активность АсТ в начале возрастает незначительно, но когда начинается процесс деструкции клеточных элементов печени, затрагивающий разрушение митохондрий, АсТ увеличивается значительно.

3. Виды электрофореза: электрофорез проводится на твердом носителе, по которому передвигаются разделяемые фракции. Такой электрофорез называется зональный, так как четко различают окрашенные зоны, между которыми остаются не окрашенные участки (по Тизелиусу). Электрофорез можно классифицировать по:

1. типу носителя (твердой фазы)

2. способу проведения

3. направлению движения

	Э лектрофорез
Вертикальный	Бумажный	Капиллярный
Горизонтальный	Тонкослойный	Иммунноэлектрофорез
Наклонный	Пленочный	Колоночный