Тема 1.3. Морфология микроорганизмов. Ультраструктура бактериальной клетки

Задание № 1. Заполните таблицу:"Морфология бактерий. Основные и дополнительные структуры бактериальной клетки. Их назначение".

Табл. № 1

Структуры бактериальной клетки	Их назначение
Основные
Микрокапсула
2. Клеточная стенка
3. Цитоплазматическая мембрана (ЦПМ)
4. Цитоплазма
5. Ядерное вещество
6. Включения
7. Рибосомы
Дополнительные
1. Капсулы
2. Пили
3. Жгутики
4. Споры

Табл. № 2

Задание № 2. Заполните таблицу "Общая характеристика основных групп микроорганизмов»

Группа (класс)	Царство	Единицы из­мерения (мкм или нм)	Наличие или от­сутствие клеточ­ной стенки- (+) или (-)	Паразитизм (облигатный или факультативный)
1. Бактерии
2. Спирохеты
3. Риккетсий
4. Актиномицеты
5. Хламидии
6. Микоплазмы
7. Грибы
8. Простейшие
9. Вирусы

Задание № 3. Ознакомьтесь с этапами приготовления мазка и окраски по Граму, запомните их. Используйте данный алгоритм при окраске мазков на практическом занятии.

ЭТАПЫ ПРИГОТОВЛЕНИЯ МАЗКА.

1. Обезжиривание стекла: предметное стекло натирают кусочком мыла, а затем марлевой салфеткой с обеих сторон.

2. Нанесение материала: положить стекло на стол, при помощи пипетки нанести каплю физ. раствора на стекло, в нее поместить исследуемый материал (зубной налет, налет с языка, миндалин, задней стенки глотки и др.). Равномерно ее растереть тонким слоем величиной с 1-2 копеечную монету. Держа левой рукой предметное стекло (за ребрышки), обвести границы мазка с обратной стороны маркером.

3. Высушивание мазка: производят или при комнатной температу­ре или над пламенем горелки до полного исчезновения влаги.

4. Фиксация:

физический способ - 2-3 раза проносим мазок через середину пламени спиртовки.(2-3 сек.)

химический способ-мазок опускают трехкратно в смесь Никифорова (пол объема эфира и пол объема спирта).

Окраска по Граму

Оснащение:

- набор красителей ( бумага по Синеву или раствор генцианового фиолетового, раствор Люголя, спирт 96 град., фуксин Пфейффера)

- готовые препараты

- лоток с рельсами

-пинцет

-фильтровальная бумага

Цель: это универсальный метод окраски, позволяющий разделить все микробы на Грам-положительные и Грам-отрицательные.

Этапы:

1. На мазок положить бумажку по Синеву и нанести несколько капель воды или на препарат сразу нанести раствор генцианового фиолетового 1—2 мин. Снять бумагу или слить в лоток краситель.

2. Не промывая водой, нанести раствор Люголя до почернения (1 мин), затем краситель слить.

3. Не промывая водой, нанести 96% спирт до отхождения красителя (30—60 сек).

4. Промыть препарат водой.

5. Докрасить фуксином Пфейффера 3 мин, промыть водой и высушить фильтровальной бумагой.

Результат окраски.

В зависимости от результатов окраски все микроорга­низмы делят на две группы — грамположительные и грамотрицательные.

Грамположительные бактерии имеют толстую кле­точную стенку, т.к. содержат много пептидогликана (муреина), который образует комплексное соединение с йодом и основным красителем (генциановым фиолето­вым). Этот комплекс не разрушается при действии спирта, и бактерии сохраняют фиолетовый цвет.

Грамотрицательные бактерии –тонкостенные, т.к. содержат мало пептидогликана и не способны удержать основной краситель. Под действием спирта краситель вымыва­ется, клетки обесцвечиваются и окрашиваются дополни­тельным красителем (фуксином) в красный цвет.