Раздел 3. Вирусология

План лекций

Тема	Дата	Лектор
Вирусы- возбудители гриппа, парагриппа, ОРВИ
Энтеровирусы
Вирус гепатита В
Вирусы - возбудители бешенства и клещевого энцефалита.
Герпесвирусы. Вирусы -возбудители медленных инфекций.
Онкогенные вирусы. ВИЧ.
Клиническая микробиология

План практических занятий

Тема	№ занятий
Вирусы - возбудители гриппа, парагриппа, ОРВИ, паротита, кори	14
Энтеровирусы -возбудители полиомиелита, ЕСНО, Коксаки и вирусных гепатитов	15
Вирусы - возбудители клещевого энцефалита и бешенства	16
Герпесвирусы и ретровирусы (возбудители герпеса, ветряной оспы, опоясывающего лишая,цитомегаловирусы,вирус Эпштейн-Барра, СПИДа)	17
Коллоквиум (зачетное занятие)	18

Занятие № 14 тема: «Возбудители гриппа, парагриппа, орви, паротита и кори»

ЦЕЛЬ: изучитьбиологические свойства возбудителей; познакомиться с эпидемиологией, патогенезом, иммунитетом, диагностикой, специфической профилактикой и лечением вызываемых ими заболеваний.

№	Содержание занятия	Литература по теме
1	Биологические свойства возбудителей гриппа, парагриппа, паротита, кори, ОРВИ	1.Лекция «Возбудители гриппа...»
2	Эпидемиология, патогенез, иммунитет, диагностика, специфическая профилактика и лечение.	2.Л.Б.Борисов, учебник, 1994,с.402-413
3	Практическая работа	3.В.Д.Тимаков, учебник, 1983, с.403-413 4.А.Г.Букринская, учебник, 1986, с.259-271, 274-288 5.Л.Б.Борисов, практикум, 1984, с.230-239 6.М.П.Зыков, практикум, 1977, с.259-274

ДОМАШНЕЕ ЗАДАНИЕ

Грипп -острая массовая вирусная инфекция с воздушно-капельным путем передачи, характеризуется сочетанием сравнительно лекгких воспалительных явлений в верхних дыхательных путях с более тяжелыми и длительными явлениями общей интоксикации. Периодически принимает эпидемическое и даже пандемическое расппространение.

Парагрипп - острое респираторное заболевание, вызываемое вирусами парагриппа; характеризуется повышением температуры тела, умеренно выраженной общей интоксикацией, частым поражением гортани и бронхов.

Паротит - острое инфекционное заболевание, характеризующееся лихорадкой, общей интоксикацией, поражением околоушных слюнных желез, возможным поражением другихорганов и нервной системы.

Корь - острое вирусное заболевание, характеризующееся лихорадкой, интоксикацией, своеобразной сыпью, поражением коньюнктивы и верхних дыхательных путей.

ОРВИ - острые вирусные заболевания, характеризующиеся преимущественно поражением верхних отделов дыхательных путей. Вызываются широким кругом возбудителей (аденовирусами, пикорнавирусами, респираторно-синтициальными и другими вирусами).

Биологические свойства возбудителей гриппа, парагриппа, поротита, кори и ОРВИ.

1.1.Вирус гриппа впервые выделен в 1933 году Смит, Эндрюс, Лейдлоу от больныхгриппом людей, в 1931 Шон выделил его от диких свиней.

1.2.Вируспарагриппа был выделен в США в 1956-58 гг. путем посева смыва с носоглотки в культуру клеток почек обезъян Чапеком (материал взят от больных детей с гриппоподобным заболеванием).

1.3.Основные свойства возбудителей гриппа и парагриппа

Признаки	Возбудители
	гриппа	парагриппа
А.Таксономия
семейство	Ortomyxoviridae	Paramyxoviridae
род		Paramyxovirus
тип	A, B, C
Б.Морфология
размеры (нм)	80-120 нм, средние	150-250 нм,крупные
форма	сферическая	сферическая
тип симметрии	спиральный	спиральный
организация	сложная	сложная
В.Геном	1-цепочная (-) нить РНК сегментирована	1-нитевидная(-) нить РНК
Г.Антигены	1.Типоспецифические 2.Штаммоспецифические	S и V (нуклеотидный и поверхностный)
Д.Методы культивирования	1.В куриных эмбрионах 2.В клеточных культурах 3.В организме лабораторных животных	Первично трипсинированная клеточная культура из почек обезъян, реже в куриных эмбрионах

1.4.Основные биологические свойства возбудителей паротита и кори

Признаки	Возбудители
	паротита	кори
А.Таксономия:
семейство	Paramyxoviridae	Paramyxoviridae
род	Paramyxovirus	Morbillivirus
Б.Морфология
размеры (нм)	150-200 нм (крупные)	150-200 нм (крупные)
форма	сферическая	сферическая
тип симметрии	спиральный	спиральный
организация	сложный	сложный
В.Геном	1-спираль(-) нить РНК	1-нитч.(-) РНК
Г.Антигены	S и V, у некоторых HA и NA	S, V, HA
Д.Методы культивирования	1.Первично трипс.КК эмбри.японск.перепелок, почек обезъян 2.Перевиваемые КК HeLa 3.Куриные эмбрионы (хуже)	Различные первичные и перевиваемые клеточные культуры (HeLa, Hep-2, KB, Vero)

2.Эпидемиология, патогенез, иммунитет, диагностика, специфическая профилактика и лечение

2.1.Эпидемиология, патогенез, иммунитет, диагностика, специфическая профилактика и лечение гриппа и парагриппа.

Признаки	Возбудители
	гриппа	парагриппа
А.Эпидемиология:
источник	больной	больной
пути передачи	воздушно-капельный	воздушно-капельный
Б.Постинфекционный иммунитет	Типоспецифический (А- до 2-х лет, В - до 5-ти, С- пожизненный)	Нестойкий, непродолжительный
В.Основной метод диагностики	Вирусоскопический Серологический	Вирусоскопический Серологический (РИФ,РСК, РТГА, РИ)
Г.Специфическая профилактика	Вакцины живые,убитые, субъединичные	Не разработана
Д.Специфическая терапия	Противогриппозный иммуноглобулин	Не разработана

Вакцины:

1.Сухая гриппозная живая вакцина - аллонтоисная жидкость,полученная при культивировании вирусов гриппа типов А и В. Вводится интраназально лицам старше 16 лет.

2.Вакцина гриппозная инактивированная -лицам страше 11 лет

3.Вакцина Смородинцева - полученая из умеренно антигенных штаммов, дается per os, через 2-3 недели вводится повторно интраназально.

2.4.Эпидемиология, патогенез, иммунитет,диагностика, специфическая профилактика и лечение паротита и кори.

Признаки	Возбудители
	паротита	кори
А.Эпидемиология
источник инфекции	больной	больной
пути передачи	воздушно-капельный, контактный	воздушно-капельный, контактный
Б.Постинфекционный иммунитет	Пожизненный	Пожизненный
В.Основной метод диагностики	Вирусоскопический, серологический	Вирусоскопический, серологический
Г.Специфическая профилактика	Вакцины: живая паротитная, живая ассоциированная с коревой	Живая коревая вакцина
Д.Специфическая терапия	Паротитный иммуноглобулин	Противокоревой иммуноглобулин

ПРАКТИЧЕСКАЯ РАБОТА

Задание №1. Вирусологическое исследование носоглоточного смыва при подозрении на грипп.

1-й этап. Заражение куриного эмбриона вируссодержащим материалом (носоглоточный смыв, обработанный антибиотиком и центрифугированный).

а) скорлупу яйца над воздушным мешком обрабатывают 2% настойкой йода, протирают спиртом и фломбируют;

б) в стерильный шприц набирают вируссодержащий материал;

в) для заражения аллантоисной полоости иглу шприца погружают на 10-15 милиметров отповерхности скорлупы,параллельно продольной оси яйца и вводят 0,2 мл вируссодержащего материала;

г) зараженные куриные эмбрионы инкубируют при 35-37^оС в течение 48-72 часов.

Задание №2 Разбор демонстрационных реакций: РСК (определение принадлежности к типам А, В, С) и РТГА (определение разновидностей по гемагглютинину и нейраминидазе).

РСК (реакция связывания комплемента)

Компоненты реакции:

1)фосфатно-буферный раствор (рН 7,0-7,2);

2)исследуемый вирус (антиген);

3)иммунные сыворотки (типы А, В, С);

4)комплемент

5)гемолитическая система (взятые в равных объемах эритроциты барана и гемолитическая сыворотка)

Резудьтат: реакция положительная (гемолиз отсутствует) с сывороткой А в развелении 1:80.

Вывод: исследуемый материал содержит антиген, специфичный для вируса гриппа типа А.

РТГА (реакция торможения гемагглютинации)

Компоненты реакции

1)взвесь эритроцитов петуха;

2)исследуемый материал (подозрительный на наличие вирусных частиц):

3)типоспецифические противогриппозные иммунные сыворотки:

4)изотонический раствор натрия хлорида.

Типовые сыворотки	Разведения сывороток					Контроли
	1:10	1:20	1:40	1:80	1:160	КА	КС	КЭ
N1H1	+	+	+	+	+	0	+	0
N2H1	+	+	+	+	+	0	+	0
N3H1	0	0	0	0	0	0	+	0

Результаты: реакция положительна (агглютинация отсутствует) с сывороткой N₃H₁.

Вывод: исследуемый материал содержит антиегны, специфичные для вируса гриппа типа А (N₃H₁).