Опыт №1. Влияние температуры на активность

а -АМИЛАЗЫ СЛЮНЫ

Под влиянием фермента амилазы слюны крахмал гидролизустся сначала до декстринов, затем до дисахарида — мальтозы и под действием фермента мальтозы — до глюкозы.

Крахмал образует — с иодом синее окрашивание, декстрины — разную окраску в зависимости от их сложности; амилодекстрины - фиолетовую, эритродекстрины - краснобурую, ахродекстрины - желто-бурую. Отсутствие окраски указывает на образование мальтозы или глюкозы.

ХОД РАБОТЫ, В три пробирки наливают по 5 мл 1 % раствора крахмала

В пробирку № 1 добавляет 2-3 мл предварительно прокипяченной слюны

В пробирку № 2 и №3 добавляют 2-3 мл разбавленной, но непрокипяченной слюны. Перемешивают содержимое пробирок и ставят пробирки № I и № 2 в водяную баню при температуре 38-40 °С Пробирку № 3 ставят в сосуд со льдом. Через 15 минут во все пробирки добавляют по 2-3 капли раствора йода в йодистом калии

Наблюдают изменение окраски и делают вывод

Опыт №2. Влияние рН среды на действие

а-АМИЛАЗЫ СЛЮНЫ

Изменение пространственного расположения активных участков молекулы фермента пол влиянием рН приводит к изменению активного центра фермента и изменению скорости ферментативной реакции

ХОД РАБОТЫ', В три пробирки наливают 0,2 М раствор двузамещенного фосфорнокислого натрия и 0,1 М раствор лимонной кислоты в соотношениях, указанных а таблице. Получают буферные растворы со значением рН - 4,0, 6,8, 10,0. В каждую пробирку добавляют по 5 ил 1% раствора крахмала и по I мл разбавленного раствора слюны в 5 раз Содержимое перемешивают и ставят в баню на 15 минут. Затем во все пробирки добавляют 1-2 капли йода в йодистом калии.

НАБЛЮДАЮТ ОКРАШИВАНИЕ И ОПРЕДЕЛЯЮТ рН, ПРИ КОТОРОМ АМИЛАЗА ДЕЙСТВУЕТ НАИБОЛЕЕ АКТИВНО.

Таблицы:

I. ВЛИЯНИЕ ТЕМПЕРАТУРЫ НА АКТИВНОСТЬ ФЕРМЕНТОВ (термолабильность)

пробы	Субстрат крахмала 1%	Амилаза, фермент слюны 1.3	Т°С	Цвет йодной пробы
				до бани	после бани
1	5 мл	1 мл	100°
2	5 мл	1 мл	38°
3	5 мл	1 мл	0°

2.Влияние реакции среды рН на активность

АМИЛАЗЫ

№ пробы	р 1Нр	Соль Na2HPO<0.2 М	Лимонная кислота С 6 Н8 О7, 0,1 М	Субстрат крахмала 1%	Фермент амилаза слюны 1-3	Цвет 1 иодной пробы
	44,0	0,38	0,62	5мл	1мл
	66,8	0,77	0,23	5мл	1мл
	110	1мл + 1капля NaOH 0,1н	-	5мл	1мл

Лабораторная работа по теме: «ГОРМОНЫ»