Спинномозговая жидкость и ее диагностическое значение

Вопрос о происхождении спинномозговой жидкости до последнего времени не является окончательно решенным. Спинномозговая жидкость представляет собой среду, которая омывает наружную поверхность мозга и его желудочков. Возникая в желудочках и сплетениях мозга, спинномозговая жидкость (ликвор) удаляется через вены и лимфатические сосуды. Основной задачей ликвора яв­ляется доставка питательных веществ, необходимых для нормальной функции мозга и удаления отработанных веществ; кроме того, ликвор предохраняет мозг от различного рода механических повреждений. Окружая мозговое вещество, он отделяет мозг от черепной коробки и выполняет тем самым роль буфера.

Существенное значение имеет барьерная роль спинномозговой жидкости. Установлено, что вещества, поступающие в кровь, не все проходят в спинно­мозговую жидкость. В то время как алкоголь, морфий и хлороформ проходят в ликвор, иод, мышьяк, ртуть и некоторые другие вещества не проходят. Это важное в биологическом отношении избирательное свойство, предохраняющее центральную нервную систему от химических ядов, и получило название гемато-энцефалического барьера.

Вначале предполагали, что этим свойством обладают мягкие мозговые оболочки, в настоящее время полагают, что «барьер» находится на границе сосудов и мозга, а также на границе сосудов и паренхимы мягких оболочек. Анатомически «барьер», повидимому, связан с эндотелием сосудов мозга—его капилляров, обладающим в отличие от эндотелия сосудов других участков тела избирательной способностью.

В клинической медицине исследованию ликвора придается большое значе­ние. По изменениям ликвора представляется возможным делать заключение о состоянии мозга и мозговых оболочек. В ветеринарной практике до сих пор еще не изучены нормальные показатели по отдельным видам животных. В отно­шении патологии существуют разрозненные наблюдения, что не позволяет с до­статочной полнотой оценить эффективность этого метода исследования. Наибо­лее полные показатели получены для лошади и крупного рогатого скота, у ко­торых исследование ликвора производилось как в норме, так и при патологи­ческих процессах.

Рис. 73.

Пункционная игла Синева.

Метод прижизненного получения спинномозговой жидкости. У лошади спин­номозговую жидкость получают методом субокципитального или затылочного прокола и цервикальной пункцией. Как показывает довольно зна­чительный опыт автора, наиболее приемлемым методом является цервикальный, предложенный В. Г. Зайцевым. Взятие ликвора производится на стоящем животном. Для прокола используется игла Вира, игла Синева, а также инъекционная игла длиной не менее 6 см. Прокол производится между вторым и первым шейными позвонками в точке, где мысленно пересекаются линии, проведен­ные от крыльев атланта и соединяющие между собой его углы. Животное фиксируется с помощью закрутки, а у больных живот­ных, в стадии угнетения, пункция возможна и без фиксации. Под­готовка места операции состоит в выстригании шерсти и смазыва­нии кожи настойкой иода. При проколе твердой мозговой оболочки создается осязательное впечатление, такое как будто бы прокалы­вается пергаментная бумага. Это своеобразное ощущение и слу­жит критерием для прекращения дальнейшего вкалывания иглы. Мандрен после этого извлекается и ликвор вытекает каплями, а при повышенном давлении—струйкой.

Окципитальный прокол производится на поваленном животном. При надлежащей фиксации головы, по Синеву, прокол возможен на стоящей дошади при условии устранения кивания головой (при­ ведение и отведение), которое представляет большую опасность при проколе. Местом операции является «ямка», на которой лежит ремень уздечки. Ямка расположена на расстоянии 5—6 см от гребня затылка и определяется легко при давлении пальцем. Грива и шерсть перед проколом удаляются, кожа очищается спиртом и дезинфицируется настойкой иода. Острая игла с просветом, закрытым мандреном, вкалывается в ткани гребня до мембраны, прикрывающей foramen occipitalis magnum.

В зависимости от величины животного, игла погружается в глубь тканей на 4,5—6,5 см. При проколе твердой мозговой оболочки получается то же ощущение, как и при цервикальном проколе. Показателем правильного введения иглы в субокципи-тальное пространство служит выделение прозрачного ликвора. Синеву у лошади удавалось получить 50—80 мл ликвора. Окципитальный прокол Синев производит иглой собственной конструкции, изготовленной на заводе «Красногвардеец». Как при цервикальном, так и при окципиталь-ном проколе опасность представляет повреждение мозговой субстанции кончи­ком иглы с последующим кровоизлиянием и значительным разрушением мозго­вого вещества. При известной предосторожности и навыке техника прокола несложна и вполне применима в клинической практике. Люмбальная пунк­ция производится на поваленном и хорошо зафиксированном животном.

У лошадей и коров, находящихся в стоячем положении, отверстие между последним поясничным и первым крестцовым позвонком большое и прощупы­вается хорошо. В лежачем положении животного ямка выражена слабо, а по­тому пункцию проводить довольно трудно. Люмбальная пункция делается иглами длиной 15—19 см и толщиной 2—2,5 мм.

Надежным признаком попадания иглы в субарахноидальное пространство является истечение цереброспинальной жидкости редкими каплями. У здо­ровых лошадей и крупного рогатого скота за один раз можно получить от 15 до 45 мл ликвора

Исследование физических свойств ликвора. Исследование состоит из опре­деления удельного веса, цвета, прозрачности, запаха и консистенции.

Цвет и прозрачность определяются осмотром. Для этого в цилиндр или пробирку наливают некоторое количество ликвора. Цвет определяется сравне­нием с дистиллированной водой, налитой во вторую пробирку. Прозрачность определяется рассматриванием ликвора в проходящем свете. Пробирка при этом должна быть совершенно чистой и прозрачного стекла.

Ликвор здоровых животных представляет собой прозрачную бесцветную жидкость, похожую на воду. Ликвор, постоявший в помещении в течение 10— 12 часов, дает опалесценцию, а при более длительном хранении мутнеет. При­месь желчных пигментов придает ликвору желтоватый цвет. При кровоизлия­ниях в субарохноидальном пространстве ликвор становится красным или буровато-красным. При гиперемии головного или спинного мозга ликвор приобретает розовый или розовато-желтый цвет. При тяжелой форме пиро­плазмоза, нутталлиоза и лептоспироза ликвор окрашивается в желтый цвет. При гнойных менингитах и энцефалитах ликвор бывает мутным.

Ликвор здоровых животных имеет жидкую консистенцию и переливается из одного сосуда в другой, как вода. Запах его определяется органолептически. Ликвор здоровых лошадей и крупного рогатого скота запаха не имеет. Ликвор, полученный в количестве 150—250 мл и собранный в стеклянный сосуд, имеет слабо выраженный запах свежего мяса. При уремии ликвор имеет запах мочевины. Гнилостный запах отмечается при длительном хранении в помеще-мии с температурой 15—18° и при гнойном менингоэнцефалите у лошадей.

Удельный вес ликвора определяется с помощью пикнометра, весовым спо­собом при сравнении с дистиллированной водой. Удельный вес ликвора рав­няется у лошади 1,000—1,007; у крупного рогатого скота 1,006—1,008; у овцы и козы 1,004—1,008; у верблюда 1,003—1,007; у собаки 1,006—1,0069; у кро­лика 1,004—1,006; у кошки 1,005—1,007. При тяжелой форме энцефаломи-элита и гнойном менингоэнцефалите лошадей удельный вес ликвора повы­шается. То же отмечается у коров при злокачественной катаральной горячке. Удельный вес ликвора, полученного при люмбальной пункции, выше, чем при окципитальной и цервикальной.

Исследование химических свойств ликвора. При химическом исследовании определяется реакция ликвора, поверхностное натяжение, криоскопия, вяз­кость, резервная щелочность, общее количество белка, глобулинов, сахара, калия, кальция, хлоридов, оксидативные и коллоидные свойства.

Реакцию ликвора определяют колориметрическим методом. Концентрация водородных ионов рН в ликворе животных представляет собой стойкую величину и при многих заболеваниях она сохраняет относительное постоянство. У лошадей рН ликвора равняется 7,4—7,6, у крупного рогатого скота 7,4—7,6, у овец и коз 7,3—7,4, у верблюдов 7,6—7,8, у собак 7,4—7,6, у кроликов 7,4—7,5 и у кошек 7,4—7,6.

При энцефаломиэлите и паралитической миогемоглобинурии у лошадей, а также у собак, страдающих сахарным мочеизнурением, отмечается ацидоз. рН ликвора при этих заболеваниях колеблется в пределах 6,91—6,98.

Алкалоз в ликворе отмечен у собак при бешенстве и эпилепсии.

Поверхностное натяжение ликвора определяется с помощью сталагмометра. Поверхностное натяжение ликвора у лошади 1,042—1,047, у крупного рогатого скота 1,016—1,032, у овец и коз 1,009— 1,035, у верблюдов 1,014—1,028, у собак 1,012—1,021, у кроликов 1,013— 1,031. Понижение поверхностного натяжения отмечено при тяжелой форме пироплазмоза крупного рогатого скота и при заболеваниях с симптомами уремии у лошади..

Криоскопию ликвора производят для определения молеку­лярной концентрации и осмотического давления путем установления точки замерзания. Определение производится в аппарате Бекмана.

У домашних животных получены следующие показатели изотонии лик­вора: у лошади 0,54—0,56, у крупного рогатого скота 0,54—0,55, у овец и коз 0,55—0,56, у верблюдов 0,53—0,54, у собак 0,52—0,53, у кроликов 0,53—0,56.

Понижение точки замерзания ликвора отмечено у лошадей с альвеолярной эмфиземой и с отеком легких при отравлении сернистым ангидридом при газо­окуривании.

Вязкость ликвора определяют вискозиметром Детермана или Гесса при температуре + 20°.

Вязкость ликвора по отношению к дистиллированной воде равняется: у лошадей 1,017—1,029, у крупного рогатого скота 1,019—1,029, у овец и коз 1,016—1,026, у верблюдов 1,018—1,028.

Повышение вязкости ликвора отмечается при пироплазмозе, эмфиземе легких, крупозной пневмонии, плеврите и других заболеваниях. Понижение наблюдали при истощении лошадей и при родильном парезе крупного рогатого скота.

Резервная щелочность в ликворе определяется газометри­ческим методом. У клинически здоровых животных резервная щелочность (в объемных процентах С0₂) характеризуется следующими показателями: у лошади 50—57, у крупного рогатого скота 46,9—53, у овец 49—52,6, у верблюдов 51,1—59,2, у собак 42—50, у кроликов 41—48,5.

Резервная щелочность в ликворе снижается у лошадей при энцефаломи-элите и паралитической миогемоглобинемии. Повышение щелочного резерва отмечено при бешенстве и эпилепсии собак.

Химические свойства ликвора различных животных приводятся нами по данным А. И. Федотова.

Определение количества белка в ликворе производится по методу Эсбаха—Ниссля, Робертса—Стольникова и с помощью рефрактометрии.

Метод Эсбах а-Н и с с л я. Определение основано на выпадении белка в осадок при смешивании ликвора с реактивом Эсбаха (1,0 пикриновой кислоты, 2,0 лимонной кислоты, 100,0 дистиллированной воды). Определение производится в центрифужных пробирках Ниссля. Нижний конец проби-рочки оттянут в узкую слепую трубочку, разделенную черточками на 10 деле­ний емкостью 0,01 мл. Емкость всей тоненькой трубочки равняется 0,1 мл.

На расширенной части пробирки нанесены деления, обозначенные циф­рами 2 и 3. Для определения белка в пробирку набирается до метки 2 (2 мл) спинномозговой жидкости и 1 мл реактива Эсбаха (до метки 3). Жидкость тща­тельно смешивают и центрифугируют в течение 30—60 минут до постоянного уровня осадка. Каждое деление узкой слепой трубочки соответствует 0,02% белка.

Метод Робертса—С тольникова. В основе метода лежит выпадение белка под действием азотной кислоты. В качестве реактива исполь­зуется кислота удельного веса 1,15—1,20. Для разведения используется физио­логический раствор поваренной соли.

Вначале производится разведение ликвора на физиологическом растворе в отношении 1 : 5; 1 : 6; 1 : 7,5 и т. д. (схема Грахе), после чего подслаивается азотная кислота. Результат определяется через 3 минуты просмотром проб на черном фоне. Количество белка определяется по прилагаехмой таб­лице, стр. 375.

Глобулиновые реакции имеют большое практическое значение, так как дают возможность выявлять органические поражения нервной системы. Осно­ваны они на том, что под влиянием некоторых реактивов глобулины выпадают в осадок, в то время как альбумины остаются в растворе. Выпадение глобу­линов при повышенном процентном их содержании в ликворе обусловливает или появление опалесценции, или ясно выраженного помутнения.

Основной раствор 1 : 5	Физиологический раствор	Разведенипе	Содержание белка (в %) при появле­нии кольца через 3 минуты
0,5	-	1:5	1/6
0,45	0,09	1:6	1/5
0,4	0,2	1:7,5	1/4
0,3	0,3	1:10	1/3
0,2	0,4	1:15	1/2
0,1	0,4	1:25	5/6
0,1	0,6	1:35	1 1/16
0,1	0,7	1:40	1 1/3
0,1	0,8	1:45	1,5
0,1	0,9	1:50	12/з
0,1	1,1	1:60	2
0,1	1,3	1:70	21/з
0,1	1,4	1:75	2 1/2
0,1	1,5	1:80	22/з
0,1	1,7	1:90	3

Все глобулиновые реакции с ликвором здоровых животных дают отрица­тельные показатели. Лишь реакция с сернокислым аммонием у здоровых лошадей дает слабую опалесценцию. Поэтому реакция с сернокислым аммонием при исследовании лошадей не используется, но она с успехом может быть применена при исследовании ликвора крупного рогатого скота и особенно собак.

Реакция Нонн е-А пельта. К 1 мл свежевзятого ликвора добавляют равный объем насыщенного раствора сернокислого аммония (Ammonii sulfurici pur 85,0, Aq. destillati 100 мл), хорошо смешивают и остав­ляют-пробирку на 4—5 минут, после чего отмечают результаты реакции по следующей шкале.

Сильное помутнение Среднее помутнение

.... ++++

Среднее помутнение +++

Ясная опалесценция ++

Слабая опалесценция +

Прозрачность —

Реакция Панд и. В качестве реактива используется 10 г кристал­лической карболовой кислоты, разведенной в 100 мл воды. Реактив после хо­рошего смешивания оставляют на 10 часов в термостате при температуре 38°, после чего сохраняют 3 дня при комнатной температуре. В качестве реактива используется отстоявшаяся прозрачная жидкость.

Реакция производится в часовом стекле, помещенном над отверстием в черном ящике, освещенном изнутри электрической лампочкой. В часовое стекло набирается 1 мл карболовой жидкости, затем из пипетки по краю стекла осторожно опускают капли ликвора. Реакция учитывается по интен­сивности образования молочно-белого облачка, переходящего в муть.

Реакция Вейхбродта. В качестве реактива используется раствор сулемы 1 : 1 000. В уленгутовскую пробирку набирают 0,7 мл ликвора и добавляют 0,3 мл сулемового раствора. При наличии глобулинов получается помутнение различной степени выраженности в зависимости от процентного их содержания. При оценке реакции пользуются той же шкалой, что и при оценке реакции Нонне-Апельта.

Глобулиновые реакции зависят от общего количества белков и главным образом от глобулинов. Отношение количества глобулинов к количеству аль­буминов носит название белкового коэффициента.

Для определения белкового коэффициента берут две градуированные про­бирки и наливают в них по 0,6 мл ликвора. В одну пробирку добавляют 0,3 мл реактива следующего состава: 1 г пикриновой кислоты, 2 г лимонной кислоты в 100 мл воды; в другую пробирку добавляют 0,6 мл насыщенного раствора сернокислого аммония. После центрифугирования в течение 30 минут опреде­ляется число делений, занимаемых осадком.

В первой пробирке в осадок выпадают глобулины и альбумины, следо­вательно, «первое число» указывает общее количество белков. Во второй про­бирке в осадок выпадают глобулины—«второе число». В результате вычитания из «первого числа» получают количество альбуминов.

У клинически здоровых лошадей белковый коэффициент ликвора равен 0,52—0,72, у крупного рогатого скота 0,50—0,69. При депрессивной форме энцефаломиэлита лошадей белковый коэффициент равняется 0,43—0,48, при буйной форме—0,70—0,84. При родильном парезе и столбняке белковый коэф­фициент находится в пределах нормы.

Оксидазные реакции. В основе этих реакций лежит окисление ликвора и изменение цвета реактива.

Реакция Бенедикта-Т у р з о. В качестве реактива исполь­зуется 1%-ный раствор щавелевой кислоты и 1%-ный раствор марганцевокис­лого калия. Первый и второй реактивы изготовляются на дважды перегнанной дистиллированной воде. Реакция очень чувствительна.

К 0,5 мл исследуемого ликвора подливают 2 мл 1 %-ного раствора щавеле­вой кислоты и после взбалтывания добавляют одну каплю 1 %-ного раствора марганцевокислого калия. Смесь тщательно взбалтывают. Для контроля берется вторая пробирка с дистиллированной водой, смешанной с теми же реактивами. Количество дистиллированной воды и реактивов такое же, как в первой пробирке ликвора и реактивов. Наблюдение за изменением цвета жидкости ведется в течение 8 минут.

У здоровых животных ликвор после обработки реактивами окрашивается в нежнокрасно-фиолетовый цвет. Такая же окраска получается й в конт­рольной пробирке. При менингитах ликвор окрашивается в коричнево-желтый, красно-желтый и желтый цвет.

Реакция Фридмана является видоизменением пробы Бене­дикта. В качестве реактивов используется 1%-ный раствор марганцевокислого калия и 20%-ный раствор трихлоруксусной кислоты. Для приготовления реактивов используется дважды перегнанная дистиллированная вода.

К 1 мл ликвора прибавляют каплю 1 %-ного раствора марганцевокислого калия и 1—2 капли 20%-ного раствора трихлоруксусной кислоты. Ликвор здоровых животных в течение длительного времени сохраняет яркофиолето-вую окраску.

При негнойных менингитах ликвор окрашивается в красновато-желтый, а при гнойных—в светложелтый цвет.

Из других химических свойств ликвора, при некоторых патологических процессах, имеет значение определение сахара, калия, кальция, хлоридов и коллоидных свойств.

Микроскопия осадка. Для врачебной практики большой интерес представ­ляет цитологическое исследование осадка ликвора.

Количественное определение форменных элементов ликвора можно про­водить по методу Розенталя, пользуясь для этого специальной камерой; можно также с успехом использовать счетные камеры с сеткой Горяева или Пред-теченского. Для большей точности подсчет производится дважды, а затем находят среднее арифметическое.

Для подсчета форменных элементов в камере их необходимо окрасить смесью следующего состава: Methyl-violet 0,1 Ac. acetici 2,0, Aq. destillati 5,0.

В лейкоцитарный смеситель до метки 1 набирают красящую смесь, а до метки 11—свежевзятый ликвор. После тщательного перемешивания и выдер­живания в течение 10—12 минут, для лучшего прокрашивания форменных элементов, каплю ликвора наносят на сетку камеры, удалив предварительно первые 2—3 капли. После подсчета форменных элементов в камере число их определяют в 1 мм³ по формуле:

найденное количество X разведение

объем камеры

Для качественного определения форменных элементов ликвор предва­рительно центрифугируют в течение 30 минут и из осадка делают «толстую» каплю, которую высушивают на воздухе и фиксируют 15 минут в спирт-эфире. Зафиксированный препарат окрашивается раствором метиленовой синьки.

Под микроскопом просматривается 5—6 полей зрения и вычисляется, среднее количество. По Федотову, количество форменных элементов в одном поле зрения: у здоровых лошадей 0—1, у крупного рогатого скота 0—2, у овец и коз 1—2, у собак 0—1, у кроликов 1—2.

У лошадей при буйной форме энцефаломиэлита количество форменных элементов достигает 50—80, а иногда и больше. От 25 до 60 клеток отмечено при тепловом и солнечном ударе, злокачественной катаральной горячке круп­ного рогатого скота и эпилепсии собак.

Незначительное увеличение (12—17 клеток) наблюдается у собак при чуме и у крупного рогатого скота в период залеживания перед родами. Незна­чительное увеличение возможно также при повторных цистернальных пунк­циях. При бешенстве и столбняке количество форменных элементов нахо­дится в пределах нормы.

У здоровых животных в осадке ликвора встречаются средние и малые лимфоциты. При воспалительных процессах мозга и мозговых оболочек, а также тепловом и солнечном ударе, кроме лимфоцитов, обнаруживаются нейтрофильные клетки.