Техника приготовления мазков

Мазки готовятся на предметных стеклах. Ввиду того что от качества стекла зависит и качество мазка, необходимо хорошо промывать его и обез­жиривать.

Рис. 88. Техника приготовления мазка.

Стекло нужно хорошо промыть в проточной воде, а стекла, бывшие в упот­реблении, прокипятить в соде или еще лучше, по нашим наблюдениям,— в зольном щелоке. Прокипяченные в зольном щелоке стекла затем хорошо промывают в проточной воде, вытирают чистой сухой тряпочкой и помещают в смеси спирта с эфиром (в равных частях). Перед работой стекла вынимают с помощью пинцета и насухо вытирают чистым полотенцем. Лучшими стек­лами являются приготовленные из фотопластинок, так как они не имеют пу­зырьков и поверхность их ровная и чистая.

В случае нужды можно использовать и старые стекла, бывшие в употреблении. После просмотра и браковки негодных стекол их подвергают тщательной обра­ботке и очистке и после этого хранят в смеси спирта с эфиром.

Первую каплю крови удаляют ват­кой, а из второй капли изготовляется мазок. Кровь необходимо использовать возможно быстрее, пока она не претер­пела изменений И не потеряла своих фи-зических свойств. Быстронаступающее свертывание крови делает приготовление мазка совершенно невозможным.

Мазок крови нужно делать возможно быстрее и увереннее. При этом усло­вии мазки получаются ровными, однородными и не имеют прерывистых линий (гармошка). При приготовлении мазка предметное стекло зажимается между большим и средним пальцами левой руки. В правой руке находится шлифо­ванное покровное стекло. Капля крови снимается прикосновением поверх­ности предметного стекла. У беспокойных животных каплю крови можно снять углом покровного стекла, а затем перенести ее на предметное стекло. Для получения мазков хорошего качества необходимо брать небольшие капли крови.

Прислонив край покровного стекла к капле крови, которая находится на предметном стекле, дают возможность распределиться ей между двумя стеклами. Если стекла чистые и сухие, кровь, в силу капиллярности, распре­деляется почти моментально. Угол между покровным и предметным стеклом не должен превышать 45—50°. Покровное стекло фиксируется между паль­цами правой руки так, чтобы кончик одного или обеих пальцев касался края предметного стекла. В этих случаях мазки получаются с ровными краями. Передвигая покровное стекло по предметному спокойно и не очень быстро, приготовляют мазок. Кровь при движении покровного стекла движется(тянется) за стеклом, а не впереди его, и не подвергается травмированию. Такие мазки называют «вытяжными», что дает довольно точное определение процесса их изготовления.

Приготовленный мазок необходимо сейчас же высушить. Летом это можно сделать, положив его в перевернутом виде на спичку. Переворачивание стекла мазком вниз необходимо делать потому, что летом мазки очень часто портятся мухами. При работе в сыром и холодном помещении мазки можно высушивать на руке, а затем убирать в боковой карман, прикрыв его предварительно чистым стеклом с целью сохранения мазка от повреждения.

Если изготовление мазков производится на морозе 10—15°, то для пред­отвращения гемолиза, когда они внесены в помещение, их нужно сразу же опустить в кювету с метиловым спиртом и в таком виде нести в теплое помещение.

После фиксации в спирте в течение 5—10 минут мазки окрашиваются обычным методом. Обработанные таким образом мазки ничем не отличаются от сделан­ных в сухом и теплом помещении и могут быть использованы для самых тон­ких гематологических исследований.

Просушивание мазков на пламени горелки не рекомендуется, так как форменные элементы крови деформируются и мазки становятся непригодными для исследования. Когда мазок высох, на нем пишется порядковый номер, кличка животного или номер, а также дата приготовления мазка.

Для окраски и исследования отбираются лучшие мазки. Хороший мазок должен отвечать следующим требованиям.

1. Он должен быть уже и короче стекла, т. е. должен иметь свободные края по длине и зазубренный край по ширине в конце мазка.

2. Края мазка должны быть ровными.

3. Мазок должен быть тонким, гомогенным, без просветов и прерываю­ щих линий, с нежной поверхностью и без следов гемолиза.

Рис. 89. Правильно и неправильно приготовленные мазки: 1 — мазок на плохо обезжиренном стекле; 2 —слишком короткий мазок; 3 — слишком длинный неравномерный мазок; 4—слишком толстый мазок;

5—правильный мазок, тонкий, равномерный и достаточно длинный.

При дальнейшем хранении препаратов необходимо оберегать их от насе­комых, влаги, действия кислот и щелочей, дыма и различных газов. Плохо сохраняемые мазки становятся иногда совершенно непригодными для иссле­дования, несмотря на качественное приготовление их вначале.

Фиксация мазков. Фиксация мазков преследует цель закрепить клетки крови в таком виде, чтобы форма и внутренняя структура их не изменялась. Большинство артефактов, обнаруживаемых при исследовании мазка крови, зависит от плохой фиксации. Лучшим фиксатором мазков является абсолютный метиловый спирт.

Спирт можно наслаивать непосредственно на мазок высоким слоем. Пре­парат в этом случае должен лежать горизонтально. Можно также опускать препарат в спирт, налитый в кюветы. В этом случае весь препарат погружается в спирт. Чтобы предотвратить улетучивание спирта, кювета закрывается крышкой или пробкой.

Фиксация метиловым спиртом производится в течение 3—5 минут. Спирт можно использовать для фиксации препаратов вторично, если он не загрязнен. Способ фиксации в кюветах удобен тем, что позволяет фиксировать одновре­менно четыре препарата.

Кроме метилового спирта, могут использоваться и другие фиксаторы:

1. абсолютный этиловый спирт 20 минут

2. метиловый спирт + ацетон 5 »

3. алкоголь + эфир 10 »

4. ацетон 5 »

5. осиева кислота (1%-ный водный раствор)] . . . ¹/₂—1 час

Неооходимо учитывать, что денатурированный спирт и 96° спирт дают очень много артефактов.

Рис. 90. Кюветы для фиксации

мазков: а — узкая; б—широкая.

Специальной фиксации мазков не делают только в тех случаях, когда фиксирующие вещества входят в состав красок, например, при окраске по Май-Грюнвальду и Лейшману.

Фиксированные препараты сохраняются в течение продолжительного времени.

Окраска мазков. Окрашивание мазков крови требует внимания и известного опыта со стороны исследователя. Прекрасно приго­товленный и хорошо зафиксированный мазок может быть испорчен плохим окрашиванием. Причинами неудачного окрашивания может быть плохое качество краски или же несоблю­дение правил окрашивания.

Окрашивание мазков крови должно быть прогрессивным и паноптическим. под прогрессивным окрашиванием понимают продолжительное окрашивание слабыми растворами краски. Окраска зависит от прямого сродства элементов крови к краске. Паноптическим окрашиванием выявляется воз­можно большее число элементов крови с мельчайшими нюансами тонов окраски. В отличие от комбинированного метода, паноптический требует применения нейтральных красок, а не смеси основ­ных и кислых красок.

Рис. 91. Приспособление для окрашивания мазков.

Среди нейтральных, паноптических красок наиболее важное место занимают азур-эозиновые смеси, изготовляемые по принципу Романовского (1891 г.).

В СССР в настоящее время выпускается го­товый раствор азур-эозина (по Романовскому), в Германии широкое распространение нашла краска Гимза, выпускаемая в продажу под названием «Giemsa's Losung fur Romanowsky farbung», состоя­щая из: азур 2-эозина—3,0, Азур 2—0,8, глицерина химически чистого 125 мл, метилового алкоголя химически чистого 375 мл.

Окраска по Романовскому— Гимза. Для окрашивания используется гото­вый раствор краски.

Перед употреблением краска разводится из расчета 1—2 капли на 1 мл дистиллированной Зафиксированный препарат помещают мазком вверх на стеклянные палочки над чашкой ипокрывают поверхность мазка высоким слоем раз­веденной краски. Окрашивание можно производить также в кюветах, на­полненных раствором краски. Окрашивание продолжается 15—30 минут; для свежих мазков и в сухую жаркую погоду времени требуется меньше, чем при окраске старых мазков или при окраске в сырую и холодную погоду. По истечении определенного времени краску смывают, лучше дистилли­рованной водой, мазок для высушивания ставят вертикально на пропускную бумагу. Высушивание мазка можно производить подогреванием на руке.

При окрашивании по методу Романовского—Гимза необходимо соблюдать ряд предосторожностей, чтобы получить правильную окраску:

1. вода должна иметь рН=6,6—6,8;

2. посуда, в которой разводится краска, должна быть чистой;

3. раствор краски готовится ex tempore, перед окраской, а не заранее,

так как наилучшее окрашивание получается в момент разбавления алкоголь­ного раствора водой;

4. краску следует добавлять в воду по каплям, а не наливать сразу;

5. концентрация раствора не должна превышать три капли на 1 мл;

6) для получения красивой дифференциальной окраски рекомендуется оставлять дистиллированную воду на мазке после промывки в течение 1 минуты.

Правильная окраска узнается по внешнему виду. Макроскопически мазок должен быть окрашен в розоватый цвете незначительным фиолетовым оттенком. Серые или серо-голубые мазки указывают на избыток щелочи, яркокрасные— на избыток кислоты или слишком кратковременное окрашивание.

Метод Романовского—Гимза особенно хорош при окрашивании мазков на кровепаразитов, а также при окрашивании одновременно нескольких маз­ков.

Модификация окраски мазков крови краской Романовского — Г имза по Филипсону. Для окрашивания по этому методу требуется особое приготовление краски, которое можно произ­водить заранее, но можно и в момент окрашивания. Берется одна часть жидкой краски Романовского и три части этилового спирта (ректификата). После смешивания со спиртом краска сразу же пригодна для употребления.

На нефиксированный мазок крови наносится 10—15 капель приготовлен­ной вышеуказанным способом краски. Через 10—15 минут, необходимых для фиксации мазка, наливается примерно 0,5—1 мл дистиллированной воды, которая тщательно смешивается с краской. Окрашивание мазка продолжается в течение 20—30 минут (длительность периода окрашивания изменяется в за­висимости от температуры воздуха, качества краски и некоторых других при­чин и может быть установлена в каждой лаборатории самостоятельно). Затем краска смывается дистиллированной водой и мазок высушивается. Высохший мазок годен для исследования.

Окраска по Лейшману. Окраска производится готовым раство­ром краски Лейшмана. Метод не требует предварительной фиксации, а потому считается быстрым и сравнительно удобным.

На нефиксированный мазок крови наслаивают 15—20 капель краски Лейшмана и оставляют на 3 минуты. Краска, содержащая метиловый алкоголь, фиксирует мазок и одновременно окрашивает клетки крови. По истечении определенного времени в краску добавляется такое же количество дистилли­рованной воды (15—20 капель) и при помощи стеклянной палочки или пипетки осторожно перемешивают краску с водой. Через 7—15 минут разведенную краску смывают дистиллированной водой. Так же, как и при окрашивании по Романовскому—Гимза, дистиллированную воду лучше в течение 1 минуты оставить на мазке. Затем мазок ставится в вертикальное положение или же высушивается на руке. Краска Лейшмана дает очень хорошие результаты при окрашивании мазков из костного мозга.

Окраска по Ма й-Г рюнвальд. Окрашивание производится готовым раствором краски Май-Грюнвальд. На нефиксированный мазок: крови наносится 15—20 капель краски и оставляют на нем 3 минуты. По истечении указанного времени на мазок наслаивают такое же количество капель дистил­лированной воды (15—20 капель). Краска хорошо перемешивается с водой при помощи стеклянной палочки и докрашивается еще 10—15 минут. Дальше препарат промывается дистиллированной водой и высушивается.

Окраска по Паппенгейму. Этот метод соединяет преимущест­ва окраски по Май-Грюнвальду и Романовскому—Гимза. Окраска является комбинированной и заключается в том, что мазок вначале окрашивается по методу Май-Грюнвальда, а затем докрашивается по методу Романовского— Гимза.

На нефиксированный мазок крови наносится 15—20 капель краски Май-Грюнвальда и выдерживается в течение 3 минут. После этого к краске добав­ляется такое же количество дистиллированной воды и после перемешивания оставляют еще на 3 минуты. Затем краска сливается, стекло ставится краем на пропускную бумагу, чтобы стекла вода. После этого на невысохший еще мазок наслаивается свежеприготовленная краска Романовского—Гимза (15— 20 капель краски на 10 мл воды) и мазок докрашивается дополнительно 15— 30 минут, смотря по давности мазка. По истечении указанного времени краска смывается и мазок высушивается. Если мазки окрашиваются интенсивно, их можно раскрасить дистиллированной водой в течение 1 минуты, а затем вы­сушить.

Витальная окраска мазков крови для выявления гра-нулофиламентозной субстанции в эритроцитах. Для витального окрашивания используются бриллианткрезилбляу, толлуидинбляу, нейтральрот, азур и некоторые другие краски. Самой употребительной является бриллианткре­зилбляу, которая окрашивает быстрее других красок и вместе с тем дает более четкий рисунок субстанции. Для окрашивания применяется спиртовой раствор краски в разведении 1 :80. Используется для этой цели абсолютный алкоголь.

На слегка подогретое предметное стекло стеклянной палочкой наносится капля краски и быстро размазывается наподобие мазка крови. На стекле обра­зуется едва заметный серовато-фиолетовый налет краски. Окрашенные таким образом стекла могут храниться продолжительное время в сухом месте. На окрашенной поверхности стекла делают в дальнейшем мазки крови, которые тотчас же вносятся во влажную камеру на 3—5 минут. Влажную камеру можно приготовить из бактериологических чашек. В нижнюю чашку по окружности кладется фильтровальная бумага, смоченная в воде; в центр чашки можно положить две спички, на которые и помещается предметное стекло мазком вверх, после чего чашка закрывается другой чашкой. По истечении определен­ного времени мазок вынимают из влажной камеры и высушивают.

Витально окрашенные мазки можно дополнительно окрасить краской Романовского—Гимза или Лейшмана. Дополнительное окрашивание дает очень красивые мазки, но часть субстанции при этом исчезает. Для устранения этого недостатка витально окрашенный мазок мы докрашиваем предварительно 1%-ным спиртовым раствором метиленовой синьки в течение 1—2 минут с по­следующей докраской по Лейшману. Субстанция при таком окрашивании коли­чественно не уменьшается и становится рельефнее.

Окраска толстой капли. Исследование в толстой капле производится с целью подсчета эозинофилов и обнаружения кровепаразитов.

Рис. 92. Толстая капля.

На предметное стекло наносится крупная капля крови и препаровальной иглой размазывается до величины гривенника и высушивается на воздухе в течение 20—30 минут. На высу­шенный и не фиксированный препа­рат наносится краска Романовско­го—Гимза. Краска быстро гемоли-зирует эритроциты и, разлагаясь, образует красное облачко на поверх­ности жидкости. Чтобы избежать выпадения осадка, раствор краски через 3 минуты осторожно сливают, приподнимая для этой цели или стекло или же чашку, над которой про­изводится окрашивание. Остатки первой порции краски осторожно смывают приливанием сбоку новой порции краски. Повторив эту манипуляцию, еще раз оставляют краску Романовского—Гимза на стекле и окрашивают толстую каплю минут 20—30. По истечении определенного времени с теми же предосто­рожностями сливают краску и, сполоснув осторожно дистиллированной водой, высушивают мазок, придав ему вертикальное положение.

Удачное окрашивание характеризуется тем, что середина окрашивается в синеватый или голубоватый цвет, в то время как края получают красновато-фиолетовый оттенок. Перекрашенные препараты характеризуются грязнофио летовым окрашиванием. Такое же окрашивание получается при щелочной реакции воды.

В правильно окрашенной толстой капле должны быть отчетливо выражены характерные особенности каждой клетки, а кровепаразиты должны иметь хорошо окрашенную протоплазму в голубой цвет и рубиново-красное ядро. При плохой окраске ядро клеток и зернистость протоплазмы выражены не отчетливо, кровяные пластинки еле заметны.

Ввиду большого значения эозинофилов для клинических целей, а также незначительного их содержания в периферической крови рекомендуется под­считывать их отдельно.

С иммерсионной системой подсчитывается от 200 до 500 лейкоцитов и особо при этом фиксируются эозинофилы. Подсчитав нужное количество лейкоцитов, по формуле выводят процент эозинофилов, например: на 300 лейкоцитов 15 эозинофилов; на 100 лейкоцитов X эозинофилов.

Практически можно полученное количество эозинофилов разделить на первую цифру подсчитанных сотен: 2, 3, 4 или 5.

МОРФОЛОГИЯ ФОРМЕННЫХ ЭЛЕМЕНТОВ КРОВИ

Эритроциты

Основную массу форменных элементов крови представляют красные кро­вяные тельца. В висячей капле эритроциты находятся в таком огромном количестве, что закрывают первое время все другие элементы. Эритроциты придают крови красный цвет и непрозрачность.

Типичной формой эритроцитов большинства млекопитающихся является форма равномерно закругленных, двояковогнутых, безъядерных пластинок. При рассмотрении их в профиль они имеют форму бисквитов, en face—вид тарелки с более темной периферией и светлоокрашенным центром.

У верблюда, оленя и ламы эритроциты циркулирующей крови имеют овальную форму, а эритроциты птиц, кроме того, имеют ядро.

В крови, размазанной на предметном стекле, эритроциты часто имеют вид монетных столбиков, в которых каждый эритроцит наполовину прикрывает рядом с ним лежащий. Это объясняется снятием заряда или уменьшением его вследствие увеличения щелочности. Отдельные эритроциты имеют желтовато зеленоватый цвет, а толстый слой их кажется красноватым.

Величина эритроцитов различных животных неодинакова. Средний диа­метр (в микронах) следующий:

Вид животного	Среднее	Минималь­ное	Максималь­ное	Фамилия автора
Крупный рогатый скот Овцы Козы Буйволы Яки Верблюды Лошади Ослы Свиньи Собаки Кошки Кролики Морские свинки Куры Утки	5,6 5,0 4,1 5,1 5,0 7,0x4,6 5,6 6,5 6,5 7,3 6,2 6,0 6,2 10,7x6,2 12,2x6,5	4,4 3,0 2,1 3,3 4,0 5,6x9,6 4,5 5,0 4,0 4,2 4,2 5,0 4,7 9,3x5,6 11,0x6,4	7,7 5,6 4,9 7,0 6,0 9,4x5,6 7,5 8,5 9,0 10,2 8,2 7,0 7,8 12,2x7,2 11,4x6,5	Д. Соколов Л. Лебедев B. Чагин К. Мавсун-Заде П. Карасев Н. Семушкин C. Хрусталев А. Неводов С. Смирнов Ф. Михайлов А. Неводов A. Васильев Д. Криницын B. Зайцев П. Преображенский

В окрашенных препаратах эритроциты имеют желтовато-розовый цвет, более интенсивный по периферии и слабый в центре. Следовательно, эритро­циты воспринимают только кислые краски, почему и называются ацидофилами. Несмотря на то, что центральное просветление в эритроцитах может по вели­чине варьировать, вся масса эритроцитов имеет общий однообразный тон. Это свойство эритроцитов, поглощать в равных количествах кислые краски и давать однообразное окрашивание, называется ортохромазией.

Просветление в центре эритроцитов объясняют тем, что на этом месте у молодого эритроцита находилось ядро, с утратой которого место, где было ядро, западает и эритроцит принимает форму двояковогнутой чечевицы.

Олигохромазия. При уменьшении количества гемоглобина в эритроците просветление в центре становится больше, и только тонкий периферический слой оказывается окрашенным, в то время как центральная часть окраши­вается слабо или не окрашивается совершенно. Бросающаяся в глаза слабая окрашиваемость эритроцитов носит название олигохромазии, или гипохромии. Встречается олигохромазия сравнительно часто при анемиях гемолитического и алиментарного происхождения. При вторичных анемиях некоторые эритро­циты совсем не воспринимают окраски, выступая на мазках в виде теней бледных, неясно очерченных, бесструктурных образований.

Гиперхромазия—ясно выступающее интенсивное окрашивание красных кровяных телец. Наряду с резким падением гемоглобина и эритроцитов в цир­кулирующей крови появляются клетки большого диаметра и богатые гемогло­бином. Эти клетки окрашиваются интенсивно, большей частью диффузно, без просветления в центре. Эти макро- и мегалоциты обусловливают повышение цветного показателя крови. Отмечается гиперхромазия при гиперхромных анемиях. Появление в циркулирующей крови мегалобластов рассматривается, как возврат к эмбриональному кроветворению.

Полихроматофилия (полихромазия). Наряду с ацидофильными эритроци­тами в циркулирующей крови можно встретить эритроциты, которые окраши­ваются щелочными красками. Следовательно, протоплазма эритроцитов при применении простых и комбинированных красок принимает смешанный цвет, не свойственный для чистого гемоглобина. Так, при окрашивании метиленовой синькой нормальные красные кровяные тельца окрашиваются в зеленоватый цвет, а полихроматофильные—в синий. При окрашивании комбинацией эозина и метиленовой синьки нормальные эритроциты принимают розовый цвет, а полихроматофильные—фиолетовый с различными оттенками. При резко выраженной полихроматофилии эритроциты окрашиваются в синий цвет.

Полихроматофилы обнаруживаются в небольшом количестве в циркули­рующей крови мелких животных и в костном мозгу у крупного рогатого скота и лошадей. Полихроматофилы большинством специалистов рассматриваются как показатель незрелости клетки, а появление их в циркулирующей крови расценивается как показатель усиления регенерации.

Анизоцитоз. У здоровых животных колебания в диаметре эритроцитов не должны превышать 0,5—1,0 u от установленной средней величины для данного вида животных. Появление в циркулирующей крови эритроцитов раз­личного диаметра: микро-, макро- и мегалоцитов и носит название анизоцитоза. Микроцитами называются эритроциты, меньшие по размеру, сравнительно с нормальными эритроцитами. Они развиваротся из меньших по величине нормобластов. Величина их колеблется от 2 до 4 u.

Макроциты имеют значительную величину (8—12 u). Большей частью макроциты бывают полихроматофильными или гиперхроматическими, реже олигохромными. Макроциты, имеющие величину больше 12 u, носят название мегалоцитов, или гигантоцитов. Они рассматриваются как эмбриональные формы и указывают на возврат к эмбриональному кроветворению.

Анизоцитоз является показателем функциональной недостаточности костного мозга. Встречается анизоцитоз при первичных и вторичных анемиях, в случаях истощения кроветворного аппарата. Незначительный анизоцитоз можно встретить при кровотечениях и кровопусканиях с сохранением функ­ции кроветворного аппарата.

Пойкилоцитоз. В хорошо приготовленных мазках эритроциты имеют округлую форму с отчетливо выраженными контурами. При патологических процессах или погрешностях техники приготовления мазков можно встретить эритроциты с изъеденными краями, в виде тутовых ягод или груши, серпа или булавы. Можно также встретить клетки с псевдоподиями и отростками.

Разнообразие форм эритроцитов носит название пойкилоцитоза. Пойкило­цитоз возникает вследствие легкой ранимости клетки на почве потери эластич­ности. Наиболее резко выраженный пойкилоцитоз отмечается при анемиях и при септических заболеваниях. Ложный пойкилоцитоз, связанный с погреш­ностями техники, исключается просмотром мазков крови в нефиксированном виде и в безукоризненных по технике выполнения и окрашивания мазках.

Гранулофилоцитоз, ретикулоцитоз. Появление в циркулирующей крови в повышенном количестве эритроцитов с гранулофиломентозной субстанцией носит название гранулофилоцитоза, или ретикулоцитоза.

Название гранулофилоцитоз больше отвечает характеру субстанции, чем ретикулоцитоз, так как у животных наиболее частой формой является зерни­стая, а не сетчатая, как у человека. О нитях можно говорить лишь условно, так как они сами состоят из мелких гранулей.

По характеру рисунка эритроциты с субстанцией могут быть подраз­делены на компактные, сетчатые и зернистые.

Компактный гранулофилоцит по величине может быть равен нормоциту, но встречаются клетки и большего размера. Протоплазма гранулофилоцита оксифильная. На розовом фоне отчетливо выступают синие гранули субстан­ции, которые в виде компактной массы располагаются обычно в центре клетки. Иногда можно отметить субстанцию в виде ленты или палочки. Субстанция может быть компактной или рыхлой, в зависимости от чего гранули выступают слабо или отчетливо.

Сетчатый гранулофилоцит по величине больше нормоцита и нередко имеет овальную форму. Субстанция выступает в виде нитей, состоящих из мел­ких гранулей. Сетчатость в одних клетках мелкая, в других, напротив, гру­бая. Отдельные нити незаметно переходят в протоплазму клетки.

Зернистые гранулофилоциты встречаются чаще других форм. На розовом фоне протоплазмы выступают синие гранули в различном количестве и неоди­накового расположения. В одних эритроцитах зернистость располагается по краю клетки, в других заполняет ее равномерно.

Компактные гранулофилоциты появляются в циркулирующей крови в увеличенном количестве при значительных раздражениях костного мозга и трактуются как сдвиг «влево».

Сетчатые гранулофилоциты в повышенном количестве появляются при вторичных анемиях и указывают на среднюю степень раздражения костного мозга. Увеличение зернистых форм указывает на исключительно слабое раз­дражение костного мозга.

Определение процентного содержания гранулофилоцитов и сдвиг внутри формулы является одним из лучших методов определения функциональной способности кроветворных органов.

Увеличение количества со сдвигом влево указывает на усиление эритро-поэза, и, наоборот, уменьшение их количества свидетельствует о его слабости. Количественные колебания гранулофилоцитов и сдвиги внутри формулы по вре­мени являются более ранними показателями регенерации крови, чем все осталь­ные регенеративные формы эритроцитов.

Тельца Жолли—продукт неполного растворения ядерной субстанции оболочки. Это круглые или овальные образования, окрашивающиеся в ярко-красный цвет. Тельца Жолли располагаются в протоплазме эритроцита боль­шей частью одиночно, но встречаются отдельные эритроциты с двумя и даже тремя тельцами. Иногда тельца Жолли могут быть в виде мелкой зернистости.

Они встречаются при анемиях, но особенно много эритроцитов с тельцами Жолли отмечается при спленоктомии—удалении селезенки.

Кольца Кабо обнаруживаются главным образом в полихроматофильных эритроцитах. Они имеют форму восьмерки, овала, кольца, двойных или трой­ных петель. При окраске по Романовскому—Гимза кольца Кабо выступают в виде резко очерченных, окрашенных в красный цвет с фиолетовым оттен­ком, образований, расположенных то в центре клетки, то ближе к пери­ферии.

Кольца Кабо легко определяются при микроскопии по форме и окраске. Рассматриваются как остатки ядерной субстанции. Встречаются они при тяже­лых формах анемии.

Базофильная пунктация представляет собой резко очерченную зернистость, окрашивающуюся в основной синий или темносиний цвет с фиолетовым оттен­ком. Базофильная зернистость состоит из различных по величине и форме гранулей, в беспорядке разбросанных в протоплазме клетки. В одних случаях гранули равномерно заполняют всю протоплазму клетки, в других—распо­ложены небольшими группами.

Природа базофильной субстанции до сих пор точно не установлена. Одни исследователи считают базофильную зернистость продуктом белковой суб­станции, другие—остатками распавшегося клеточного ядра.

Некоторые рассматривают базофильную пунктацию как дегенеративное явление, указывающее на ослабление функции костного мозга. Другие склонны считать базофильную пунктацию признаком регенерации, основываясь на том, что молодые клетки эмбрионального периода имеют базофильную зернистость, и третьи (Владос)—как патологическую регенерацию.

У животных базофильная пунктация отмечается при интоксикациях, вторичных анемиях и при септических процессах. Единичные эритроциты с базофильной пунктацией встречаются иногда и у здоровых животных. Что касается появления большого количества эритроцитов с базофильной зерни­стостью в циркулирующей крови, то это, несомненно, указывает на нару­шение функции костного мозга и должно,учитываться при анализе полученных данных.

У мелких животных (кроликов, кошек, морских свинок, собак) в цирку­лирующей крови можно встретить единичные ядерные эритроциты (преимуще­ственно нормобласты). При патологических процессах, связанных с распадом крови (гемолиз), в циркулирующей крови этих животных могут появляться и более молодые формы—эритробласты и проэритробласты. У крупных живот­ных, кроме нормобластов, в циркулирующей крови выявить другие формы ядерных эритроцитов не удается.

Появление ядерных эритроцитов (нормобластов) в циркулирующей крови указывает не только на распад, но и омоложение крови. При сильных раздра­жениях в циркулирующей крови появляются недифференцированные клетки— возврат к эмбриональному кроветворению.

Замещение новыми клетками—физиологическая регенерация—происхо­дит из кроветворных органов, а не в циркулирующей крови, клетки которой не способны к регенерации.

При патологических процессах гибель и восстановление зависят от тяже­сти процесса и от функциональной мощи кроветворных органов.

Хорошо функционирующий кроветворный аппарат может компенсировать значительную потерю эритроцитов организмом. Степень регенерации крови колеблется в значительных размерах и зависит от конституциональных осо­бенностей организма, а также от условий содержания и кормления сельско­хозяйственных животных.

Нормальное кроветворение происходит в костном мозгу грудины, эпифи­зов трубчатых костей, ребер и позвоночника. Диафизы трубчатых костей состоят из жировой ткани, которая в случаях усиленной работы кроветворных органов может вытесняться активной кроветворной тканью.