Тема 3. Углеводы Занятие 1. Лабораторно-практическое занятие «Методы биохимических исследований. Рефрактометрия»

3 часа

Цель: изучить особенности рефрактометрического метода, устройство и принцип действия прибора; провести экспериментальные определения с помощью данного метода.

Основная литература:

1. Филлипович С.Б., Ковалевская Н.И., Севастьянова Г.А. Биологическая химия: учебное пособие для вузов. М.: Академия, 2005. – 254 с.

2. Проскурина И.К. Биохимия: Учебное пособие для вузов. – М.: ВЛАДОС-Пресс, 2003. – 235с.

3. Филлипович С.Ю., Коничев А.С., Севастьянова Г.А., Кутузова Н.М. Биохимические основы жизнедеятельности человека: учебное пособие для вузов. – М.: ВЛАДОС, 2005 г. – 404с.

4. Опарина С.А. Биохимия и основы биорегуляции организмов: Учебно-методическое пособие. - Арзамас: АГПИ, 2009. – 144 с.

Дополнительная литература:

1. Иоффе Б. В.Рефрактометрические методы химии, 3 изд., Л., 1983.- С.3-63.

2. Ляликов Ю.С. Физико-химические методы анализа. М., "Химия", 1973.- С.124-140.

Методические рекомендации к занятию

При подготовке к семинару студенты должны

знать:

- сущность рефрактометрии, области применения этого метода;

-устройство и принцип работы рефрактометра.

Работа проводится студентами полностью самостоятельно: сначала изучается теоретический материал, затем следует экспериментальная часть исследования.

План занятия

I.ТЕОРЕТИЧЕСКИЙ ПРАКТИКУМ

1. Принцип работы рефрактометра.

2. Устройство прибора.

3. Правила работы с рефрактометром.

4. Приведение прибора в рабочее состояние.

5. Методика определения сухих веществ в соке овощей, плодов и ягод при помощи рефрактометра.

6. Методика определения общего белка сыворотки крови.

7. Методика определения показателя преломления растительных масел.

II. ЛАБОРАТОРНЫЙ ПРАКТИКУМ

Выполнение лабораторной работы «Методы биохимических исследований. Рефрактометрия» из [4], с.56-62.

Вопросы и задания для самоконтроля

1.Напишите формулы глюкозы в виде формул Фишера, Колли-Толленса, Хеуорза. Обосновать отличия. Привести примеры энантиомеров, аномеров, эпимеров глюкозы.

2. Напишите формулы трех видов кислот, образующихся при окислении глюкозы. Обосновать отличия. Указать окислители.

3. Дисахарид лактоза, состоящий из галактозы и глюкозы, существует в двух аномерных формах, для обозначения которых используют буквы α и β. Эти аномеры значительно различаются по свойствам. Так, например, β - аномер слаще на вкус и обладает лучшей растворимостью по сравнению с α - аномерами; из-за этого при длительном хранении мороженого в холодильнике может произойти кристаллизация α-аномера, и тогда мороженое становится рассыпчатым.

а) Нарисуйте проекционные формулы Хеуорса двух аномерных форм лактоз.

б) Нарисуйте проекционные формулы Хеуорса для всех веществ, образующихся в результате гидролиза α - аномера до галактозы и глюкозы. Сделайте тоже cамое для β - аномера.

4. Напишите продукты окисления и восстановления D-галактозы. Назвать соединения.

5. Напишите формулы энантиомеров маннозы. Объясните, чем они отличаются. Напишите уравнение реакции маннозы с гидроксидом меди (II) при t⁰С. Назовите продукты реакции. Рассмотрите данную реакцию как ОВР.

6. Напишите формулу гликогена из 4-5 структурных единиц, укажите тип связи. Под действием каких ферментов происходит полный гидролиз гликогена? Напишите уравнение реакций. Укажите классификацию ферментов.

7. Напишите формулу хитина, укажите структурную единицу, тип связи, биологическое значение.

8. При обработке 1 г препарата целлюлозы периодатом образо­валось 0,001 ммоль муравьиной кислоты. Рассчитайте среднее число остатков глюкозы в молекулах целлюлозы, содержащихся в препарате, если известно, что при окислении целлюлозы периодатом из ее кон­цевого невосстанавливающегося глюкозного остатка образуется 1 моль муравьиной кислоты, из концевого восстанавливающего остатка - 2 моль муравьиной кислоты, при окислении промежуточных звеньев происходит разрыв связи между вторым и третьим атомами углерода каждого глюкозного остатка, но муравьиная кислота не образуется.