98. (X).Генная инженерия: технология рекомбинантных днк. Методы выделения, синтеза и

клонирования генов. Клеточная инженерия.

ГИ-наука,предназн.для направл.измен-я генотипа и фенотипа орг.Это способ введения в орг полож качеств и устранение отрицат,путем монипуляции генов.ГИ.-совокупность экспериментальн процедур,позвол осущ перенос ген материала из 1-го орг в др-технология рекомбинантн ДНК. Этапы:1)Из орг(донора нужных генов)экстрагируют нативную ДНК(донорская ДНК,клонируемая ДНК,встраив-я ДНК,ДНК-мишень,чужеродная ДНК).ДНК подвергают фермент гидролизу и соед с др ДНК(вектор для клонир-я,клонирующ вектор)с образ новой,рекомбинантной молек.Обр-ся новая рекомбинант молекула:конструкция “клонирующий вектор-встроенная ДНК”.2)Эту конструкцию вводят в кл-хозяина(реципиент),она реплицир-ся и перед-ся по наследству при делении-трансформация.3)Отбирают кл,несущие рекомбин-ю ДНК(трансформиров-е кл).4)Получ специфич белков продукт,синтезир кл-хозяевами,что служит подтверждением клонирования искомого гена.Успех молекул клонир зависит:1)от возможн разрезать молек ДНК на фрагменты опред р-ра.2)от способа их целенаправ-го транспорта.3)от высокоспецифич отбора кл с клонированным геном и возможн индукции его экспрессии.Для точного разрезания молек ДНК использ высокоспециф ферм рестриктазы-это эндонуклеазы бакт,кот относ.ко 2-му типу и служат для разруш чужеродн ДНК.Рестриктазы разруш обе цепи в участках полиндрома.Рестриктазы 2-х типов:1)катализируют косое расщеп двойной спирали ДНК с образ липких концов.2)катализ-ют перпендикулярный разрыв с обр “тупых концов”,клонирован гены путем микроинъекции вводят в я/кл и из них выращ жив и раст,в геном кот встроены клонир-е гены.Клеточная инженерия-метод культивир-я изолиров кл и тк на искусств пит среде в регулир-ых услов-х.Возможн благод спос растит кл в рез регенерации формировать целое раст из единичн кл.Условия регенер разраб для культ раст-картофеля,пшеницы,томатов.Работа с этими объектами-возможн исп в селекции нетрадиц методов кл инженерии-соматической гибридизации,гаплоидии,кл селекции, преодаления нескрещ-ти в культуре.

23 МНОГОКЛЕТОЧНЫЕ организмы, животные (Мег.агоа), растения (Ме(;арЪу-1а) и грибы, тело к-рых состоит из мн. клеток и их производных (разл. виды межклеточного вещества). Характерный приз­нак М.—качеств, неравноценность клеток, слагающих их тело, их дифференцировка и объединение в комплексы разл. слож­ности (ткани и органы), выполняющие разные функции в целостном организме. Для М. характерно также индивидуаль­ное развитие (онтогенез), начинающееся в большинстве случаев (исключая веге­тативное размножение) с деления одной клетки (зиготы, споры). Тенденции к пе­реходу в многоклеточное состояние воз­никали в процессе эволюции у простей­ших, водорослей и бактерий (многоядер-ность, колониальность и т. п.), но б. ч. остались незавершёнными. Существуют разл. гипотезы происхождения М. (напр., гастреи теория, фагоцителлы теория и ряд др.), однако единого мнения по этому вопросу нет. Наиб, вероятно, что М. возникли впервые в результате услож­нения организации нек-рых колониаль­ных простейших (жгутиконосцев). Иско­паемые остатки низших М. (напр., гу­бок) известны с кембрия.

ГАСТРЕИ ТЕбРИЯ, теория, согласно к-рой строение предковой формы много­клеточных животных повторяется на ранних стадиях онтогенеза (стадии бла­стулы и гаструлы) у совр. многоклеточных животных. Сформулирована Э. Гекке-лем в 1872. Согласно Г. т., предками всех многоклеточных животных являются колониальные простейшие, к-рые обра­зуют однослойную сферич. колонию, по­добную бластуле,— бластею. Дальней­шая эволюция идёт аналогично инваги­нации в процессе эмбрионального разви­тия нек-рых совр. многоклеточных живот­ных, путём впячивания передней стенки внутрь. Это приводит к образованию дву­слойного многоклеточного организма, по­добного гаструле,— гастреи. Внутр. слой клеток — энтодерма — окружает внутр. полость, к-рая открывается наружу бла-стопором. Строение гастреи сходно с та­ковым кишечнополостных, к-рых рассмат­ривают, согласно Г. т., как предковую форму многоклеточных животных. Су­ществуют и др. представления о предко­вой форме многоклеточных животных, напр. тнор Фагоцителлы.

Фагоиителлы теория- гипотеза происхождения многоклеточных животных, предложенная И. И. Мечниковым. Согласно Ф. т. исходной формой многоклеточных является гипотетическое животное - фагоцителла (др. название =;паренхимелла) Ф. состоит (подобно личинке современных низших многоклеточных = паренхимуле) из слоя поверхностных клеток = эктодермы, или кинобласта. и внутренней клеточной массы = паренхимы, или фагоцитобласта. Кинобласт выполняет функции отграничения, внешнего обмена и движения: фагоцитобласт = внутреннего обмена, внутриклеточного пищеварения Из кннобласта и фагоцитобласта в ходе эволюции возникло всё многообразие форм тканей многоклеточных животных организмов.

3)Захваткин-проц дробления яйца идет за счет делен яиц без стадии роста. Онтогенетич стадии всех включ не все органы а только их свободноплав личинки

4)Иохансана многоклет жив произош от одноклет инфуз.