Занятие 2. Лабораторно-практическое занятие «Определение активности каталазы (по а.Н. Баху и а.И. Опарину)

3 часа

Цель работы: экспериментально определить активность каталазы в различном растительном материале.

Оборудование: колбы, водяная баня, термометр, стеклянные палочки, предметные стекла, воронки, фильтры, бюретки (микробюретки), термостат.

Реактивы: растительный материал, 1 проц. раствор перекиси водорода, 0,1н раствор перманганата калия, 10 проц. раствор серной кислоты.

Основная литература:

1. Филлипович С.Б., Ковалевская Н.И., Севастьянова Г.А. Биологическая химия: учебное пособие для вузов. М.: Академия, 2005. – 254 с.

2. Проскурина И.К. Биохимия: Учебное пособие для вузов. – М.: ВЛАДОС-Пресс, 2003. – 235с.

3. Филлипович С.Ю., Коничев А.С., Севастьянова Г.А., Кутузова Н.М. Биохимические основы жизнедеятельности человека: учебное пособие для вузов. – М.: ВЛАДОС, 2005 г. – 404с.

4.Опарина С.А. Биохимия и основы биорегуляции организмов: Учебно-методическое пособие. - Арзамас: АГПИ, 2009. – 144 с.

Дополнительная литература:

1. Основы биохимии: Учебник для студ. биол. спец. универ. /А.А. Анисимов, А.Н.Леонтьева, И.Ф. Александрова и др. – М.: Высшая школа, 1986. – С. 133-171.

2. Грин Н. Биология в 3-х томах / Н. Грин, У. Стаут, Д. Тейлор. – М.: Мир, 1993.- С.195-210.

3. Ленинджер А. Л. Основы биохимии в 3-х томах. – М.: Мир, 1985.- Т1- С.226-269.

4.Марри Р. Биохимия человека в 2-х томах. Мари Р., Греннер Д. и др. – М.: Мир, 1993. - Т1 – С.63-95.

5. Березов Т.Т. Биологическая химия / Т.Т. Березов, Б.Ф Коровкин. – М.: Москва, "Медицина", 2007 г.- С.75-110.

Методические рекомендации к занятию

При подготовке к занятию студенты должны

знать:

- особенности строения, физико-химических свойств ферментов на примере каталазы;

- сущность и особенности перманганатометрии.

уметь:

- записывать уравнения реакций, лежащих в основе данной работы;

- расставлять коэффициенты в ОВР методом полуреакций.

План занятия

1. ТЕОРЕТИЧЕСКИЙ ПРАКТИКУМ

1. Особенности строения и биологической роли каталазы.

2. Сущность и особенности перманганатометрии.

3. Уравнения реакций, лежащие в основе работы.

II. РЕШЕНИЕ ЗАДАЧ

Решение задач из [4] № 3-6, с.49-50.

III. ЛАБОРАТОРНЫЙ ПРАКТИКУМ

Выполнение лабораторной работы «Определение активности каталазы (по А.Н. Баху и А.И. Опарину)» из [4], с.45-48.

Вопросы и задания для самоконтроля

1. В желудочно-кишечный тракт с белковой пищей поступили пептиды следующего состава:

1 2 3 4 5 6

Ала – Тре – Тир – Сер – Арг – Иле – Вал.

А. Какие связи расщепляются приведенными ниже ферментами: пепсин, трипсин, химотрипсин, карбооксипептидаза, аминопептидаза.

Б. Укажите место синтеза для каждого фермента.

В. Продукты, которые образуются в результате совместного действия ферментов, и их дальнейшую судьбу в ЖКТ.

2. Напишите уравнения реакций декарбоксилирования лизина и щавелевоуксусной кислоты и отметьте особенности ферментов, ка­тализирующих данные процессы.

3. Количество распавшегося под действием каталазы пероксида водорода соответствует 14,7 мл 0,1 н. раствора перманганата калия. Вытяжка каталазы, взятая для опыта в количестве 20 мл, была при­готовлена из 0,25 г моркови. Опыт проводили в течение 30 мин. Опре­делите активность фермента, содержащегося в 1 г моркови.

4. Напишите уравнение реакции, катализируемой ферментом ацетилхолин- эстеразой. Объясните роль этой реакции в организме животных.

5. Напишите уравнение реакции, на котором основано промышленное производство L-лизина.

6. Относительная молекулярная масса фосфопируваткарбоксилазы равна 400 000. Рассчитайте молекулярную активность фермента, если известно, что его удельная активность составляет 1,2 • 10³ Е.

7. Рассчитайте удельную активность каталазы (М_r = 252 000) и лактатдегидрогеназы (M_r = 140 000), если известно, что молекуляр­ная активность этих ферментов при температуре 25 °С, оптимальном рН и полном насыщении субстратом равна 5 • 10⁶ и 3,7 • 10⁴ соответ­ственно.