Химическое исследование мочи

Реакция мочи. Реакция крови и тканей животного организма регулируется почками, которые выделяют из крови избыточное количество кислых и щелоч­ных продуктов обмена. Реакция мочи не является такой постоянной, как реакция крови, и меняется в широких пределах в зависимости от ряда факто­ров. При окислении органических веществ образуются кислоты: серная, фос­форная и органические—мочевая, гиппуровая и щавелевая.

У травоядных моча чаще бывает щелочной, реже нейтральной реакции, у плотоядных она обычно кислая, у свиней то кислая, то, наоборот, щелочная. При кормлении концентрированными кормами, а также при голодании моча становится кислой, а у плотоядных при кормлении с общего стола пищей, богатой углеводами, моча становится нейтральной и даже щелочной.

Кислотность мочи может быть различной по характеру. Различают потенциальную, или титруемую, и истинную, или активную, кислотность мочи.

Потенциальная кислотность зависит от общего содержания кислот в моче независимо от степени их диссоциации, т. е. способности отдавать в раствор водородные ионы. При титровании щелочью свободные водородные ионы связы­ваются, а кислота освобождает в раствор новые водородные ионы и так до тех пор, пока все водородные ионы кислоты не будут связаны щелочью. На титро­вание слабо- и сильнодиссоциированных кислот уходит одинаковое количе­ство щелочи.

Истинная, или активная, кислотность мочи зависит от концентрации водо­родных ионов и стоит в связи со степенью диссоциации кислот, находящихся в моче. Диссоциация кислот в моче зависит от соотношения между концентра­циями слабых кислот и их солей. Такими кислотами являются первичный фосфор (NaH₂P0₄), уксусная, молочная, мочевая, щавелевая и другие кислоты. Смеси слабых кислот с их солями называют буферами вследствие их способ­ности поддерживать концентрацию водородных ионов на определенном, неиз­менном уровне. Концентрация водородных ионов обозначается водородными показателями рН. У крупного рогатого скота рН мочи равен 8,7, у лошади— около 7,8 и у плотоядных колеблется от 5 до 7.

Определение титруемой кислотности производится по способу Фолина. В основе метода лежит титрование мочи с целью установления количества находящегося в моче водорода, замещаемого металлами. К 25 мл испытуе­мой мочи прибавляют 1—2 капли 1%-ного раствора фенолфталеина и 15— 20,0 г щавелевокислого калия в порошке, тщательно взбалтывают и титруют N/10 едким натром до слабого синевато-красного окрашивания. Кислотность, определяемую титрованием, перечисляют на соляную кислоту и высчитывают по суточному количеству мочи.

Истинная, или активная, кислотность определяется по колориметриче­скому методу Зоренсена.

Реакция мочи клинически определяется лакмусовыми бумажками. Если реакция мочи кислая, то синяя бумажка краснеет, а красная не изменяет цвета. Если же реакция мочи щелочная, то, наоборот, красная синеет, а синяя не изме­няет цвета. При нейтральной реакции мочи как красная, так и синяя бумажка цвета не меняет. При амфотерной реакции мочи обе бумажки слегка изме­няют свой цвет.

Кислая реакция мочи у травоядных встречается при голодании и лихо­радочных заболеваниях. Чаще кислая моча обнаруживается при катарах тон­кого отдела кишечника.

Амфотерная реакция мочи у лошади имеет такое же диагностическое зна­чение, как и кислая реакция, так как образует переход от щелочной к кислой. В ней находится в растворе в определенном соотношении кисло- и щелочно-реагирующие фосфаты.

У рогатого скота, наоборот, амфотерная реакция встречается часто.

Моча кислой реакции имеет и измененные физические свойства. Такая моча становится прозрачной, водянистой, слабо окрашенной, а у лошади теряет слизистые свойства и не имеет почти осадков.

У животных, имеющих нормально кислую мочу, высокая щелочность должна рассматриваться как патологическая. Щелочная реакция мочи появляется нередко вследствие аммиачного брожения мочевины с образованием мочекислого аммония. Выпадение при этом фосфатов делает мочу мутной, опалесцирующей и издающей аммиачный запах. При отстаивании такая моча покрывается тонкой пленкой, состоящей из углекальциевой соли.

Исследование мочи на белок. Исследование мочи на белок имеет важное значение в диагностическом отношении. Белковые вещества в моче показывают на патологический процесс.

Небольшое количество белка может быть обнаружено сложными мето­дами и у здоровых животных. Эти ничтожные следы белка не принимаются во внимание и мочу здоровых животных клинически принято считать свобод­ной от белка.

При патологических состояниях почечный фильтр теряет способность задерживать белки крови и они начинают поступать в большом количестве в мочу. В зависимости от факторов, которые обусловливают появление белка в моче, различают альбуминурию—физиологическую и патологическую.

К физиологическим альбуминуриям принято относить: алиментарную альбуминурию, альбуминурию новорожденных и альбуминурию рожениц. Количество белка при физиологических альбуминуриях бывает незначитель­ным, состояние это является переходящим и, кроме того, в моче обычно не обнаруживается других компонентов, свидетельствующих о поражении почек, а также нет и соответствующих клинических проявлений. При анализе альбуминурии, помимо количественного определения белка и микроскопии осадка, необходимо тщательное исследование животного и особенно самой почки, а также и органов, функционально с ней связанных.

Патологическая альбуминурия наблюдается при многих заболеваниях и служит не критерием болезни, а одним из признаков заболевания, часто не определяющим сущности страдания.

Истинная, или реальная, альбуминурия встречается при острых воспали­тельных и дегенеративных заболеваниях почек. Количество белка, посту­пающего в мочу, зависит от степени поражения и распространенности. При диффузных поражениях, охватывающих равномерно почечную паренхиму, обычно отмечается большое количество белка в моче, в то время как односто­роннее поражение или очаговое заболевание почек протекает с незначитель­ной альбуминурией. При нефрозах количество белка достигает высокой сте-

пени, в то время как хроническое заболевание почек протекает с незначитель­ной альбуминурией, а в ряде случаев белок в моче не отмечается совсем.

Застойная гиперемия почек, возникающая на почве некомпенсированного порока сердца, сопровождается умеренной альбуминурией.

Из патологических процессов, не связанных непосредственно с почками, можно назвать заболевание крови паразитарного характера, лейкемии, пер­вичные и вторичные анемии, тяжелые заболевания кишечника, такие, как энтерит, микозы кишечника, паратуберкулез крупного рогатого скота, тяже­лые инфекционные и лихорадочные заболевания, при которых имеет место понижение кровяного давления и дегенерация почечного эпителия.

Скопление углекислоты в крови может при тяжелых страданиях легких служить причиной появления альбуминурии, которая является быстро-проходящей.

Кроме истинной альбуминурии, необходимо учитывать альбуминурию ложную или случайную, которая является следствием примеси белка в ниж­них мочевых путях—мочевом пузыре или уретре.

Для исследования мочи на белок необходимо, чтобы она была свободной от различных примесей (истечение из влагалища, фекалий и т. д.) и прозрач­ной.

Просветление мочи достигается различными способами—отстаиванием, фильтрованием и центрифугированием. Наиболее быстро просветление мочи достигается центрифугированием, после чего моча становится обычно совер­шенно прозрачной и только в отдельных случаях слегка опалесцирует. При незначительном помутнении мочи достаточно бывает отстаивания в течение одного часа.

Сильно мутную мочу можно просветлить фильтрованием через бумажный фильтр. При аммиачном брожении мутную мочу взбалтывают с животным углем, инфузорной землей или углекислым барием. При малых альбумину­риях этот метод непригоден, так как часть белка адсорбируется. Шпет в этих случаях рекомендует для объективной оценки полученных результатов срав­нивать испытуемую мочу с нативной, не подвергавшейся обработке.

Для просветления мутной и слизистой мочи лошади очень удобен метод Кулакова. Моча наливается в узкий стеклянный цилиндр, закрывается ват­ной пробкой, которая стеклянной палочкой или специальными щипцами про­давливается через слой мочи до дна цилиндра. Над пробкой после этого про-давливания появляется совершенно прозрачная моча, пригодная для химиче­ского исследования на белок.

Качественное исследование на белок. В ветери­нарной практике нашли широкое применение следующие пробы.

Проба кипячением. В пробирку набирается 5—10 мл испытуемой мочи. Щелочная моча подкисляется несколькими каплями 10%-ной азотной или уксусной кислоты до нейтральной или слабокислой реакции и на пламени горелки нагревается до кипения.

Помутнение жидкости или выпадение хлопчатого осадка указывает на присутствие белка. При отрицательном результате можно добавить к горячей моче равный объем насыщенного раствора поваренной соли. Моментально^ помутнение всей жидкости свидетельствует о наличии в моче белка. В комбинат ции с реакцией на высаливание проба с кипячением является достаточно чувствительной и довольно простой.

Проба Геллера. В пробирку наливают прозрачную испытуемую мочу. С помощью пипетки под мочу подслаивается концентрированная азот­ная кислота. Синев рекомендует мочу наслаивать на кислоту. В присутствии белка на границе двух жидкостей получается белое рыхлое кольцо различной толщины в зависимости от количества белка, находящегося в моче. При незначительных альбуминуриях кольцо возникает спустя 2—3 минуты после подслаивания или наслаивания жидкостей. Проба с азотной кислотой дает поло­жительный результат при наличии в моче 0,033% белка.

Проба концентрированной азотной кислотой дает положительный резуль­тат не только с сывороточными белками, но и с альбумозой, бальзамическими веществами и нуклеоальбуминами. В присутствии мочекислых солей и крася­щих веществ в моче на границе двух жидкостей получаются цветные кольца. Осадок из альбумоз исчезает при нагревании и вновь появляется при охлажде­нии испытуемой порции мочи, а нуклеоальбумин растворяется в избытке азот­ной кислоты. Муть с бальзамических и смолистых веществ растворяется после прибавления двойного объема спирта или больших количеств эфира.

Проба Бедекера. Мочу предварительно необходимо разбавить водой в равных количествах, чтобы исключить возможность осаждения моче­кислых солей. Затем к 5 мл мочи добавляют по каплям 10%-ный раствор уксусной кислоты до совершенно ясной кислой реакции. Если после этого появляется муть, то мочу необходимо профильтровать, чтобы избавиться от нуклеоальбумина, муцина или уратов. Затем в мочу добавляют 3—4 капли 10%-ного раствора железосинеродистого калия (избыток реактива растворяет белок). В зависимости от количества белка появляется опалесценция, муть или хлопчатый осадок. Эта проба выявляет сывороточный белок и альбумозу. Последняя растворяется при кипячении и вновь появляется после охлаж­дения.

Эта проба может быть видоизменена следующим образом. Непосредственно перед исследованием смешивают в равных объемах 10%-ный раствор уксусной кислоты и 10%-ный раствор железосинеродистого калия и на эту смесь наслаи­вается прозрачная разбавленная пополам моча. Положительная реакция харак­теризуется появлением белого хлопчатого осадка на границе двух жидкостей. Проба с железосинеродистым калием обнаруживает белок в количестве 0,002% (моча не должна содержать цинка).

Проба Танрета. Реактив состоит из 1,35 сулемы, 3,32 йодистого калия, 20,0 уксусной кислоты и 60,0 дистиллированной воды. Реактив добав­ляют к профильтрованной моче по каплям. Положительная реакция характе­ризуется появлением мути или белого хлопчатого осадка. Пробой с сулемой выявляется сывороточный белок и альбумоза. Если при нагревании мочи осадок исчезает, а после охлаждения появляется вновь, то это говорит о нали­чии в моче альбумозы. Проба с сулемой особенно пригодна для обнаружения в моче альбумозы.

Проба Роча и Вильяма. В качестве реактива используется 20%-ный раствор сульфосалициловой кислоты (по нашим наблюдениям, вполне пригоден для использования и 10%-ный раствор). В профильтрован­ную мочу реактив добавляют по каплям. При наличии сывороточного белка получается муть или выпадает белый хлопчатый осадок. Эта проба обладает большой чувствительностью, давая положительную реакцию при разведении белка в моче 1 : 50 000.

Рухлядев эту пробу особенно рекомендует для исследования мочи лошади. Ют реактива растворяются углекислые соли, находящиеся в большом коли­честве в моче лошади, моча просветляется, избавляя тем самым от предвари­тельного фильтрования или отстаивания в спешных случаях.

Количественное определение белка. Приблизительное определение коли­чества белка в моче возможно при известном навыке по интенсивности полу­чаемой реакции. Более точные результаты получаются при проведении коли­чественных проб. Аналитический способ по весу хлопотлив для клинической практики и требует большой осмотрительности.

Наиболее простым и широко распространенным способом количественного определения белка является метод Эсбаха и скоростной метод Ауфрехта.

Метод Эсбаха. Для определения количества белка по этому методу необходимо иметь специальный альбуминометр, предложенный авто­ром, который представляет собой толстостенную, градуированную, с закруг­лен ым или коническим дном пробирку на ножке или в специальной подставке. Кроме альбуминометра, необходимо иметь также реактив Эсбаха следующего состава: 1,0 пикриновой кислоты, 2,0 лимонной кислоты и 100,0 дистиллиро­ванной воды.

Моча высокого удельного веса разбавляется пополам дистиллированной водой, моча щелочная подкисляется раствором виннокаменной кислоты.

Рис. 60. Альбуми­нометр.

Испытуемая моча наливается до метки—И (метка И—моча) и затем до метки Р наливается реактив. Альбуминометр затем закрывается резиновой пробкой и осторожно, чтобы не вспенивать мочу, поворачивается несколько раз (2—3 минуты). В присутствии белка получается или помутнение или взвешенный в жидкости рыхлый белый осадок. После этого альбуминометр оставляют стоять при комнатной температуре на 24 часа, после чего количество белка определяется по шкале, нанесенной на стенке альбу­минометра.

Каждое деление нижнего конца альбуминометр а соот­ветствует разведению белка 1 : 1 000. Если проба ставилась с мочой, разведенной водой, то показания альбуминометра следует умножить на степень разведения.

Следует учесть, что при лечении хинином, антипири­ном и бальзамическими веществами может выпадать осадок и при отсутствии в моче белка.

Метод Ауфрехта является ускоренным ме­тодом определения количества белка в моче. Для постанов­ки пробы необходимо иметь альбуминометр Ауфрехта, пред­ставляющий собой градуированную центрифужную про­бирку, центрифугу и реактив следующего состава: 1,5 пикриновой кислоты, 3,0 лимонной кислоты и 100,0 дистил­лированной воды.

В альбуминометр наливают 4 мл кислореагирующей или подкисленной мочи и 3 мл реактива. Пробирка закры­вается резиновой пробкой и медленно несколько раз переворачивается. Центрифугирование производится в тече­ние 2—3 минут, после чего определяется количество выпав­шего осадка. Разведения мочи водой при этом методе не требуется.

В практическом отношении очень удобной является следующая количественная проба: в градуированную цент­рифужную пробирку наливают 10 мл профильтрованной и подкисленной мочи и затем последовательно добавляют

1 мл уксусной кислоты, 1 мл воды и 3 мл 10%-ного

раствора желтой кровяной соли. После 3-минутного центрифугирования при

2 000 оборот определяется процент содержания белка из расчета 0,5% белка на каждые 0,25 мл осадка.

Из других методов определение количества белка в моче заслуживает внимания метод Робертса—Стольникова.

Метод Робертса — Стольников а. Метод количественного определения белка по Стольникову основан на наблюдении над предельной чувствительностью пробы с концентрированной азотной кислотой, по которой ровно через 3 минуты после наслаивания мочи на реактив появляется белое кольцо. Количество белка, при котором появляется положительная реакция, равняется 0,033%. Задача заключается в том, чтобы приготовить такое разве­дение мочи, которое дало бы положительную реакцию ровно через 3 минуты после наслаивания. В этом разведении количество белка и будет равно 0,033%.

Техника определения. В один ряд пробирок набирают по 2 мл крепкой азотной кислоты, а в другой по 2 мл мочи, разведенной в 10 раз (1 мл мочи на 9 мл воды). Затем делается новое разведение мочи добавлением дистиллиро­ванной мочи в количествах, указанных в таблице. После этого разбавленная моча наслаивается на кислоту и по часам учитывается разведение, которое дает положительную реакцию ровно через 3 минуты. По прилагаемой таблице нетрудно найти содержание белка в неразбавленной моче.

Количество воды, добав­ленное к 2 мл мочи	1	4 4	7 7	110	113	116	119	222	25	28	331	334			337		440
Содержание белка (в %)	0,05	00,1	00,15	00,2	00,25	00,3	00,35	00,4	0,45	0,5	00,55		00,6	00,65		00,7

Содержание белка в процентах можно определить и по формуле: К+Х/30+К,

в которой К равно количеству взятой для исследования мочи, разбавленной 1 : 10 дистиллированной водой, и X—количество прилитой воды до начала выявления реакции Геллера.

Контрольные опыты показали, что ошибка в сравнении с другими приемами бывает незначительной: она не превышает 0,206% в ту или другую сторону.

Альбумозурия. Появление в моче альбумозы называется альбумозурией. Альбумозами называются продукты ферментативного расщепления белковых веществ в кишечнике или в тканях при скрытых процессах нагноения или некроза, нередко наблюдаемых при атипически протекающем мыте у лошадей, гнойной пневмонии, гнойном плеврите и перитоните, гнойных воспалениях суставов и лейкемии.

Пиогенная альбумозурия встречается, следовательно, при обильном рас­паде лейкоцитов в гнойных очагах под влиянием пептонизирующего действия гноеродных микробов. Кроме пиогенной альбумозурии, встречается гематоген­ная или эндогенная альбумозурия. В основе развития эндогенной альбумозу­рии лежат расстройства обмена веществ при отравлении, например фосфором, а также при острой атрофии печени.

Часть альбумозы не усваивается и, попадая в общий круг кровообраще­ния, выделяется почками в неизмененном виде. Незначительная примесь альбумоз обнаруживается сравнительно часто, но этим примесям не придают серьезного значения (альбумоза отщепляется от органического белка под дей­ствием пепсина мочи или во время освобождения мочи от белка), и только когда примесь альбумоз становится значительной и появляется она в моче свободной от сывороточного белка, тогда присутствие альбумоз связывают с процессами, протекающими в тканях и органах. Появление их в моче—показатель того, что имеется нарушение всасывания и усвоения организмом альбумозы. Опре­деление ее основано на том, что она не свертывается и не осаждается из ней­тральных и кислых растворов при нагревании.

Муть, появляющаяся после добавления сулемы и сульфосалициловой кис­лоты и исчезающая при нагревании, указывает на присутствие альбумозы. Охлаждение такой мочи обусловливает появление мути или осадка.

Проба Пиотровского является более точной при определении альбумозы в моче. Мэча должна быть свободной от белка.

К 5 мл мочи прибавляется 10 капель 10%-ного раствора едкой щелочи и после взбалтывания осторожно при помощи пипетки наслаивается 2 мл рас­твора едкого купороса в разведении 1 : 1 000. Положительной реакцией счи­тается появление красно-фиолетового кольца по линии соприкосновения слоев.

Определение муцина и муциноподобных веществ. У лошадей и крупного рогатого скота муцин встречается в моче и у здоровых животных, причем у лошади муцина бывает очень много. У других животных муцин в моче обна­руживается только при патологических состояниях. Чрезмерное количество муцина указывает, как правило, на раздражение мочевых путей воспалитель­ного характера. При исследовании необходимо исключить слизь из женских половых органов. Моча, содержащая муцин, отличается от нормальной и по

своим физическим свойствам. Она тянется нитями или кажется слизистой. При стоянии такой мочи образуется слизистый осадок.

Для определения муцина и муциноподобных веществ берут две про­бирки. В одну из них наливают уксусную кислоту, а в другую—такое же коли­чество соляной кислоты. Затем в обе пробирки добавляют одинаковое коли­чество фильтрованной мочи. При наличии в моче муцина и муциноподобных веществ в первой пробирке (моча + уксусная кислота) образуется муть, в то время как во второй пробирке (моча +соляная кислота) муть отсутствует и жидкость становится прозрачной.

Для обнаружения истинного муцина Марек рекомендует к разведенной в 3 раза моче прибавлять уксусную кислоту, осадок на фильтре промыть горя­чим алкоголем, растворить в водном растворе щелочи и кипятить с избытком разведенной соляной кислоты. Если после прибавки к раствору едкого натра до щелочной реакции и затем после добавления раствора сернокислой меди наступает реакция, то значит, что имеется настоящий муцин. Раствор, необра­ботанный щелочью и раствором сернокислой меди, не должен давать осадка с сернокислым барием.

Определение крови и кровяных пигментов. Кровяные пигменты могут быть в моче в связанном виде с эритроцитами и могут появляться в растворенном виде. В первом случае говорят о гематурии, т. е. появление крови в моче, а во втором—о гемоглобинурии, выделение кровяных пигментов. К гемоглоби-нурии принято относить только те случаи, когда одновременно имеется и гемо-глобинемия, когда, следовательно, почки выделяют гемоглобин эритроцитов, разрушенных в кровяном токе. Выщелачивание гемоглобина из эритроцитов мочой после вступления их в мочевые пути из почечных канальцев называть гемоглобинурией не следует.

Различают гематурию почечную и вторичную, возникающую в мочевых путях. Почечная гематурия характеризуется появлением в моче эритроцитов вследствие нарушения цельности сосудистой стенки. Большая часть эритро­цитов сохраняет свою форму, строение и окраску и легко обнаруживается при микроскопии осадка. Меньшая часть эритроцитов разрушается, придавая красноватую окраску моче.

Количество эритроцитов, поступающих в мочу, может быть различным, в зависимости от степени поражения сосудистой стенки. В одних случаях в моче обнаруживаются единичные эритроциты, в других, напротив, их бывает так много, что кровоизлияние угрожает жизни животного.

Причиной почечных кровотечений могут быть различные заболевания из группы геморрагического диатеза—кровепятнистая болезнь лошадей, сибирская язва, чума, паратиф телят и др. Причиной кровотечения может быть нефрит и геморрагический инфаркт почек вследствие тромбоза почечной артерии. В последнем случае лошади, например, могут истекать кровью в тече­ние 3—5 дней. Затем причиной почечной гематурии могут быть травматические повреждения почек или почечных лоханок инородными телами (камни) и живот­ными паразитами. Наконец, причиной почечной гематурии может быть раз­рыв сосудов и распад стенок на почве злокачественных опухолей. При почеч­ных гематуриях в моче можно обнаружить эритроциты, кровяные цилиндры и эпителиальные клетки почек. При обильных кровотечениях в моче можно встретить слепки мочеточников, достигающие толщины пальца взрослого чело­века.

Вторичная гематурия отмечается при различных заболеваниях мочевых путей и мочевого пузыря. Кровоизлияния в мочевом пузыре бывают незначи­тельными и кровь при них обнаруживается только в последних порциях мочи. В основе гематурии лежит цистит, травмирование камнями и паразитами и повреждение сосудов распадающимися опухолями. При уретральных крово­излияниях моча выделяется каплями через наружное отверстие уретры, и при мочеиспускании только первые порции мочи содержат эритроциты. Особое место занимает гематурия крупного рогатого скота в некоторых местностях,

которая держится несколько недель и даже лет. Кровотечение бывает обильным, и возникающие в мочевом пузыре сгустки крови закупоривают нередко мочеиспускательный канал, что может привести к разрыву мочевого пузыря.

На слизистой оболочке мочевого пузыря у этих животных можно обнару­жить варикозные неровности, опухолевидные разрастания, которые обнаружи­ваются цистоскопией и ректальным исследованием.

Гемоглобинурия. В отличие от гематурии в моче обнаруживаются не фор­менные элементы крови, а кровяные пигменты распавшихся эритроцитов или мышечной ткани. Разрушение эритроцитов в кровяном ложе связывается с раз­личного рода интоксикациями. По происхождению гемоглобинурия подраз­деляется на симптоматическую, токсическую и параксизмальную.

Симптоматическая гемоглобинурия является, как показывает название, симптомом таких заболеваний, как ревматическая и энзоотическая гемогло­бинурия лошадей, пироплазмоз и трипанозомоз. Реже гемоглобинурия отмечается при плевропневмонии и гангрене легких, септицемии и ин­флюэнце.

Токсическая гемоглобинурия вызывается фармакологическими и био­логическими ядами, обладающими гемолитическими свойствами. К первым относятся, например, отравление бертолетовой солью, фенолами и их произ­водными, мышьяковистым водородом и т. д. Сильнейшими ядами второй группы являются: яд кобры, грибной яд сморчка и сыворотка крови другого вида животных, введенная в вену, или другим каким-либо способом.

Параксизмальная гемоглобинурия характеризуется появлением кровяных пигментов приступами. В основе пароксизмальной гемоглобинурии лежит или длительная инфекция (инфекционная анемия лошадей, злокачественный мыт и грипп), а у молочных коров возникновение гемоглобинурии отмечается после поения ледяной водой.

Для исследования на кровяные пигменты необходимо брать нефильтро­ванную мочу. Среди многочисленных способов химического определения кровя­ных пигментов наиболее приемлемыми являются следующие:

Проба с едким натром или кали (Геллера). В каче­стве реактива используется 10%-ный водный раствор едкого кали или натра. К 5 мл испытуемой мочи добавляют ¹/₃ по объему едкой щелочи, после чего содержимое взбалтывают и кипятят. При кипячении выпадают фосфорно­кислые соли кальция и магния, которые и увлекают в осадок кровяные пиг­менты. Положительной реакцией считается появление на дне пробирки краси­вого красного осадка, дающего зеленоватый оттенок на проходящем свете. Реакция получается при наличии^/значительного количества крови. У лошадей эта реакция малочувствительна, потому что в моче лошади имеется незначи­тельное количество фосфатов. У других животных этой реакцией можно поль­зоваться с успехом.

Проба Van-Deen'a. В узенькой пробирке смешивают по 20 капель свежеприготовленного спиртового раствора гваяковой смолы (0,25 : 50) и старого озонированного скипидара или 3% перекиси водорода и, слегка взболтав, наслаивают эту смесь на испытуемую мочу. По линии соприкосновения жидкостей моментально получается белое смолистое кольцо, которое в присутствии крови становится темносиним.

Проба Тевенон — Роланда.В качестве реактива используется 3%-ный раствор перекиси водорода и реактив № 2 следующего состава: Sol. Pyramidoni in alcogol 5%; Sol. ас. acetici glaciali 50% аа 50,0.

В пробирку наливают по 1 мл мочи и реактива и после этого прибавляют по 3—4 капли перекиси водорода. В присутствии кровяных пигментов полу­чается нестойкое фиолетовое окрашивание. При исследовании мочи лошади лучше к реактиву добавлять мочу.

Проба Адлер — Цитрона. В качестве реактива используются перекись водорода (3%) и насыщенный раствор бензидина в ледяной уксусной кислоте Sol. Benzidini in ас. acetici glaciali.

К 3 мл перекиси водорода добавляют 10—15 капель насыщенного раствора бензидина в уксусной кислоте до молочной опалесценции и затем—испытуемая моча по каплям. Положительная реакция на кровяные пигменты характери­зуется появлением зеленого окрашивания или зеленого кольца на линии сопри­косновения жидкостей.

Проба Колло. Для выполнения этой пробы необходимо иметь: 1—щелочный раствор фенолфталеина (фенолфталеина 2,0, едкого кали 20,0, дистиллированной воды 100 мл). Окрашенный раствор кипятят и при непрерыв­ном кипячении добавляют 10,0 металлического цинка в порошке. Кипячение раствора продолжается до полного обесцвечивания. После этого раствор филь­труется и сохраняется в склянке (капельнице из оранжевого стекла), 2—2%-ный раствор ледяной уксусной кислоты, в 95° очищенном спирте и 3—30%-ный раствор перекиси водорода.

При исследовании моча и уксуснокислый спирт берутся в равных коли­чествах, примерно по 2—3 мл, затем в пробирку добавляют 25—30 капель щелочного раствора фенолфталеина и затем 1—3 капли перекиси водорода. В присутствии кровяных пигментов получается красивое малиновое окра­шивание.

По данным Домрачева, наиболее чувствительной на кровяные пигменты в моче лошади является проба с фенолфталеином. Чувствительность ее 1 : 40 000. Очень чувствительной является также проба с пирамидоном. Гораздо менее надежной у травоядных считается проба с едкой щелочью, и только с кислой мочой у плотоядных она дает хорошие результаты.

Точная дифференциация кровяных пигментов в моче может быть осуще­ствлена с помощью спектроскопа. Оксигемоглобин при спектроскопии дает две полосы поглощения в желтой и зеленой части спектра. Гемоглобин образует одну широкую полосу поглощения между желтым и зеленым цветами спектра. Метгемоглобин дает три полосы поглощения в красной, желтой и зеленой частях спектра. Иногда в моче встречается смесь всех трех модификаций гемо­глобина, а, кроме того, еще и гематопорфирина (дериват гемоглобина, не содер­жащий железа).

Для обнаружения гематопорфирина, по Сальковскому, подкисленную мочу осаждают щелочным раствором хлористого бария (смесь равных частей насы­щенной на холоду гидроокиси бария и 10% хлористого бария). Осадок про­мывается водой, затем абсолютным спиртом, подкисленным 6—8 каплями соляной кислоты. Красно-фиолетовый раствор кислого гематопорфирина дает две полосы поглощения, а после насыщения аммиаком—четыре полосы щелоч­ного гематопорфирина.