13.Выделение, идентификация и титрование бактериофагов

13.1.Выделение бактериофага осуществляется путем фильтрации исследуемого материала (содержащего фаг) через бактериальные фильтры или обработка его хлороформом для освобождении его от бактерий и грибов.

13.2.Индикация и идентификация бактериофагов. Качественные пробы на бактериофаг.

А.Проба Отто. Сущность метода – доказательство присутствия фага – в месте попадания фага роста чувствительной культуры, появление мелких стерильных пятен (негативных колоний фага)

Б.Двухслойный метод Грациа – на питательный агар наносят расплавленный агар с исследуемым материалом и чувствительной культурой. После инкубации о присутствии фага судят по наличию прозрачных пятен на фоне глубинного роста бактерий

В.Метод Фишера (метод фаговых дорожек) – отсутствие роста чувствительной культуры в месте стекания капли с исследуемым фагосодержащим материалом

13.3.Определение количества фага (титрование)

а.титр бактериофага – максимальное разведение фагосодержащего материала, при котором отмечается лизис чувтвительных бактерий

б.индекс фага – количество бактериофага, содержащегося в единице объема материала (БОЕ/мл)

13.4.Титрование фага в жидкой среде по Аппельману – в ряд пробирок вносят кратные разведения фагосодержащего материала и индикаторную чувствительную культуру, после инкубации учитывают результат – отсутствие роста означает присутствие фага и результат (+), рост чувствительной культуры свидетельствует об отсутствии фага, результат (-).

13.5.Метод агаровых слов по Грациа

В пробирки с расплавленным агаром вносят индикаторную культуру и 1 мл (деляют кратные разведения) фагосодержащего материала. После инкубации подсчитывают число негативных колоний фага и делают пересчет на 1 мл неразведенного исследуемого материала.

ПРАКТИЧЕСКАЯ РАБОТА

Посев фекалий на среды Эндо, Левина, Плоскирева

Подпись преподавателя

Занятие № 5

ТЕМА «Метаболизм бактерий. Питание микроорганизмов. Ферменты бактерий»

1. Определение понятия «метаболизм бактерий»

1.1.Метаболизм –

1.2.Энергетический метаболизм (катаболизм) –

1.3.Конструктивный метаболизм (анаболизм) –

2.Типы питания бактерий. Факторы роста

2.1.Классификация бактерий по типу питания

По источнику углерода	По источнику питания	По донору электронов
1.Автотрофы – 2.Гетеротрофы – а)сапрофиты – б) паразиты –	1.Фототрофы – 2.Хемотрофы –	1.Литотрофы – 2.Органотрофы –

2.2.Прототрофы –

Ауксотрофы –

2.3.Факторы роста –

1. 2.

3. 4.

3.Механизм поступления питательных веществ в бактериальную клетку

- пассивная диффузия –

-облегченная диффузия –

-активный транспорт –

• транслокация –